膿毒癥是因宿主對(duì)感染的反應(yīng)失調(diào)而導(dǎo)致的危及生命的器官功能障礙,是臨床上急危重患者常見(jiàn)的嚴(yán)重并發(fā)癥,可進(jìn)展為重癥膿毒癥、膿毒癥休克,最終導(dǎo)致死亡。多種機(jī)制參與膿毒癥的發(fā)生與發(fā)展。其中氧化應(yīng)激作為膿毒癥發(fā)展成重度膿毒癥、膿毒癥休克的重要原因,近年受到國(guó)內(nèi)外學(xué)者的重視。目的:研究外源性硫化氫（H₂S）對(duì)膿毒癥巨噬細(xì)胞氧化還原平衡的影響。方法:培養(yǎng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞株J774,分為A組:緩沖液（PBS）（1ml/ml）;B組:脂多糖（LPS）（1μg/ml）;C組:炔丙基甘氨酸（PAG）（1mmol/L）+LPS（1μg/ml）;D組:GYY4137（500μmol/L）;E組:GYY4137（500μmol/L）+LPS（1μg/ml）。ELISA測(cè)定各組細(xì)胞培養(yǎng)上清中活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）的含量及細(xì)胞上清中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）、過(guò)氧化氫酶（CAT）的活性,用透射電鏡觀察各組細(xì)胞中線粒體數(shù)量及形態(tài)的變化。結(jié)果:B組ROS濃度為90.293±0.217IU/ml,MDA為1.665±0.068nmol/ml,SOD為89.... 

【文章來(lái)源】：蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

GYY4137釋放H2S機(jī)理圖

盒說(shuō)明書要求，首先配置試劑，然后按照操作表進(jìn)：加樣→混勻→封板膜封板→5ml 空針針頭刺一小→流水冷卻→以雙蒸水調(diào)零→測(cè)量各孔的 OD 值（數(shù)據(jù)，記錄每組所測(cè) OD 值，將有明顯偏差的實(shí)驗(yàn)立 9 個(gè)復(fù)孔，至少存在 7 個(gè)復(fù)孔可用方為測(cè)定成功每組實(shí)驗(yàn)重復(fù) 3 次，求 3 次所測(cè) OD 值的均數(shù)及標(biāo)試劑盒說(shuō)明書中的計(jì)算公式中得出細(xì)胞上清液中的上清中超氧化物歧化酶（SOD）活力理如圖 2

表現(xiàn)為細(xì)胞懸浮，透亮度增加，細(xì)胞核濃縮，胞質(zhì)空泡化，而 E 組和 A 組細(xì)胞相比只發(fā)生輕度細(xì)胞質(zhì)脂肪化（圖3）。注：a：A 組（對(duì)照組）；b：E 組（GYY4137+LPS 組）；c：B 組（LPS 組）圖 3 光鏡下小鼠腹腔巨噬細(xì)胞形態(tài)（×200）2.小鼠腹腔巨噬細(xì)胞透射電鏡下形態(tài)透射電鏡下觀察到 B 組巨噬細(xì)胞線粒體數(shù)目較 A 組相對(duì)減少，線粒體形態(tài)發(fā)生腫脹、空泡化，嵴變寬、基質(zhì)濃縮，而 E 組和 A 相細(xì)胞相比只發(fā)生輕度的線粒體基質(zhì)濃縮（圖 4）。注：黑色箭頭所示為巨噬細(xì)胞內(nèi)線粒體 a：A 組（對(duì)照組）；b：E 組（GYY4137+LPS 組）；c：B 組（LPS 組）圖 4 透射電鏡下小鼠腹腔巨噬細(xì)胞線粒體形態(tài)（×10000）


本文編號(hào)：3040857