【摘要】：第一部分miR-21、MMP-2和MMP-9在膿毒癥患者血漿中的表達水平及相關性分析目的:探討微小RNA-21(micro RNA-21,miR-21)、基質金屬蛋白酶-2(metalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-9在膿毒癥患者血漿中的表達水平及相關性分析,為探索膿毒癥診療新靶點提供理論和實驗依據(jù)。方法:通過在GEO數(shù)據(jù)庫中檢索膿毒癥相關數(shù)據(jù)集,根據(jù)是否有統(tǒng)計學意義(P0.05)及差異倍數(shù)(2),分析篩選差異表達mi RNA。選取膿毒癥患者(膿毒癥組)及健康志愿者(健康對照組)各40例作為研究對象,采用實時熒光定量PCR法和ELISA法檢測miR-21和MMP-2、MMP-9在膿毒癥組與健康對照組中的表達水平,并運用Pearson分析膿毒癥患者血漿中miR-21和MMP-2、MMP-9的相關性。結果:最終入選的數(shù)據(jù)集為GSE94717,符合條件的差異表達mi RNA為miR-21(P0.05)。膿毒癥組患者血漿miR-21、MMP-2和MMP-9表達水平較健康對照組升高,且兩者呈正相關(r=0.464,P0.05;r=0.538,P0.05)。結論:膿毒癥患者血漿中miR-21與MMP-2、MMP-9蛋白高表達,且呈正相關,可能存在調控關系。第二部分miR-21對脂多糖誘導下RAW264.7細胞MMP-2和MMP-9表達的調控及機制目的:探討miR-21對脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激下RAW264.7細胞中MMP-2和MMP-9表達的調控及機制,進一步研究miR-21在膿毒癥中的作用及機制。方法:對RAW264.7細胞給予10mg/ml LPS刺激,24h后采用實時熒光定量PCR法和ELISA法檢測miR-21和MMP-2、MMP-9在LPS組與對照組中的表達水平,并運用Pearson分析miR-21和MMP-2、MMP-9的相關性。構建外源性miR-21干擾的LPS刺激下RAW264.7細胞模型,采用Western blot檢測miR-21對MMP-2、MMP-9和TIMP-3蛋白表達影響。結果:LPS組miR-21、MMP-2和MMP-9表達水平較對照組上升,兩者呈正相關(P0.05)。通過miR-21模擬物(miR-21 mimic)外源性上調miR-21表達,MMP-2、MMP-9表達升高,TIMP-3表達降低(P0.05);通過miR-21抑制劑(miR-21 inhibitor)抑制miR-21表達,MMP-2、MMP-9表達降低,TIMP-3表達升高(P0.05)。結論:miR-21能促進RAW264.7細胞MMP-2和MMP-9表達,其機制可能與靶向抑制TIMP-3有關。
【圖文】：

組別 miR-21（２－△△Ｃｔ）MMP-2 MMP-對照組 1.00±0.00 72.84±11.04 167.34±1毒癥組 1.83±0.31* 109.69±28.82* 384.60±61康對照組相比，* P＜0. 05 ，#P＜0. 01癥組患者血漿 MMP-2 和 MMP-9 蛋白表達升高組患者血漿，用 ELISA 方法檢測各組 MMP-2 和 MMP-9 的表達水平毒癥組患者血漿中 MMP-2 和 MMP-9 表達較健康對照組表達升高，差（P<0.05），見表 2.2。癥患者血漿 miR-21 與 MMP-2、MMP-9 水平的關系son 相關分析結果顯示膿毒癥組患者血漿中 miR-21 表達水平與 M平呈正相關（r=0.464，P<0.05; r=0.538，P<0.05）。

圖 2-2 膿毒癥組 miR-21 與 MMP-9 表達相關性分析Figure2-1 Correlation analysis between miR-21 and MMP-9 expression in sepsis gr癥是機體對感染引起的全身炎癥反應綜合癥，其發(fā)病率高，病死率高病房的主要問題之一，，而通過早期診斷、有效干預治療能降低膿毒癥尋找能早期診療膿毒癥的標志物和治療靶標。本部分研究通過探討 MMP-2 和 MMP-9 的表達水平，并進一步探索 miR-21 與 MMP-2系，尋找膿毒癥新的診斷標志物和治療靶標。癥組患者血漿 miR-21 表達升高反應失衡是膿毒癥的中心環(huán)節(jié)。miRNA 是一類非編碼單鏈小分子 R 3’端結合抑制靶基因表達，在轉錄后水平負向調控基因表達，參與調
【學位授予單位】：右江民族醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R459.7

【參考文獻】

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1 陶楊;肖玲;黃健;馬渝;;烏司他丁通過miR-21/p38MAPK通路對膿毒癥保護作用的研究[J];中華急診醫(yī)學雜志;2018年11期

本文編號：2708810