發(fā)布時間：2021-04-05 21:50

　　目的建立一種實時熒光逆轉(zhuǎn)錄重組酶介導(dǎo)的等溫擴(kuò)增（reverse transcription recombinase-aided amplification,RT-RAA）技術(shù)檢測寨卡病毒（Zika virus,ZIKV）的方法,以實現(xiàn)ZIKV的現(xiàn)場快速篩查及診斷。方法通過基因組序列比對,選擇ZIKV保守序列設(shè)計RT-RAA特異性引物和探針,并用系列稀釋的ZIKV重組質(zhì)粒與毒株核酸驗證方法的靈敏性與重復(fù)性,通過檢測登革病毒、基孔肯雅病毒、西尼羅病毒等其他蟲媒病毒驗證方法的特異性。結(jié)果建立的RT-RAA方法可在39 ℃恒溫條件下30 min內(nèi)對ZIKV進(jìn)行高效擴(kuò)增,檢測系列稀釋的ZIKV重組質(zhì)粒,其95%檢測限可達(dá)到15拷貝/反應(yīng),特異性強,與登革病毒、基孔肯雅病毒、西尼羅病毒蟲媒病毒無交叉反應(yīng),且重復(fù)性好。結(jié)論本研究建立的ZIKV的RT-RAA等溫擴(kuò)增方法,具有反應(yīng)迅速,無需精密儀器,操作簡單等優(yōu)點,適合于應(yīng)急快速檢測。 

【文章來源】：國際病毒學(xué)雜志. 2020,27(03)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3120165