膿毒癥是由于宿主感染反應(yīng)失調(diào)而導(dǎo)致的“威脅生命的器官功能障礙”,伴隨著危重病的監(jiān)護(hù)救治技術(shù)進(jìn)一步發(fā)展,膿毒癥患者的病死率雖然已經(jīng)發(fā)生顯著的下降,但是仍然高達(dá)20%。膿毒癥能夠發(fā)生心肌損傷心功能不全,這一并發(fā)癥也是導(dǎo)致膿毒癥患者死亡的主要原因。膿毒癥造成心肌損傷心功能不全的機(jī)制十分復(fù)雜,其中包括了心肌缺血、心肌細(xì)胞的損傷和凋亡,循環(huán)中心肌抑制因子的作用、線粒體功能障礙以及膿毒癥對(duì)心肌的直接抑制等。神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白-1(neuregulin-1,NRG-1)是表皮生長(zhǎng)因子(epidermal growth factor,EGF)家族的成員之一,它是一種分泌蛋白,對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育和維持起重要作用,而近年來(lái)被發(fā)現(xiàn)在心血管系統(tǒng)中具有多種的生物活性從而起到對(duì)抗疾病的作用。NRG-1/ErBbs系統(tǒng)在抑制炎癥反應(yīng),細(xì)胞凋亡和調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)鈣循環(huán)等方面起著重要的作用。我們推測(cè),NRG-1衍生的多種效應(yīng)在治療膿毒癥上極有前景,可能作為預(yù)防膿毒癥心肌損傷的重要手段。實(shí)驗(yàn)將雄性SD大鼠(8～10周)分為膿毒癥組(n= 12)、膿毒癥NRG組(n=12)、假手術(shù)組(n = 6)及假手術(shù)NRG組(n = 6)。膿毒癥組和膿毒癥NRG組的大鼠通過(guò)盲腸結(jié)扎穿孔(cecal ligation puncture,CLP)來(lái)獲得膿毒癥模型。重組人神經(jīng)蛋白 1(recombinant human Neuregulin-1,rhNRG-1)在手術(shù)前30 min被注射至大鼠尾靜脈。假手術(shù)NRG組和膿毒癥NRG組的大鼠注射rhNRG-1,而假手術(shù)組和膿毒癥組大鼠均于手術(shù)前30 min尾靜脈注射等體積生理鹽水。四組大鼠的研究時(shí)間點(diǎn)均為術(shù)后24h。其中,每隔4h觀察大鼠生存率,并記錄大鼠存活情況及生存狀態(tài)。術(shù)后24 h檢測(cè)大鼠血流動(dòng)力學(xué),并記錄血流動(dòng)力學(xué)各參數(shù)圖像。待血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)完成后,取大鼠左心室組織,用Western blot法檢測(cè)大鼠左心室組織的炎癥因子(TNF-α,IL-1β和IL-6)和鈣調(diào)控蛋白(RyR2,P-RyR2,PLB,P-PLB,SERCA2a)的表達(dá)情況。待血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)完成后,取大鼠右心室組織,用TUNEL法檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡。各組大鼠取組織標(biāo)本后均被處死。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,給大鼠注射NRG-1后,大鼠的24小時(shí)生存率從膿毒癥組的50%增加到膿毒癥NRG組的91.7%,說(shuō)明NRG-1可能明顯提高了膿毒癥大鼠的生存率。術(shù)后24h,膿毒癥大鼠的血流動(dòng)力學(xué)得到了明顯改善,主要表現(xiàn)在膿毒癥NRG組大鼠的平均動(dòng)脈壓(MAP),左心室收縮壓(LVSP)和±dp/dt max均增加,而左心室舒張末期壓(LVEDP)下降。與膿毒癥組的大鼠相比,膿毒癥NRG組大鼠的心肌炎癥因子TNF-α,IL-1 β和IL-6在術(shù)后24h發(fā)生了明顯的降低,心肌細(xì)胞的凋亡也明顯減少,這說(shuō)明了 NRG-1可能參與改善了心肌炎癥和心肌細(xì)胞凋亡的相關(guān)機(jī)制。另外,與膿毒癥組的大鼠相比,膿毒癥NRG組大鼠鈣調(diào)控蛋白 RyR2 的活動(dòng)(P-RyR2,Ser2808),PLB 的活動(dòng)(P-PLB,Ser16/Thr17)和SERCA2a濃度顯著增加,說(shuō)明NRG-1在改善膿毒癥心功能不全過(guò)程中對(duì)鈣循環(huán)的調(diào)控也起到了一定作用。綜上所述,NRG-1通過(guò)有效抑制炎癥反應(yīng)、心肌細(xì)胞凋亡和鈣循環(huán)功能障礙,從而改善了膿毒癥大鼠的心功能、心肌損傷和存活率。因此,我們認(rèn)為,NRG-1可能是治療膿毒癥心肌損傷心功能不全的潛在治療手段。
【學(xué)位單位】：武漢大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R614;R459.7
【部分圖文】：

率為９１．７％邋（１２個(gè)中有１１個(gè)存活），而在２４小時(shí)時(shí)逐漸下降到了邋５０．０％邋（１２逡逑個(gè)中有６個(gè)存活）。膿毒癥ＮＲＧ組的大鼠在２４小時(shí)顯示出９１．７％的存活率（１２逡逑個(gè)中有１１個(gè)存活）。如圖１所示，結(jié)果表明，與膿毒癥組相比，ＮＲＧ－１對(duì)于增逡逑加ＣＬＰ誘導(dǎo)的膿毒癥大鼠的存活率是有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的（Ｐ邋＜０．０５）。逡逑邐生存曲線邐逡逑ｌｏｏ－邋邐ｒ邐邐邐－邐－＂：逡逑＿ｒ、．銥咚茲鉗逡逑＜邐；邐４－邋一拓傶敵ｘＫｉａ逡逑８６－逡逑生逡逑存逡逑率逡逑＾邋ＡＯ－逡逑Ｘ－逡逑０－逡逑０邐５邐１０邐１邋５邐２０邐２５逡逑時(shí)間Ｃｈ）逡逑圖１邋Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ生存曲線逡逑Ｆｉｇｕｒｅ．ｌ邋Ｔｈｅ邋ｓｕｒｖｉｖａｌ邋ｃｕｒｖｅｓ邋ｏｆ邋Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ逡逑神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白－１邋（ＮＲＧ－１）對(duì)ＣＬＰ模型誘導(dǎo)的膿毒癥的大鼠生存率的影響。逡逑在對(duì)大鼠造ＣＬＰ模型前３０邋ｍｉｎ，于尾靜脈注射ｒｈＮＲＧ－１邋（１０邋ｎｇ／ｋｇ）或等體積逡逑的生理鹽水。手術(shù)后立即皮下注射溫?zé)嵘睇}水（５邋ｍｌ邋／邋１００ｇ），保持室溫２２邋°Ｃ，逡逑觀察直至所有大鼠蘇醒

３．２血流動(dòng)力學(xué)結(jié)果逡逑手術(shù)后２４小時(shí)，各組大鼠再次被麻醉（１．５％戊巴比妥鈉３０邋ｍｇ／ｋｇ），用逡逑ＢＩＯＰＡＣＭＰ１５０記錄大鼠的血流動(dòng)力學(xué)變化，以評(píng)估大鼠心功能。圖２血流動(dòng)力逡逑學(xué)結(jié)果顯示，與假手術(shù)組相比，膿毒癥組的大鼠ＭＡＰ、ＬＶＳＰ和士邋ｄｐ／ｄｔ邋ｍａｘ減逡逑�。ㄊ歼姡蹋郑牛模性黾樱ǎ绣澹煎�，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而ＨＲ無(wú)明逡逑顯改變（／＞＞邋ａ0５），差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。注射ＮＲＧ－１后，與膿毒癥組比較，逡逑膿毒癥ＮＲＧ組的大鼠ＭＡＰ、１＾／８？和±ｄｐ／ｄｔｍａｘ增加（尸＜０．仍），ＬＶＥＤＰ逡逑降低（Ｐ＜ａ0５），提示ＮＲＧ－１能改善膿毒癥所致的心臟功能減弱，差異有統(tǒng)逡逑計(jì)學(xué)意義。逡逑１［邐：：邐１＇—“ Ｌ逡逑°邐ｍｃａ邐ｋＳ邐佐灥瞬灥胺~|焌

本文編號(hào)：2819752