背景隨著基因測序技術(shù)在尿液微生物檢測方面的應(yīng)用,傳統(tǒng)的“膀胱無菌”概念已被打破。而且,越來越多的研究表明尿液微生態(tài)在疾病的發(fā)生與發(fā)展中扮演著重要角色。T2DM患者尿糖和尿液pH值的升高,引起了尿液微生物生存環(huán)境的改變,這一改變導(dǎo)致患者頻發(fā)尿路感染。女性患者因尿道解剖位置的特殊性,較男性更易發(fā)生尿路感染。因此,女性患者尿液微生態(tài)結(jié)構(gòu)較男性可能更易發(fā)生改變。IL-8是趨化因子家族的一種細胞因子,已被用于診斷膀胱炎癥。機體其它部位微生態(tài)的研究表明,微生態(tài)紊亂與局部組織炎癥反應(yīng)相關(guān)。所以,尿液IL-8的出現(xiàn)與否可能也與尿液微生態(tài)有關(guān)。眾所周知,科學(xué)飲食對于T2DM患者具有延緩病情作用,這與它對腸道微生態(tài)及其免疫功能的調(diào)節(jié)作用有關(guān)。由于尿液成分主要由飲食決定,其調(diào)節(jié)效應(yīng)可能也將發(fā)生于尿液微生態(tài)與膀胱炎癥反應(yīng)之間。如需證明此假設(shè),首先需探討一種適宜微生態(tài)研究的尿標本采集法。目的1.探討一種改良式尿液微生態(tài)標本采集法(下簡稱“改良法”),避免導(dǎo)尿術(shù)采集法給患者帶來的痛苦,并為尿液微生態(tài)檢測的臨床應(yīng)用提供一項新的護理技術(shù)。2.探討女性T2DM患者尿液微生態(tài)多樣性特征,并了解患者尿液微生態(tài)是否受個體特征如血糖、尿糖和年齡等因素影響。3.探討T2DM患者尿液微生態(tài)變化與尿液IL-8濃度的關(guān)系。4.探討飲食對T2DM患者尿液微生態(tài)與尿液IL-8濃度相關(guān)性的調(diào)節(jié)效應(yīng)。方法1.自行設(shè)計的改良法包括:①指導(dǎo)患者學(xué)習(xí)導(dǎo)尿術(shù)消毒法;②患者下蹲,自行取碘伏棉球消毒會陰部及尿道口,持續(xù)分開陰唇,排尿時依次采用4根標有1、2、3和4的50mL無菌離心管接尿。采用自身前后對照研究設(shè)計,采集了 30名擬行留置導(dǎo)尿術(shù)的剖宮術(shù)女性志愿者尿標本,即于術(shù)前一日采用改良法采集標本,手術(shù)當(dāng)日采用導(dǎo)尿術(shù)采集標本。將管2和管3尿液用于微生態(tài)檢測和尿培養(yǎng),采用磁珠法提取細菌DNA和Miseq測序平臺對細菌16S rDNA高可變區(qū)V3-V4進行測序,使用R語言和STAMP軟件進行生物信息與統(tǒng)計分析,以比較改良法與導(dǎo)尿術(shù)所采集尿標本的微生態(tài)。2.應(yīng)用病例對照研究設(shè)計,招募了 70名女性T2DM患者及70名健康女性作為對照組。利用改良法采集尿標本,細菌DNA的提取和測序分析方法同第一部分研究,比較T2DM患者與健康女性尿液微生態(tài)多樣性特征和結(jié)構(gòu),并分析年齡、血糖、尿糖、BMI和月經(jīng)等個體特征對患者微生態(tài)的影響。3.使用第二部分研究中采用改良法采集的尿標本,采用ELISA試劑盒檢測尿液IL-8濃度。接下來,根據(jù)檢測結(jié)果將T2DM患者分為兩組:有可檢測的IL-8(with detectable IL-8,WIL8)組與無可檢測的 IL-8(no detectable IL-8,NIL8)組。比較WIL8與NIL8組尿液微生態(tài)是否存在組間差異。同時,將第二部分研究所探知的T2DM組與健康組有組間差異的細菌屬分為某一特定細菌屬的“≥ HCs”和“HCs”亞組,繼而比較兩個亞組之間尿液IL-8濃度差異。另外,采用多元逐步回歸分析判斷與IL-8濃度變化有線性回歸關(guān)系的細菌屬。4.采用入戶調(diào)查方式和《飲食頻率法調(diào)查表》調(diào)查患者飲食攝入情況,使用Matlab軟件按《食物成分表》將飲食轉(zhuǎn)換為營養(yǎng)素。將第二部分研究中揭示的T2DM組與健康組存在組間差異的細菌屬和細菌種、第三部分研究中證實的WIL8與NIL8組存在組間差異的細菌屬和細菌種及與IL-8濃度具有回歸關(guān)系的細菌屬作為自變量,將尿液IL-8濃度作為因變量,將第二部分研究中證實的尿液微生態(tài)影響因素作為控制變量,采用分層回歸分析方法進行調(diào)節(jié)效應(yīng)分析。結(jié)果1.改良法與導(dǎo)尿術(shù)采集法的尿液標本微生態(tài)在菌群多樣性特征及菌群的門、科和屬水平無組間差異(p0.05)。同時,兩種采集法的標本微生態(tài)在門、科和屬水平相似度均接近100%。2.女性T2DM患者尿液微生態(tài)發(fā)生了以下變化:①與健康女性相比,患者尿液微生態(tài)豐富度和多樣性指數(shù)均下降(p0.05);②微生態(tài)群落在細菌門、屬和種水平發(fā)生了明顯變化,主要表現(xiàn)在:與健康對照組相比,T2DM組細菌門綠彎菌、硝化螺旋菌和疣微菌相對豐度下降(p0.05);33個細菌屬的相對豐度在組間呈現(xiàn)差異(P0.05),如普氏菌、乳桿菌和Shuttleworthia(暫無中文名,則采用英文名;根據(jù)國際慣例,細菌屬和種水平采用斜體字。余同)相對豐度在T2DM組明顯升高,而阿克曼氏菌、Faecalibacterium和銅綠假單胞菌相對豐度則在T2DM組降低;嗜黏蛋白阿克曼氏菌相對豐度在T2DM組明顯降低;③放線菌門、卟啉單胞菌、黃桿菌目、脫硫弧菌、黃桿菌綱和柯林斯氏菌可作為T2DM生物標識物;④乳桿菌和放線菌門相對豐度隨著血糖及尿糖的升高而升高,嗜黏蛋白阿克曼氏菌相對豐度則隨著血糖和尿糖的升高而降低;⑤T2DM尿液微生態(tài)多樣性指數(shù)Chao 1和ACE與碳水化合物及氨基酸代謝功能受損有關(guān)。3.70個標本中有46名患者的尿標本可檢測出IL-8(濃度為64.31 ± 70.43 pg/mL),24名患者無可檢測的IL-8。11個細菌屬在WIL8組升高(p0.05),如棒狀桿菌、阿克曼氏菌和腸球菌等;10個細菌屬在WIL8組下降,如Faecalibacterium、擬桿菌和銅綠假單胞菌等(p0.05)。惰性乳桿菌在WIL8組升高(p0.05)。T2DM組與健康組間差異細菌屬中,有4個細菌屬在“≥ HCs”和“HCs”亞組的IL-8濃度有差異(p0.05),它們是不動桿菌、克雷白氏菌、銅綠假單胞菌和細桿菌。IL-8濃度變化與18個細菌屬有線性回歸關(guān)系(p0.05)。4.纖維素、VitB3和VitE攝入量對瘤胃球菌相對豐度與IL-8濃度起到正向調(diào)節(jié)效應(yīng),但飲水量為負向調(diào)節(jié)效應(yīng)(p0.05);膽固醇和鎂攝入量對叢毛單胞菌相對豐度與IL-8濃度相關(guān)性起正向調(diào)節(jié)效應(yīng)(p0.05);Vit A攝入量對厭氧球菌相對豐度與IL-8濃度相關(guān)性起到負向調(diào)節(jié)效應(yīng)(p0.05)。結(jié)論1.改良法可采集到不易污染的真正中段尿。它可替代導(dǎo)尿術(shù)標本采集法,用于尿液微生態(tài)及尿培養(yǎng)標本的采集。2.女性T2DM患者尿液微生態(tài)發(fā)生了紊亂,其個體特征如血糖和尿糖值與某些關(guān)鍵功能菌的變化有關(guān)。同時,微生態(tài)紊亂與代謝紊亂相關(guān)。3.女性T2DM患者尿液微生態(tài)紊亂與膀胱炎癥反應(yīng)互為影響。4.飲食對尿液微生態(tài)與膀胱炎癥反應(yīng)可發(fā)揮調(diào)節(jié)效應(yīng)。今后,護理人員可通過調(diào)整患者飲食方案以增加Vit A、Vit B3、Vit E與膳食纖維攝入量,以促進膀胱炎癥反應(yīng)的緩解。同時,護理人員宜動態(tài)監(jiān)測患者水、膽固醇和鎂攝入量,以防止它們的過度攝入引起的膀胱炎癥反應(yīng)加重。
【學(xué)位單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R473.5
【部分圖文】：

３．３?ＭＭＳＵ與ＴＵＣ采集法尿液微生態(tài)結(jié)果比較??３．３．１?ＭＭＳＵ與ＴＵＣ采集法微生態(tài)復(fù)雜度比較??從ＰＣｏＡ分析可以看出，兩組樣本完全不可聚類，且大部分樣本重疊（圖１．１）。??從表１．４可知，ＭＭＳＵ與ＴＵＣ標本微生態(tài)復(fù)雜度指數(shù)無統(tǒng)計學(xué)差異（ｐ＞０．０５）。??ＰＣＡ??２０?４?？??｜?Ｕｒ２５Ｂ??３？??〇〇?Ｇｒｏｕｐ??＾?釋?ＭＭＳＵ??ｃｏ?Ｒ?ＴＵＣ??＾?－２０－??－４０－??Ｉ??????Ｕｒ？ＳＩ??－４０?－２０?０??ＰＣ１?７．０２％??圖１．１?ＰＣｏＡ分析??ＰＣｏＡ分析，是微生態(tài)樣品間差異分析結(jié)果，基于ｕｎｗｅｉｇｈｔｅｄ?ＵｎｉＦｒａｃ?ｍｅｔｒｉｃ進行分??析。紅點代表ＭＭＳＵ組，藍點代表ＴＵＣ組。??２４??

１３．２．１．１?ＭＭＳＵ與丁?ＵＣ組菌群門水平比較??在菌群分類學(xué)分析中發(fā)現(xiàn)有１９個細菌門（ｐｈｙｌｕｍ），?ＭＭＳＵ與ＴＵＣ采集法在門??水平無統(tǒng)計學(xué)差異（ｐ＞〇．〇５），詳見圖１．２。??１００??ｍ?ＭＭＳＵ?ｐ＞〇．〇５??＿?ＴＵＣ??Ｊ??８０－??２?ＳＤ??ｖ）?６０－??ａ＞?，?４??ｏ??ｃ??Ｑ＞??Ｄ??？??（Ｏ??ｃ??ＪＯ??〇．?４０－??〇Ｉ??圖１．２?ＭＭＳＵ與ＴＵＣ法菌群門水平細菌豐度比較??采用ＳＴＡＭＰ軟件分析兩組菌群門水平相對豐度差異，利用Ｗｅｌｃｈ’ｓ?ｔ檢驗，采用??ＢｅｎｊａｍｉｎｉＦＤＲ進行校正。黃色代表ＭＭＳＵ組，綠色代表ＴＵＣ組。??２６??

?正文第一部分改良式中段尿與導(dǎo)尿術(shù)尿標本采集法對尿液微生態(tài)的影響??３．３．２．１．２ＭＭＳＵ與ＴＵＣ菌群門水平相似度??從圖１．３可知，兩種采集方法的微生態(tài)在菌群門水平Ｒ２＝０．９９１。可見，ＭＭＳＵ??采集法尿液微生態(tài)與ＴＵＣ采集法在門水平相似度高｜１３３］。??１?５??，?！?！?７１??Ｒ２?＝０．９９１?，??６０??／??Ｉ??／??／??／??／??５０?＾??／??／??／??／??／??／??４０?／?－??／??／??一?ｚ??２?３０?＾??／??／??／??２０??－—ｒ?＾?］??１０?（卜一＾???／??〇?—????／??——???１??０?１０?２０?３０?４０?５０?６０?０?１５??ＭＭＳＵ?（％）??圖１．３?ＭＭＳＵ與ＴＵＣ組菌群門水平相似度??Ｓｃａｔｔｅｒ圖采用ＳＴＡＭＰ軟件分析生成，兩組菌群細菌門豐度可信區(qū)間采用Ｗｉｓｏｎ??ｓｃｏｒｅ方法計算。??２７??
【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 朱遵偉;王金根;黃躍勝;孟棟良;何潔卿;;膀胱炎癥性肌纖維母細胞性腫瘤1例[J];廣東醫(yī)學(xué);2011年14期

2 安偉;王偉剛;高嘉林;傅耀文;;膀胱炎癥性肌纖維母細胞瘤1例報告并文獻復(fù)習(xí)[J];中國實驗診斷學(xué);2009年01期

3 姜雋;姜睿;楊海帆;程勇;蘭永樹;韓福剛;;膀胱炎癥性肌纖維母細胞瘤1例報告(英文)[J];瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2010年06期

4 徐曉杰;;淺析膀胱炎癥性肌纖維母細胞性腫瘤的病理特征[J];遼寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2014年03期

5 王欣;李志娟;許長江;;膀胱炎癥性肌纖維母細胞瘤4例臨床病理分析[J];淮海醫(yī)藥;2008年03期

6 陳易華;汪盛賢;王慶堂;羅艷;;膀胱炎癥性肌纖維母細胞腫瘤3例臨床病理分析[J];中國腫瘤臨床;2008年15期

7 章錦湘,謝了武;氣腫性膀航炎4例報告[J];溫州醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1984年02期

8 李春元;IL-8與高�；颊甙l(fā)展至成人型呼吸窘迫綜合征[J];國外醫(yī)學(xué).呼吸系統(tǒng)分冊;1993年03期

9 王志敏,譚志波,王世俊;幼年型類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎血清IL-8水平[J];中華風(fēng)濕病學(xué)雜志;1999年01期

10 李慶山,溫春光,張國材;淋巴系統(tǒng)惡性血液病患者血清IL-8的測定[J];臨床血液學(xué)雜志;2000年01期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前2條

1 柳豐萍;飲食對女性2型糖尿病患者尿液微生態(tài)與膀胱炎癥反應(yīng)調(diào)節(jié)效應(yīng)的研究[D];浙江大學(xué);2018年

2 侯粲;飼料和豬尿液中非目標物篩查技術(shù)及應(yīng)用研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2016年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 梁彥麗;阿托伐他汀對大鼠血管內(nèi)皮細胞中瘦素誘導(dǎo)IL-8、IL-1β表達的作用[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2015年

2 王審;IL-1β、IL-8和IL-10基因多態(tài)性與心肌梗死的相關(guān)性研究[D];浙江大學(xué);2015年

3 陳敏;血漿IL-8、IP-10、MCP-1與2型糖尿病及其并發(fā)癥的相關(guān)性研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2016年

4 高紅霞;梁文珍教授通絡(luò)湯治療氣滯血瘀型盆腔炎性疾病后遺癥的臨床觀察及對血液流變學(xué)、TNF-α、IL-8、IL-10影響的研究[D];安徽中醫(yī)藥大學(xué);2016年

5 趙春波;針藥結(jié)合對盆腔炎性疾病后遺癥大鼠血清中IL-6、IL-8表達的影響[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2017年

6 趙彬彬;乳桿菌表層蛋白對菌株性質(zhì)的影響及其生物學(xué)功能[D];江南大學(xué);2017年

7 荊治;攜IL-8單克隆抗體靶向性聲學(xué)造影劑對兔腹主動脈粥樣斑塊的實驗研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2012年

8 杜琳麟;止咳平喘軟膠囊治療慢性支氣管炎急性發(fā)作期的臨床觀察及對血清IL-8的影響[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2011年

9 張娜;人IL-8基因?qū)m頸癌侵襲和血管生成能力影響的實驗研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2009年

10 楊永麗;乳腺癌患者尿液中酪氨酸及其代謝產(chǎn)物分析新方法研究[D];南昌大學(xué);2017年

本文編號：2892001