膿毒癥是由于宿主感染反應失調而導致的“威脅生命的器官功能障礙”,伴隨著危重病的監(jiān)護救治技術進一步發(fā)展,膿毒癥患者的病死率雖然已經(jīng)發(fā)生顯著的下降,但是仍然高達20%。膿毒癥能夠發(fā)生心肌損傷心功能不全,這一并發(fā)癥也是導致膿毒癥患者死亡的主要原因。膿毒癥造成心肌損傷心功能不全的機制十分復雜,其中包括了心肌缺血、心肌細胞的損傷和凋亡,循環(huán)中心肌抑制因子的作用、線粒體功能障礙以及膿毒癥對心肌的直接抑制等。神經(jīng)調節(jié)蛋白-1(neuregulin-1,NRG-1)是表皮生長因子(epidermal growth factor,EGF)家族的成員之一,它是一種分泌蛋白,對神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育和維持起重要作用,而近年來被發(fā)現(xiàn)在心血管系統(tǒng)中具有多種的生物活性從而起到對抗疾病的作用。NRG-1/ErBbs系統(tǒng)在抑制炎癥反應,細胞凋亡和調節(jié)細胞內鈣循環(huán)等方面起著重要的作用。我們推測,NRG-1衍生的多種效應在治療膿毒癥上極有前景,可能作為預防膿毒癥心肌損傷的重要手段。實驗將雄性SD大鼠(8～10周)分為膿毒癥組(n= 12)、膿毒癥NRG組(n=12)、假手術組(n = 6)及假手術NRG組(n = 6)。膿毒癥組和膿毒癥NRG組的大鼠通過盲腸結扎穿孔(cecal ligation puncture,CLP)來獲得膿毒癥模型。重組人神經(jīng)蛋白 1(recombinant human Neuregulin-1,rhNRG-1)在手術前30 min被注射至大鼠尾靜脈。假手術NRG組和膿毒癥NRG組的大鼠注射rhNRG-1,而假手術組和膿毒癥組大鼠均于手術前30 min尾靜脈注射等體積生理鹽水。四組大鼠的研究時間點均為術后24h。其中,每隔4h觀察大鼠生存率,并記錄大鼠存活情況及生存狀態(tài)。術后24 h檢測大鼠血流動力學,并記錄血流動力學各參數(shù)圖像。待血流動力學檢測完成后,取大鼠左心室組織,用Western blot法檢測大鼠左心室組織的炎癥因子(TNF-α,IL-1β和IL-6)和鈣調控蛋白(RyR2,P-RyR2,PLB,P-PLB,SERCA2a)的表達情況。待血流動力學檢測完成后,取大鼠右心室組織,用TUNEL法檢測心肌細胞凋亡。各組大鼠取組織標本后均被處死。實驗結果顯示,給大鼠注射NRG-1后,大鼠的24小時生存率從膿毒癥組的50%增加到膿毒癥NRG組的91.7%,說明NRG-1可能明顯提高了膿毒癥大鼠的生存率。術后24h,膿毒癥大鼠的血流動力學得到了明顯改善,主要表現(xiàn)在膿毒癥NRG組大鼠的平均動脈壓(MAP),左心室收縮壓(LVSP)和±dp/dt max均增加,而左心室舒張末期壓(LVEDP)下降。與膿毒癥組的大鼠相比,膿毒癥NRG組大鼠的心肌炎癥因子TNF-α,IL-1 β和IL-6在術后24h發(fā)生了明顯的降低,心肌細胞的凋亡也明顯減少,這說明了 NRG-1可能參與改善了心肌炎癥和心肌細胞凋亡的相關機制。另外,與膿毒癥組的大鼠相比,膿毒癥NRG組大鼠鈣調控蛋白 RyR2 的活動(P-RyR2,Ser2808),PLB 的活動(P-PLB,Ser16/Thr17)和SERCA2a濃度顯著增加,說明NRG-1在改善膿毒癥心功能不全過程中對鈣循環(huán)的調控也起到了一定作用。綜上所述,NRG-1通過有效抑制炎癥反應、心肌細胞凋亡和鈣循環(huán)功能障礙,從而改善了膿毒癥大鼠的心功能、心肌損傷和存活率。因此,我們認為,NRG-1可能是治療膿毒癥心肌損傷心功能不全的潛在治療手段。
【學位單位】：武漢大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R614;R459.7
【部分圖文】：

率為９１．７％邋（１２個中有１１個存活），而在２４小時時逐漸下降到了邋５０．０％邋（１２逡逑個中有６個存活）。膿毒癥ＮＲＧ組的大鼠在２４小時顯示出９１．７％的存活率（１２逡逑個中有１１個存活）。如圖１所示，結果表明，與膿毒癥組相比，ＮＲＧ－１對于增逡逑加ＣＬＰ誘導的膿毒癥大鼠的存活率是有統(tǒng)計學意義的（Ｐ邋＜０．０５）。逡逑邐生存曲線邐逡逑ｌｏｏ－邋邐ｒ邐邐邐－邐－＂：逡逑＿ｒ、．銥咚茲鉗逡逑＜邐；邐４－邋一拓傶敵ｘＫｉａ逡逑８６－逡逑生逡逑存逡逑率逡逑＾邋ＡＯ－逡逑Ｘ－逡逑０－逡逑０邐５邐１０邐１邋５邐２０邐２５逡逑時間Ｃｈ）逡逑圖１邋Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ生存曲線逡逑Ｆｉｇｕｒｅ．ｌ邋Ｔｈｅ邋ｓｕｒｖｉｖａｌ邋ｃｕｒｖｅｓ邋ｏｆ邋Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ逡逑神經(jīng)調節(jié)蛋白－１邋（ＮＲＧ－１）對ＣＬＰ模型誘導的膿毒癥的大鼠生存率的影響。逡逑在對大鼠造ＣＬＰ模型前３０邋ｍｉｎ，于尾靜脈注射ｒｈＮＲＧ－１邋（１０邋ｎｇ／ｋｇ）或等體積逡逑的生理鹽水。手術后立即皮下注射溫熱生理鹽水（５邋ｍｌ邋／邋１００ｇ），保持室溫２２邋°Ｃ，逡逑觀察直至所有大鼠蘇醒

３．２血流動力學結果逡逑手術后２４小時，各組大鼠再次被麻醉（１．５％戊巴比妥鈉３０邋ｍｇ／ｋｇ），用逡逑ＢＩＯＰＡＣＭＰ１５０記錄大鼠的血流動力學變化，以評估大鼠心功能。圖２血流動力逡逑學結果顯示，與假手術組相比，膿毒癥組的大鼠ＭＡＰ、ＬＶＳＰ和士邋ｄｐ／ｄｔ邋ｍａｘ減逡逑�。ㄊ歼�，ＬＶＥＤＰ增加（Ｐ邋＜邋，差異有統(tǒng)計學意義。而ＨＲ無明逡逑顯改變（／＞＞邋ａ0５），差異無統(tǒng)計學意義。注射ＮＲＧ－１后，與膿毒癥組比較，逡逑膿毒癥ＮＲＧ組的大鼠ＭＡＰ、１＾／８？和±ｄｐ／ｄｔｍａｘ增加（尸＜０．仍），ＬＶＥＤＰ逡逑降低（Ｐ＜ａ0５），提示ＮＲＧ－１能改善膿毒癥所致的心臟功能減弱，差異有統(tǒng)逡逑計學意義。逡逑１［邐：：邐１＇—“ Ｌ逡逑°邐ｍｃａ邐ｋＳ邐佐灥瞬灥胺~|焌

本文編號：2819752