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兒童感染耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的分子流行病學(xué)特征及臨床治療的體內(nèi)研究

發(fā)布時間:2020-07-09 21:50
【摘要】:目的分析比較安徽省內(nèi)兒童與14歲患者感染耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)的流行病學(xué)特征與耐藥性差異,并通過建立兔組織籠模型探索兒童感染殺白細(xì)胞素(panton-vanlentine leukocidin,pvl)陽性MRSA的治療方法,為兒童感染臨床治療提供病原學(xué)依據(jù)。方法臨床分離金黃色葡萄球菌(staphylococcus aureus,SA)738株,所有菌株均進(jìn)行藥敏試驗并通過聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)擴(kuò)增技術(shù)檢測mec A、殺白細(xì)胞素(pvl)基因,然后按年齡分組對所有菌株的mecA基因、pvl基因、科室來源、標(biāo)本來源及耐藥性進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析;在無菌條件下建立四組兔組織籠感染模型(A組感染pvl(+)MRSA,B組感染pvl(-)MRSA,C組感染ATCC43300,D組感染ATCC25923),并分別予利奈唑胺(實驗組))萬古霉素(對照組)治療,抽取每次治療前及治療達(dá)穩(wěn)態(tài)后前3天組織籠內(nèi)組織液并換算成細(xì)菌濃度進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果738株SA檢測為MRSA菌株共126株,占17.07%,pvl陽性菌株36株,陽性率為28.57%。兒童患者與14歲患者感染SA的mecA及pvl基因檢出率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05):其中分離自兒童患者M(jìn)RSA菌株32株,占20.92%,pvl陽性MRSA菌株7株,陽性率為21.88%;分離自14歲患者M(jìn)RSA菌株94株,占16.07%,其中陽性菌株29株,占30.85%。兒童患者感染MRSA主要來源于燒傷科(31.25%)、外科(15.63%)、ICU(9.38%),其中pvl(+)MRSA主要來源于外科(57.14%)、新生兒病區(qū)(28.57%)、呼吸內(nèi)科(14.29%),與14歲患者感染MRSA主要來源科室之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001)。兒童感染MRSA主要來源標(biāo)本為膿液(31.25%)、痰(25.00%)、創(chuàng)面(15.63%),pvl(+)MRSA主要來源于膿液(71.43%)、血(28.57%),與14歲患者感染MRSA標(biāo)本來源之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。兒童患者感染pvl(+)MRSA主要對β-內(nèi)酰胺類、大環(huán)內(nèi)酯類、氨基糖苷類、四環(huán)素類、林克酰胺類耐藥,pvl(-)MRSA主要對β-內(nèi)酰胺類、林克酰胺類、大環(huán)內(nèi)酯類、氨基糖苷類、喹諾酮類、磺胺類、四環(huán)素類耐藥,與14歲患者感染MRSA的耐藥性差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。四組兔組織籠細(xì)菌濃度經(jīng)利奈唑胺及萬古霉素治療后均呈現(xiàn)不同程度的下降,其中A、B兩組實驗組與對照組組織籠內(nèi)細(xì)菌濃度差異有統(tǒng)計學(xué)意義(A組:P0.001,B組:P=0.011,C、D兩組細(xì)菌濃度差異無統(tǒng)計學(xué)意義(C組:P=0.308,D組:P=0.349)。結(jié)論安徽省各地區(qū)兒童患者與14歲患者感染MRSA的流行病學(xué)特征差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)、耐藥性差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),兒童感染pvl(+)MRSA推薦使用利奈唑胺治療,臨床兒科醫(yī)師應(yīng)注意以上高發(fā)科室及標(biāo)本感染SA的mecA及pvl基因鑒定并根據(jù)藥敏結(jié)果合理用藥以達(dá)到更好的治療目的。
【學(xué)位授予單位】:安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:R446.5;R725.1
【圖文】:

電泳圖,凝膠電泳,成像,圖譜


安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文2 結(jié)果2.1 mecA、pvl 基因的 PCR 結(jié)果738 株 SA 共檢出 MRSA126 株,MRSA 陽性率為 17.07%,檢出 pvl 陽性菌株36 株,陽性率為 28.57%,其中分離自兒童患者的 153 株 SA 檢出為 MRSA 菌株共計 32 株,陽性率為 20.92%,pvl 陽性 MRSA 菌株 7 株,陽性率為 21.88%,分離自年齡>14 歲患者的 585 株 SA 檢出為 MRSA 菌株 94 株,陽性率為 16.07%,pvl 陽性 MRSA 菌株 29 株,陽性率為 30.85%,兒童患者與>14 歲患者感染 SA 之間檢測mecA 及 pvl 差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。部分 mecA、pvl 電泳圖見圖 1。

高爾夫,體積,直徑


當(dāng)手術(shù)切口恢復(fù)良好且重新滿透亮組織液,則兔組織籠模型建立成染模型作之前,用無菌注射器從每只兔組織籠 Mueller-Hinton 瓊脂培養(yǎng)皿上并置于 3菌生長的兔組織籠方能用于下一步實驗四組,分別往組織籠內(nèi)注射含細(xì)菌(A 組TCC43300;D 組:ATCC25923)濃度約染。感染兩天后從每只組織籠內(nèi)抽取 濃度達(dá)到 1×108cfu/mL 的兔組織籠才能爾夫練習(xí)球及建立的兔組織籠模型如圖

模型圖,模型,動力學(xué),萬古霉素


圖 3. 兔組織籠模型療 天后將每組兔 組織籠中隨機(jī)兩只分配為實驗組8H, 連續(xù)治療兩天達(dá)到動力學(xué)穩(wěn)態(tài)[38]))耳緣靜脈靜滴治萬古霉素(20mg/kg, Q12H, 連續(xù)治療 3 天達(dá)到動力學(xué)穩(wěn)態(tài)。度測量萬古霉素或利奈唑胺治療后組織籠內(nèi)不同 SA 菌株濃度變間每次治療前及治療達(dá)動力學(xué)穩(wěn)態(tài)后前三天均用無菌注射液 1ml 計算細(xì)菌濃度。將每份標(biāo)本進(jìn)行 10 倍稀釋(1: 1中 10ul 接種至 MH 瓊脂培養(yǎng)皿上并置于 37℃培養(yǎng)箱中培

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