多重耐藥鮑曼不動桿菌感染死亡率高,治療困難,醫(yī)療負擔大,已成為全球性的公共衛(wèi)生問題。近年來黏液型多重耐藥鮑曼不動桿菌在臨床中逐漸增多。替加環(huán)素和多粘菌素是治療多重耐藥鮑曼不動桿菌感染的最后防線,然而隨著抗生素的使用,替加環(huán)素或多粘菌素耐藥的鮑曼不動桿菌在不斷出現(xiàn)。Eravacycline是一種新型的全合成四環(huán)素類抗生素,對多重耐藥菌仍有著較好的活性。本研究將分為兩個部分,研究黏液型多重耐藥鮑曼不動的生物學(xué)特征以及多重耐藥鮑曼不動桿菌對Eravacycline的耐藥機制。第一部分收集了 56位臨床患者的60株鮑曼不動桿菌,其中黏液型鮑曼不動桿菌56株,非黏液型4株。先收集患者的臨床資料,再觀察菌落形態(tài)、儮膜形態(tài),測定抗生素敏感性,用結(jié)晶紫染色法測定生物膜形成能力,對所有菌株進行全基因組測序后進行核心基因組多位點序列分型(cgMLST)和耐藥基因分析,最后選取部分代表菌株進行大蠟螟感染毒力試驗。結(jié)果顯示:黏液型鮑曼不動桿菌感染病程重,治療困難,預(yù)后不佳。其菌落濕潤粘稠,易融合,可有拉絲現(xiàn)象�；舅叙ひ盒王U曼不動桿菌(98.2%)均為多重耐藥菌,頭孢哌酮舒巴坦、替加環(huán)素和多粘菌素的耐藥率相對較低,分別為15.0%、35.0%和3.3%,對Eravacycline的耐藥率最低,為1.7%。和非黏液型鮑曼不動桿菌相比,黏液型鮑曼不動桿菌具有明顯的莢膜結(jié)構(gòu),但在生長速度和生物膜形成能力方面沒有差異。根據(jù)cgMLST分析,黏液型鮑曼不動桿菌主要的ST型為ST191和ST195,其中ST191的菌株毒力可能較強,而ST195的菌株毒力較弱。第二部分主要對多重耐藥鮑曼不動桿菌MDR-ZJ06進行了一系列體外Eravacycline誘導(dǎo)實驗,獲得2株Eravacycline耐藥菌株。利用全基因組測序技術(shù),比較分析親本菌株和耐藥菌株的全基因組序列,發(fā)現(xiàn)基因adeS出現(xiàn)三個堿基的缺失突變,可能與Eravacycline耐藥相關(guān)。外排泵泵抑制實驗證明耐藥菌株的外排泵抑制劑抑制表型為陽性,進一步用qRT-PCR 比較親本菌株和耐藥菌株的外排泵表達量,發(fā)現(xiàn)耐藥菌株的外排泵adeABC表達顯著上調(diào)。對耐藥菌株回補野生型adeS后,發(fā)現(xiàn)外排泵adeABC的表達量恢復(fù)正常,且Eravacycline的敏感性提高了 4倍。這說明adeS的缺失突變介導(dǎo)外排泵adeABC表達上調(diào),這可能是引起Eravacycline耐藥的重要機制之一。綜上所述,黏液型鮑曼不動桿菌具有明顯的儮膜結(jié)構(gòu),其生長速度和生物膜形成能力與非黏液型鮑曼不動桿菌相似,主要的ST型為ST191和ST195,其中ST191的菌株毒力可能相對較強,而ST195的菌株毒力較弱。黏液型鮑曼不動桿菌多重耐藥率高,對Eravacycline的耐藥率最低。其中adeS的缺失突變介導(dǎo)外排泵adeABC表達上調(diào),可能是引起Eravacycline耐藥的重要機制之一。
【學(xué)位單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R446.5
【部分圖文】：

圖１．２黏液型和非黏液型鮑曼不動桿菌菌落形態(tài)（Ａ）黏液型鮑曼不動桿菌４０３；逡逑（Ｂ）非黏液型鮑曼不動桿菌４０４；逡逑■逡逑圖１．３．菌株Ｎ３５拉絲現(xiàn)象逡逑２．３抗生素敏感性測定結(jié)果逡逑檢測６０株菌株對１１種抗生素的敏感性，結(jié)果見圖１．４。菌株對頭孢他啶、頭逡逑孢吡肟、環(huán)丙沙星、美羅培南、亞胺培南的耐藥率均高達９６．７％，其次是慶大霉素逡逑（８３．３％）和阿米卡星（７３．３％）。而對替加環(huán)素的耐藥率為３５．０％，對頭孢哌酮舒逡逑２２逡逑

Ｉ逡逑（Ａ）邐（Ｂ）逡逑圖１．２黏液型和非黏液型鮑曼不動桿菌菌落形態(tài)（Ａ）黏液型鮑曼不動桿菌４０３；逡逑（Ｂ）非黏液型鮑曼不動桿菌４０４；逡逑■逡逑圖１．３．菌株Ｎ３５拉絲現(xiàn)象逡逑２．３抗生素敏感性測定結(jié)果逡逑檢測６０株菌株對１１種抗生素的敏感性，結(jié)果見圖１．４。菌株對頭孢他啶、頭逡逑孢吡肟、環(huán)丙沙星、美羅培南、亞胺培南的耐藥率均高達９６．７％，其次是慶大霉素逡逑（８３．３％）和阿米卡星（７３．３％）。而對替加環(huán)素的耐藥率為３５．０％，對頭孢哌酮舒逡逑２２逡逑

Ｉ逡逑（Ａ）邐（Ｂ）逡逑圖１．２黏液型和非黏液型鮑曼不動桿菌菌落形態(tài)（Ａ）黏液型鮑曼不動桿菌４０３；逡逑（Ｂ）非黏液型鮑曼不動桿菌４０４；逡逑■逡逑圖１．３．菌株Ｎ３５拉絲現(xiàn)象逡逑２．３抗生素敏感性測定結(jié)果逡逑檢測６０株菌株對１１種抗生素的敏感性，結(jié)果見圖１．４。菌株對頭孢他啶、頭逡逑孢吡肟、環(huán)丙沙星、美羅培南、亞胺培南的耐藥率均高達９６．７％，其次是慶大霉素逡逑（８３．３％）和阿米卡星（７３．３％）。而對替加環(huán)素的耐藥率為３５．０％，對頭孢哌酮舒逡逑２２逡逑

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 王國戧;婁婷葉;;不同菌落形態(tài)鮑曼不動桿菌生物特征的分析[J];檢驗醫(yī)學(xué);2013年07期

2 史軍;;藥物動力學(xué)和藥效動力學(xué)在抗菌藥物新藥開發(fā)和臨床治療上的應(yīng)用[J];中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué);2007年02期

3 陳浙勇,孔海深;從老慢支病人痰中檢出粘液型鮑曼氏不動桿菌[J];上海醫(yī)學(xué)檢驗雜志;1998年01期

本文編號：2831888