本文關(guān)鍵詞：多重PCR檢測鮑曼不動桿菌6種耐藥基因位點及指導(dǎo)臨床用藥的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:鮑曼不動桿菌(Aba,Acinetobacter baumannii),是臨床常見的條件致病菌,隨著臨床樣本中檢出率及耐藥率的上升,其對衛(wèi)生健康事業(yè)帶來很大威脅。本文旨在研究和驗證一種新的檢測方法——多重PCR,用于監(jiān)測Aba的感染和耐藥基因流行情況,并指導(dǎo)臨床用藥。方法:通過調(diào)查研究大量與Aba相關(guān)的耐藥基因情況,以及我科室之前對82例Aba 14種耐藥基因的初步篩查和實驗條件的摸索,挑選出耐藥機制明確、臨床流行范圍廣的耐藥基因。并綜合考慮引物TM應(yīng)相近、目的片段長度易區(qū)分的多重PCR實驗基礎(chǔ),經(jīng)大量預(yù)實驗后,最終挑選出6種目的耐藥基因,設(shè)計為引物復(fù)合物,用于多重PCR。隨后,挑選我科室47株不同患者的Aba菌株驗證多重PCR引物復(fù)合物靈敏性、穩(wěn)定性和檢出率,并與藥敏試驗結(jié)果進(jìn)行比對分析。結(jié)果:多重PCR技術(shù)可同時檢出多耐藥Aba的blaOXA-23,Car O,aac(6′)-I,blaOXA-51,ant(3″)-I和intI1 6種耐藥基因;且與單一PCR檢測耐藥基因結(jié)果一致,條帶顯示清晰、特異,經(jīng)測序驗證正確率100%。多重PCR檢出的耐藥基因與相應(yīng)抗生素藥敏結(jié)果關(guān)聯(lián)密切,blaOXA-23陽性菌株中,IPM、MEM均耐藥比率達(dá)98%;aac(6′)-I和ant(3″)-I雙陽性的菌株中,AN與GM都耐藥率達(dá)93.5%。結(jié)論:采用設(shè)計的含6個耐藥基因的引物復(fù)合物,對菌株進(jìn)行多重PCR檢測,可省時、高效地檢測出Aba的耐藥基因,推測耐藥類型,指導(dǎo)臨床用藥。
【關(guān)鍵詞】：多重PCR 鮑曼不動桿菌 耐藥基因 臨床用藥 藥敏實驗
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R440
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-12
• 第1章 前言12-14
• 第2章 綜述14-22
• 2.1 鮑曼不動桿菌的流行情況14-15
• 2.2 本院 2011~2015年Aba檢出率及耐藥率情況15-18
• 2.2.1 Aba檢出率變化情況15-17
• 2.2.2 Aba五年間亞胺培南、美羅培南耐藥性變化情況17-18
• 2.3 鮑曼不動桿菌的耐藥機制18
• 2.4 Aba相關(guān)耐藥基因的播散機制18-21
• 2.4.1 鮑曼不動桿菌可移動遺傳元件19
• 2.4.2 整合子(Int)19-20
• 2.4.3 插入序列(IS)20
• 2.4.4 轉(zhuǎn)座子(Tn)20-21
• 2.4.5 質(zhì)粒21
• 2.5 結(jié)論21-22
• 第3章 材料與方法22-34
• 3.1 材料22-24
• 3.1.1 標(biāo)本來源22-23
• 3.1.2 試劑與儀器23-24
• 3.2 實驗方法24-34
• 3.2.1 多重PCR的設(shè)計與引物復(fù)合物構(gòu)建24-26
• 3.2.2 多重PCR方法檢測Aba 6 種耐藥基因26-29
• 3.2.3 多重PCR檢測Aba耐藥基因的驗證29-30
• 3.2.4 多重PCR檢測47株Aba的6個耐藥基因30-31
• 3.2.5 菌株藥敏結(jié)果與耐藥基因的聯(lián)系31-34
• 第4章 實驗結(jié)果34-42
• 4.1 多重PCR的最佳退火溫度34-35
• 4.2 多重PCR和單一PCR檢測6種耐藥基因的結(jié)果35-36
• 4.3 多重PCR檢測47株Aba的結(jié)果36-38
• 4.4 多重PCR檢測Aba耐藥基因的測序結(jié)果38-40
• 4.5 多重PCR與臨床用藥的關(guān)聯(lián)40-42
• 第5章 討論42-47
• 5.1 碳青霉烯D類酶耐藥基因流行42-43
• 5.2 氨基糖苷類耐藥基因流行43
• 5.3 整合子的流行43-44
• 5.4 外膜孔蛋白流行44-45
• 5.5 多重PCR的評價45
• 5.6 多重PCR檢測6個耐藥基因的臨床意義45-47
• 第6章 結(jié)論47-48
• 參考文獻(xiàn)48-53
• 附表1 我科室82例鮑曼不動桿菌14種耐藥基因篩查結(jié)果53-55
• 作者簡介及在學(xué)期間所獲得的科研成果55-56
• 致謝56

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