【摘要】：目的探討局部冷、熱處理對大鼠壓瘡相關(guān)凋亡蛋白及炎性因子的影響,為臨床防治和護理壓瘡時對冷、熱療法的選擇提供依據(jù)。方法將40只SPF級成年雄性SD大鼠隨機分為4組:假手術(shù)組(Sham組)、模型組(Model組)、熱處理組(Heating組)和冷處理組(Cooling組)。用缺血-再灌注(IRI)法建立大鼠早期壓瘡模型,對Cooling組和Heating組大鼠分別進行冷、熱溫度處理。實驗終點取局部受壓肌肉組織,通過HE染色法觀察肌肉組織病理變化;透射電鏡檢測肌肉組織超微結(jié)構(gòu)改變;免疫組化檢測肌肉組織中凋亡標(biāo)志因子Bax、Bcl-2的表達(dá)水平;免疫熒光檢測肌肉組織中炎性因子TNF-α和IL-6的表達(dá)水平;Western blot檢測肌肉組織中Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9、Cyt-c、TNF-α和IL-6的表達(dá)情況;TUNEL法檢測肌肉組織的細(xì)胞凋亡情況;線粒體腫脹實驗評估各組肌肉組織中mPTP的開放程度。結(jié)果1大鼠肌肉組織的病理變化顯示,Sham組肌纖維形態(tài)正常,排列緊密,無明顯炎性細(xì)胞浸潤;Model組肌纖維出現(xiàn)病理損傷,表現(xiàn)為排列紊亂,部分出現(xiàn)明顯的斷裂、溶解,間隙增寬,出現(xiàn)明顯的炎性細(xì)胞浸潤;Heating組與Model組相比損傷程度加重,Cooling組與Model組相比損傷減輕。2大鼠肌肉組織超微結(jié)構(gòu)變化顯示,Sham組肌絲排列致密,肌節(jié)完整,線粒體形態(tài)正常;Model組肌絲排列紊亂,肌節(jié)攣縮,線粒體肥大變形,擴張明顯;Heating組與Model組相比損傷程度加重,Cooling組與Model組相比損傷減輕。3免疫組化與Western blot對大鼠肌肉組織中線粒體凋亡通路相關(guān)蛋白的檢測結(jié)果顯示,與Sham組相比,Model組肌肉組織中Bax/Bcl-2、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9表達(dá)均顯著增加,Cyt-c從線粒體大量釋放到胞漿中(P0.05);Heating組與Model組相比,Bax/Bcl-2、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9表達(dá)均進一步上升,Cyt-c從線粒體到胞漿的釋放量增加(P0.05);Cooling組與Model組相比,Bax/Bcl-2、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9表達(dá)均有所減少,Cyt-c從線粒體到胞漿中釋放量減少(P0.05)。4線粒體腫脹試驗結(jié)果顯示,與Sham組相比,Model組線粒體吸光度下降率明顯增高(P0.05);與Model組相比,線粒體吸光度下降率在Heating組進一步增加(P0.05),在Cooling組有所下降(P0.05)。5TUNEL結(jié)果顯示,與Sham組相比,Model組中陽性細(xì)胞核明顯增多(P0.05);與Model組相比,凋亡細(xì)胞核在Heating組進一步增加(P0.05),在Cooling組有所減少(P0.05)。6免疫熒光與Western blot對大鼠肌肉組織中TNF-α和IL-6的檢測結(jié)果顯示,與Sham組相比,Model組肌肉組織中TNF-α和IL-6表達(dá)均顯著增加(P0.05);Heating組與Model組相比,TNF-α和IL-6表達(dá)均進一步上升(P0.05);Cooling組與Model組相比,TNF-α和IL-6表達(dá)均有所減少(P0.05)。結(jié)論1大鼠壓瘡早期肌肉組織出現(xiàn)損傷,炎性因子和線粒體凋亡通路參與了大鼠早期壓瘡的形成;2局部熱處理會加重受壓組織損傷程度,局部冷處理會減輕受壓組織損傷程度,因此臨床上對于早期壓瘡的防治和護理可能不適宜使用熱療法,應(yīng)采取冷療法。
【學(xué)位授予單位】：華北理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R47
【圖文】：

圖 1 壓瘡造模裝置Fig.1 The device of pressure ulcer modeling恒溫箱裝置主要由溫度計、泡沫箱組成，在泡沫箱一側(cè)設(shè)半徑為 0.75cm

溫度干預(yù)裝置

圖 3 大鼠壓瘡造模示意圖Fig.3 The preparation of pressure ulcer model in rat.6 實驗分組及處理方法

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2759203