發(fā)布時間：2020-11-06 08:17

　　 目的:探究膿毒癥急性肺損傷肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞表達(dá)的縫隙連接蛋白43(Cx43)與肺泡氣-血屏障通透性的關(guān)系以及microRNA-206對膿毒癥急性肺損傷條件下肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞表達(dá)的Cx43影響。方法:動物實(shí)驗(yàn)分為假手術(shù)(sham)組、膿毒癥(CLP)組、CLP+Cx43抑制劑(Cx43-In)組和CLP+miRNA-206模擬物(miR-206-Mi)組。我們采用的是盲腸結(jié)扎穿孔的方法來準(zhǔn)備急性肺損傷模型。造模成功后6 h,取肺組織進(jìn)行HE染色,濕干重比(W/D)和支氣管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量測定,應(yīng)用免疫組化、Western blot檢測肺組織Cx43的表達(dá),RT-qPCR檢測肺組織miRNA-206和Cx43 mRNA的含量。在transwell板上培養(yǎng)大鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞,待培養(yǎng)成單層細(xì)胞后,用Cx43 mRNA抑制劑(siRNA-Cx43 mRNA)和miRNA-206模擬物預(yù)處理,再用脂多糖(LPS)進(jìn)行干預(yù),檢測下室中經(jīng)異硫氰酸熒光素標(biāo)記的葡聚糖(FITC-dextran)熒光強(qiáng)度來判斷單層細(xì)胞的通透性。應(yīng)用雙熒光素酶報告基因?qū)嶒?yàn),探究miRNA-206是否靶向Cx43 mRNA的3′非編碼區(qū)來調(diào)節(jié)Cx43的表達(dá),進(jìn)而調(diào)控肺泡氣-血屏障的通透性。結(jié)果:與sham組相比,CLP組肺泡結(jié)構(gòu)破壞,肺泡壁增厚,肺間質(zhì)充血、出血,炎癥細(xì)胞浸潤,肺間質(zhì)和肺泡腔水腫,且肺泡腔內(nèi)可見淡紅色水腫液和中性粒細(xì)胞滲出,肺組織W/D、BALF蛋白含量增加(P0.05),同時Cx43的mRNA和Cx43蛋白的表達(dá)量也明顯增加(P0.05),miRNA-206表達(dá)量降低(P0.05);相對于CLP組,Cx43-In組和miR-206-Mi組肺組織的炎癥反應(yīng)減輕,W/D、BALE蛋白含量降低(P0.05),Cx43的mRNA和Cx43蛋白的表達(dá)量也明顯減少(P0.05)。此外,雙熒光素酶報告基因?qū)嶒?yàn)結(jié)果顯示,Cx43 mRNA的3′非編碼區(qū)存在miRNA-206的互補(bǔ)序列。結(jié)論:膿毒癥急性肺損傷條件下肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞表達(dá)的Cx43增加,導(dǎo)致了肺泡氣-血屏障的通透性增加;microRNA-206通過標(biāo)靶Cx43的mRNA下調(diào)了Cx43的表達(dá),進(jìn)而降低了肺泡氣-血屏障通透性。
【學(xué)位單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R459.7;R563
【文章目錄】：
中文摘要
abstract
常用縮寫詞中英文對照表
前言
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法在體水平
    1.3 實(shí)驗(yàn)方法細(xì)胞水平
    1.4 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡歷

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 周定剛;喻國東;陳乾美;;連接蛋白Connexin 43在鼻息肉中的表達(dá)[J];中國當(dāng)代醫(yī)藥;2011年24期

2 劉耀;張曦;司英健;高蕾;高力;陳幸華;;急性白血病骨髓基質(zhì)細(xì)胞Connexin 43的表達(dá)及細(xì)胞間通訊功能研究[J];中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2007年04期

3 王光宇;葉婷婷;張慶勇;;胰島素誘導(dǎo)的大鼠急性低血糖對心律失常發(fā)生及心肌connexin 43表達(dá)的影響[J];上海交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2015年07期

4 李環(huán);胡殿興;陳威;張燚;靳曙光;;Connexin 43介導(dǎo)細(xì)胞縫隙連接的研究進(jìn)展[J];北華大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2014年01期

5 覃虹錕;桂艷萍;王亞菁;趙麗;;間隙連接蛋白Connexin 43介導(dǎo)的膠質(zhì)瘤替莫唑胺耐藥研究進(jìn)展[J];中國藥科大學(xué)學(xué)報;2018年06期

6 馬興對;姬寧寧;吳靚;孟慶祥;趙盼盼;劉蘇;李北平;;脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞connexin 43調(diào)控CCL2釋放在結(jié)直腸擴(kuò)張致大鼠慢性內(nèi)臟痛中的作用[J];臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2018年22期

7 張永興,徐洪濤,王恩華;Connexin 43和E-cadherin在非小細(xì)胞肺癌中表達(dá)及相關(guān)性研究[J];中國肺癌雜志;2005年02期

8 于永娟;牟芳芳;張澤安;田雪松;姜昕;路萍萍;;Connexin 43在銀杏葉提取物抗大鼠腦缺血損傷中的作用[J];中國中醫(yī)急癥;2012年05期

9 宋東莉;劉曉宇;劉雯;左伋;;Connexin 43在細(xì)胞死亡中的作用[J];生命科學(xué);2010年03期

10 趙亞冰;武玉東;;Connexin 43在神經(jīng)原性逼尿肌過度活動中表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究[J];醫(yī)藥論壇雜志;2007年09期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 唐穎馨;縫隙連接通訊對腦缺血邊緣區(qū)及遠(yuǎn)隔區(qū)神經(jīng)元損傷的影響及機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 周佳偉;MicroRNA-206通過抑制肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞connexin 43表達(dá)影響LPS誘導(dǎo)的通透性增加[D];山西醫(yī)科大學(xué);2019年

2 宋東莉;縫隙連接蛋白Connexin 43半通道在H9c2細(xì)胞增殖調(diào)節(jié)中的作用及機(jī)制[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

本文編號：2872889