乙型肝炎病毒（hepatitis B virus, HBV）是引起病毒性肝炎的主要病原體之一,乙肝在全世界范圍內(nèi)廣泛流行,經(jīng)粗略估計,全世界約30%的人口血清學(xué)檢測顯示其曾經(jīng)或仍然處于乙肝病毒感染狀態(tài)。而在所有的肝癌患者中,半數(shù)是由于乙肝病毒感染所致。鑒于此,全球衛(wèi)生組織已將病毒性肝炎囊括進了重大公共衛(wèi)生優(yōu)先項目中。具有臨床意義的乙肝病毒蛋白主要包括乙肝核心抗原,乙肝e抗原和乙肝c抗原,其中乙肝e抗原（hepatitis B virus e antigen, HBeAg）是乙肝病毒內(nèi)核的主要結(jié)構(gòu)蛋白,血清中的HBeAg是一種病毒標志物,是乙肝病毒在人體內(nèi)復(fù)制過程中的一個主要產(chǎn)物,該抗原不僅在臨床上被用作為判斷HBV活動性復(fù)制的指標之一,還在慢性乙肝的最基本治療,即抗病毒治療中發(fā)揮中重要的指導(dǎo)作用,更有研究顯示,HBeAg在母嬰傳播中也起著重要。但是傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）法檢測HBeAg存在靈敏度低,假陽性,重復(fù)性差等缺點。核酸適體是一段經(jīng)體外篩選得到的單鏈DNA或RN A,由于其特殊的理化性質(zhì),目前能用抗原抗體反應(yīng)進行診斷的技術(shù)幾乎都可以用適體替代。本文以特異性檢測IBe... 

【文章來源】：東南大學(xué)江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 乙型肝炎
        1.1.1 乙型肝炎流行現(xiàn)狀
        1.1.2 乙型肝炎病毒e抗原
    1.2 核酸適體
        1.2.1 核酸適體的性質(zhì)及應(yīng)用
        1.2.2 核酸適體的篩選
    1.3 核酸適體傳感器
        1.3.1 結(jié)合熒光的核酸適體傳感器
        1.3.2 結(jié)合金納米顆粒的核酸適體傳感器
    1.4 本論文的主要研究目的與內(nèi)容
    1.5 參考文獻
第二章 HBeAg特異性DNA適體的篩選和分析
    2.1 引言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 實驗材料
        2.2.2 實驗儀器
        2.2.3 材料準備
        2.2.4 四氧化三鐵磁珠修飾HBeAg蛋白
        2.2.5 以羧基化磁珠為介質(zhì)的SELEX篩選法
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 不對稱PCR體系優(yōu)化
        2.3.2 SELEX篩選結(jié)果
    2.4 本章小結(jié)
    2.5 參考文獻
第三章 核酸適體熒光法檢測HBeAg
    3.1 引言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 實驗試劑
        3.2.2 實驗儀器
        3.2.3 F-DNA和D-DNA結(jié)合條件的優(yōu)化
        3.2.4 核酸適體熒光-猝滅體系檢測HBeAg的范圍
        3.2.5 核酸適體熒光-猝滅體系檢測HBeAg的特異性實驗
        3.2.6 核酸適體熒光-猝滅體系檢測HBeAg條件優(yōu)化
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 F-DNA和D-DNA結(jié)合條件的優(yōu)化
        3.3.2 適體-熒光猝滅體系對HBeAg蛋白的檢測范圍
        3.3.3 HBeAg蛋白與適體結(jié)合的特異性檢測
        3.3.4 核酸適體熒光-猝滅體系檢測HBeAg條件優(yōu)化
    3.4 本章小結(jié)
    3.5 參考文獻
第四章 核酸適體結(jié)合金納米檢測HBeAg蛋白
    4.1 引言
    4.2 實驗部分
        4.2.1 實驗材料
        4.2.2 實驗儀器
        4.2.3 金納米的制備
        4.2.4 金納米和核酸適體結(jié)合條件的優(yōu)化
        4.2.5 核酸適體結(jié)合金納米檢測HBeAg蛋白條件的優(yōu)化
        4.2.6 核酸適體結(jié)合金納米檢測HBeAg蛋白的特異性實驗
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 金納米顆粒表征
        4.3.2 金納米和核酸適體結(jié)合條件的優(yōu)化
        4.3.3 核酸適體結(jié)合金納米檢測HBeAg蛋白的條件優(yōu)化
        4.3.4 核酸適體結(jié)合金納米檢測HBeAg蛋白的特異性實驗
    4.4 本章小結(jié)
    4.5 參考文獻
第五章 總結(jié)與展望
    5.1 論文總結(jié)
    5.2 論文的創(chuàng)新點
    5.3 今后工作
碩士期間發(fā)表的論文
致謝



本文編號：3002312