目的建立一種實(shí)時(shí)熒光逆轉(zhuǎn)錄重組酶介導(dǎo)的等溫?cái)U(kuò)增（reverse transcription recombinase-aided amplification,RT-RAA）技術(shù)檢測(cè)寨卡病毒（Zika virus,ZIKV）的方法,以實(shí)現(xiàn)ZIKV的現(xiàn)場(chǎng)快速篩查及診斷。方法通過(guò)基因組序列比對(duì),選擇ZIKV保守序列設(shè)計(jì)RT-RAA特異性引物和探針,并用系列稀釋的ZIKV重組質(zhì)粒與毒株核酸驗(yàn)證方法的靈敏性與重復(fù)性,通過(guò)檢測(cè)登革病毒、基孔肯雅病毒、西尼羅病毒等其他蟲(chóng)媒病毒驗(yàn)證方法的特異性。結(jié)果建立的RT-RAA方法可在39 ℃恒溫條件下30 min內(nèi)對(duì)ZIKV進(jìn)行高效擴(kuò)增,檢測(cè)系列稀釋的ZIKV重組質(zhì)粒,其95%檢測(cè)限可達(dá)到15拷貝/反應(yīng),特異性強(qiáng),與登革病毒、基孔肯雅病毒、西尼羅病毒蟲(chóng)媒病毒無(wú)交叉反應(yīng),且重復(fù)性好。結(jié)論本研究建立的ZIKV的RT-RAA等溫?cái)U(kuò)增方法,具有反應(yīng)迅速,無(wú)需精密儀器,操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn),適合于應(yīng)急快速檢測(cè)。 

【文章來(lái)源】：國(guó)際病毒學(xué)雜志. 2020,27(03)

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3120165