目的IV型膠原蛋白為腎小球基底膜中的支架結(jié)構(gòu),在腎小球?yàn)V過屏障功能中起著至關(guān)重要的作用,其中3個Ⅳ型膠原基因（COL4A3,COL4A4和COL4A5）突變可造成一組臨床表現(xiàn)、病理特征及遺傳類型異質(zhì)性的腎臟疾病,其疾病譜包括Alport綜合征（AS）、良性家族血尿（BFH）和局灶節(jié)段性腎小球硬化（FSGS）。因這3個基因外顯子較多且無熱點(diǎn)突變,利用傳統(tǒng)的PCR及Sanger測序方法進(jìn)行基因突變檢測效率較低且工作量巨大。本研究首先針對性地建立基于靶序列捕獲聯(lián)合高通量測序的遺傳性腎病基因診斷體系,并利用此體系開展IV型膠原相關(guān)腎病的臨床應(yīng)用研究,探索IV型膠原相關(guān)腎病COL4A3,COL4A4及COL4A5基因的突變類型,總結(jié)基因型和臨床表型的關(guān)系,進(jìn)一步結(jié)合臨床表型、病理特征和基因檢測結(jié)果探討IV型膠原基因突變與AS、BFH和FSGS的關(guān)系,為基因診斷、遺傳咨詢和產(chǎn)前診斷的研究提供依據(jù)。方法收集24個Ⅳ型膠原相關(guān)腎病家系,提取患者及家系成員基因組DNA。首先對所有先證者進(jìn)行序列捕獲高通量二代測序（NGS）分析,采用標(biāo)準(zhǔn)流程進(jìn)行目標(biāo)序列的捕獲與富集、測序文庫的準(zhǔn)備、上機(jī)測序以及序列比對。分... 

【文章來源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

AS患者IID16家系圖

3.2 患者 IID3 和 IID10 定量 PCR 結(jié)果 患者 IID3 定量 PCR 結(jié)果.患者 IID3 和正常男性對照 COL4A5 基因 29 號外顯比較。RQ，實(shí)時(shí)熒光定量 PCR． 患者 IID10 定量 PCR 結(jié)果.患者 IID3 和正常男性對照 COL4A5 基因 44 號果比較。RQ，實(shí)時(shí)熒光定量 PCRg3.2 The PCR quantification detected in IID3 and IID10. The PCR quantification results of IID3. The comparison of quantification

遺傳性腎病基因診斷體系的建立及其在 IV 型膠原相關(guān)腎3.1.4 1 例罕見常染色體顯性 Alport 綜合征臨床及IID21 家系先證者（圖 3.3,I1）臨床表現(xiàn)為血尿電鏡下腎小球基底膜（Glomerular basement membr（150-400nm）（圖 3.4）,Ⅳ型膠原 α3 和 α5 鏈免疫免疫熒光顯微鏡結(jié)果顯示腎小球系膜區(qū)有 IgA，IgM曾診斷為 IgA 腎病�；驒z測結(jié)果顯示患者攜帶 COL43.2），其女兒也遺傳到了同樣的變異。結(jié)合基因診和病理結(jié)果，此家系先證者（I1）最終被診斷為常染


本文編號：2959919