目的通過(guò)對(duì)兩種不同的HBV-DNA檢測(cè)試劑的性能進(jìn)行評(píng)價(jià)和比較,有利于為臨床檢測(cè)提供快速、準(zhǔn)確的結(jié)果。方法從正確度、精密度、定量限、線性范圍、干擾試驗(yàn)等性能方面對(duì)兩種不同的國(guó)產(chǎn)熒光定量PCR的HBV-DNA檢測(cè)試劑進(jìn)行性能驗(yàn)證,并選取不同類(lèi)型的臨床標(biāo)本進(jìn)行同步檢測(cè)分析,通過(guò)相關(guān)性和一致性評(píng)價(jià)兩種試劑檢測(cè)結(jié)果是否存在差異。結(jié)果1.對(duì)兩種檢測(cè)試劑批內(nèi)和批間的精密度進(jìn)行分析,結(jié)果表明其精密度在對(duì)高濃度的標(biāo)本檢測(cè)時(shí)優(yōu)于低濃度。兩種試劑對(duì)HBV-DNA檢測(cè)的正確度結(jié)果一致性良好,沒(méi)有顯著差異。A試劑對(duì)HBV-DNA定量限的陽(yáng)性檢出率達(dá)到100%,B試劑的定量限檢出率達(dá)到88%,2種試劑的偏差均在?0.5的范圍內(nèi)。兩種試劑的線性范圍驗(yàn)證符合相關(guān)要求。對(duì)兩試劑進(jìn)行干擾試驗(yàn),結(jié)果表明嚴(yán)重溶血、脂血標(biāo)本對(duì)低病毒載量HBV DNA的檢測(cè)會(huì)有影響,但低載量標(biāo)本的HBV-DNA檢測(cè)不受輕微溶血、脂血標(biāo)本影響,而即時(shí)檢測(cè)、室溫保存3天、4℃冷藏后7天這三種保存時(shí)間影響差異不顯著。2.使用2種檢測(cè)試劑對(duì)篩選的100份臨床標(biāo)本進(jìn)行了相關(guān)性和一致性分析,在病毒載量較低組如小三陽(yáng)組和其他組時(shí),A試劑檢出率(43.06%)略高于B試劑(40.28%),兩種試劑與對(duì)照試劑對(duì)共同檢出的標(biāo)本HBV-DNA檢測(cè)相關(guān)性和一致性均較好。對(duì)HBV合并HCV感染的肝炎33例標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)分析,結(jié)果表明兩種試劑在臨床中對(duì)混合感染的肝炎病人HBV-DNA檢測(cè)結(jié)果均比較可靠(r~2=0.952)。對(duì)肝癌患者的臨床標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)分析,結(jié)果表明兩種試劑的檢測(cè)相關(guān)性與一致性良好。結(jié)論選用的兩種HBV-DNA檢測(cè)試劑盒性能方面均符合實(shí)驗(yàn)要求。A試劑與B試劑在臨床中對(duì)于病毒低載量樣本的檢測(cè)具有等效性,能力相當(dāng)。
【學(xué)位單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類(lèi)】：R446
【部分圖文】：

圖 1 HBV 基因組的結(jié)構(gòu)和組成Fig1 Genes Alignment of Hepatitis B Virus的復(fù)制過(guò)程包括以下幾步：附著、侵入、脫殼、轉(zhuǎn)錄、復(fù)制過(guò)包膜與相應(yīng)的細(xì)胞受體結(jié)合而附著在易感肝細(xì)胞表面，組的核衣殼而進(jìn)入細(xì)胞漿內(nèi)。核心顆粒在進(jìn)入細(xì)胞核后通狀 DNA（relaxed circular DNA，rcDNA）,在 DNA 聚合酶環(huán)狀 DNA（covalently closed circular DNA，cccDNA）,在合酶作用下轉(zhuǎn)錄生成各種 mRNA，在翻譯成對(duì)應(yīng)的各種蛋 RNA ( pregenomic RNA，pgRNA)在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下包 HBV DNA。只有成熟的 DNA 的核衣殼才能被裝配包膜蛋有 pgRNA 的不成熟核衣殼。在包裝過(guò)程中，只有正確包如 S 蛋白或 preS 蛋白比例不對(duì)都會(huì)導(dǎo)致異常的裝配和釋放

16圖 1A、B 兩試劑對(duì)于質(zhì)評(píng)檢測(cè)能力的一致性Fig 1 Consistency ofAand B reagents for quality assessment限驗(yàn)證：國(guó)家定量限標(biāo)準(zhǔn)為 25 次檢驗(yàn)中至少 22 次檢測(cè)結(jié)果，通過(guò)對(duì) A、B 兩種試劑的 HBV-DNA 靈敏度檢測(cè)，結(jié)果陽(yáng)性檢出率達(dá)到 100%（表 4），同時(shí)，我們對(duì)兩個(gè)批號(hào)檢較，均在 0.5 的范圍內(nèi)（圖 2），實(shí)驗(yàn)結(jié)果符合國(guó)家定量限

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 2 個(gè)批號(hào)的陽(yáng)性檢出率達(dá)到 88%（表 5），同時(shí)，偏差也均在 0.5 的3），也符合國(guó)家定量限標(biāo)準(zhǔn)要求。A 試劑的靈敏度和 B 試劑無(wú)顯著差 4 A 試劑 HBV-DNA 檢測(cè)定量限驗(yàn)證檢測(cè)結(jié)果檢出次數(shù) 檢驗(yàn)總數(shù) 陽(yáng)性率 評(píng)價(jià)6 25 25 100% 符合7 25 25 100% 符合
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2839211