研究背景與目的膿毒癥是感染引起的全身炎癥反應(yīng)綜合征,本質(zhì)是機體對于感染反應(yīng)失調(diào)而引起的器官功能障礙。膿毒癥發(fā)病率和死亡率均很高,是兒科重癥監(jiān)護病房（PICU）的主要重癥和主要死亡原因之一。膿毒癥相關(guān)性腦病是由膿毒癥所致的彌散性腦功能障礙。腦是膿毒癥最早累及的臟器之一,在膿毒癥早期即可出現(xiàn)。IL-6是一種多功能性炎癥介質(zhì),同時具有抗炎、促進再生及促炎的雙向作用。AMPK主要調(diào)控細胞內(nèi)的代謝和能量平衡,被稱為“細胞能量調(diào)節(jié)器”。研究發(fā)現(xiàn)IL-6可通過增加一磷酸腺苷的濃度激活A(yù)MPK,而AMPK對線粒體生物發(fā)生和自噬存在調(diào)控作用。因此,本實驗擬探討IL-6對膿毒癥星形膠質(zhì)細胞線粒體生物發(fā)生的影響,并進一步驗證這種影響是否通過AMPK信號通路來實現(xiàn)的。研究方法第一部分:分離新生大鼠大腦皮質(zhì)星形膠質(zhì)細胞（AS）并純化培養(yǎng),將AS隨機分成對照組、脂多糖+干擾素-γ組（LPS+IFN-γ組）、LPS+IFN-γ+IL-6組（IL-6組）、LPS+IFN-γ+IL-6 受體小干擾 RNA+IIL-6 組（siRNA 組）、LPS+IFN-γ+陰性對照+IL-6組（NC組）5組,處理時間均為6小時。隨后... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１原代大鼠大腦皮質(zhì)星形膠質(zhì)細胞純度鑒定（ｘ２００）??Ａ：倒置顯微鏡明場下的大鼠大腦星形膠質(zhì)細胞

?ＷｅＶＷ－ｓｗ■丨??蕃?—?議?ｒ°°??ｒ?Ｉ?＿?Ｌ?＿??圖１－３各組星形膠質(zhì)細胞中ＴＮＦ－ａ?ｍＲＮＡ、ＩＬ－ｉｐ?ｍＲＮＡ及ＲＯＳ水平的比較??Ｆｉｇｕｒｅ?１－３?Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ?ｏｆ?ＴＮＦ－ａ?ｍＲＮＡ＞?ＩＬ－ｉｐ?ｍＲＮＡ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ａｎｄ?ＲＯＳ?ｌｅｖｅｌｓ?ａｍｏｎｇ?ｅａｃｈ??ｇｒｏｕｐ??Ａ：ＴＮＦ－ｃｔｍＲＮＡ和ＩＬ－ｉｐｍＲＮＡ的相對表達量。Ｂ：ＲＯＳ的水平比較。與對照組比較，ａＰ＜??０．０５。Ａ：?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ?ｏｆ?ＴＮＦ－ａ?ｍＲＮＡ?ａｎｄ?ＩＬ－ｉｐ?ｍＲＮＡ．?Ｂ：?Ｌｅｖｅｌｓ?ｏｆ?ＲＯＳ．?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ??ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ，?ａＰ?＜０．０５．??４各組原代星形膠質(zhì)細胞ＡＴＰ水平檢測結(jié)果??與對照組相比，其余４組的ＡＴＰ水平顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（尸＜??０．０５）；與ＬＰＳ＋ＩＦＮ－ｙ組相比，ＩＬ－６組ＡＴＰ水平升高（ＰＣ０．０５）；與ＩＬ－６組相比，??ｓｉＲＮＡ組ＡＴＰ水平下降（Ｐ＜０．０５），?ＮＣ組ＡＴＰ水平下降（Ｐ＜０．０５），見表１－２、??圖?１－４。??表１－２各組細胞內(nèi)ＡＴＰ水平的比較?Ｐ土ｓ）??Ｔａｂｌｅ?１－２?Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ?ｏｆ?ＡＴＰ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ａｍｏｎｇ?ｅａｃｈ?ｇｒｏｕｐ?（ｘ±ｓ）??２４??

與對照組相比，其佘４組細胞存活率均顯著下降（Ｐ＜０．０５）；而與ＬＰＳ＋ＩＦＮ－ｙ??組相比，ＩＬ－６組細胞存活率顯著升高（ＰＣ０．０５）；與ＩＬ－６組相比，ｓｉＲＮＡ組和??ＮＣ組細胞存活率均顯著下降（ＰＣ０．０５），見表１－４、圖１－６。??表１－４各組細胞的細胞存活率的比較?（￥±ｓ）??Ｔａｂｌｅ?１－４?Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ?ｏｆ?ｃｅｌｌ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ?ａｍｏｎｇ?ｅａｃｈ?ｇｒｏｕｐ?（尤?士ｓ）??組別?例數(shù)?細胞存活率（ｘ?１００％）??對照組?５?１．０００±０．００１??ＬＰＳ＋ＩＦＮ－ｙ組?５?０．８４０±０．０１３ａ??ＩＬ－６?組?５?ＯＳｌＯｉＯ＾８１５??ｓｉＲＮＡ?組?５?０．６８０±０．０４０ａｂｃ??ＮＣ?組?５?０．７４３±０．０２４ａｂｃ??Ｆ?值?１４１．５２１??Ｐ?值?０．０００??２７??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]饑餓誘導(dǎo)下小鼠成骨細胞自噬與凋亡相互作用研究[J]. 朱文胤,陳倩倩,劉祁,周云,晏燕,曹軍.  川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2015(02)
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本文編號：3013251