【摘要】：第一部分:斑點追蹤成像技術定量評價放射性心臟損傷的實驗研究第一節(jié):二維斑點追蹤成像技術定量評價比格犬心肌局部照射后左心室收縮功能改變目的:應用二維斑點追蹤成像(2D-STI)技術定量評價比格犬心肌局部照射后左心室收縮功能的早期改變,探討2D-STI在監(jiān)測放射性心臟損傷(RIHD)中的潛在價值。方法:1、將36只健康雄性一歲齡比格犬隨機分為對照組(18只)和照射組(18只)。照射組比格犬左室前壁心肌給予單次20Gy局部照射,對照組比格犬相同部位心肌給予虛擬照射。2、分別在心臟照射前一周及照射后3、6、12個月四個時間點對兩組比格犬行常規(guī)超聲心動圖及2D-STI檢查。同時采集比格犬后肢外側小隱靜脈血標本,檢測心肌損傷分子標志物肌鈣蛋白I(cTnI)濃度。3、每次超聲檢查結束后分別從對照組和照射組中隨機挑選6只比格犬處死,取照射組照射區(qū)心肌及對照組相同節(jié)段心肌,通過蘇木素-伊紅(HE)染色觀察照射前后心肌組織形態(tài)學改變;通過小麥胚凝集素(WGA)染色,觀察照射前后心肌細胞形態(tài)變化;通過Masson染色觀察心肌纖維化改變;通過CD34免疫組化染色觀察心肌微血管密度的改變。4、應用EchoPAC工作站內2D-STI分析軟件定量分析左室心肌整體縱向應變(GLS)及各節(jié)段心肌縱向應變(LS)的改變,對照同期左室心肌病理組織學變化,明確2D-STI早期發(fā)現(xiàn)RIHD左室收縮功能改變的價值。結果:1、照射前、照射后3個月、6個月,照射組與對照組比格犬體重差別無明顯統(tǒng)計學意義;至照射后12個月時,照射組比格犬體重顯著低于對照組,且飲食、活動及精神狀態(tài)差,毛發(fā)粗糙無光澤。2、照射后3個月,照射組常規(guī)超聲測量參數(shù)(包括左室收縮功能指標LVEF)未見明顯改變;而2D-STI結果顯示,照射組左室照射區(qū)及鄰近區(qū)域多個節(jié)段心肌LS減低,左室GLS亦減低,提示左室收縮功能減退;照射組血清cTnI濃度與對照組無明顯差別;同期病理顯示照射組比格犬照射區(qū)心肌細胞出現(xiàn)輕度形態(tài)異形,少量間質纖維組織增生,小血管管壁輕度纖維化,心肌間質微血管密度稍增加。3、照射后6個月,照射組常規(guī)超聲測量參數(shù)部分出現(xiàn)改變,左室收縮末期容積(LVESV)增加,舒張末期容積(LVEDV)不變,左室射血分數(shù)(LVEF)下降;而2D-STI結果顯示,照射組左室照射區(qū)及鄰近區(qū)域多個節(jié)段心肌LS及GLS進一步減低;照射組血清cTnI濃度與對照組無明顯差別;同期病理顯示照射區(qū)心肌細胞明顯退變、體積增大、排列紊亂,中度間質纖維組織增生,小血管管壁增厚,心肌間質微血管密度降低。4、照射后12個月,照射組常規(guī)超聲測量參數(shù)LVEDV、LVESV增加,LVEF下降更明顯,左室照射區(qū)及鄰近區(qū)域可見局部室壁活動減弱;2D-STI結果顯示,照射組左室心肌應變減低區(qū)LS及GLS進一步減低;照射組血清cTnI濃度與對照組無明顯差別:同期病理顯示照射區(qū)心肌細胞出現(xiàn)片狀壞死,間質彌漫性纖維化,小血管壁明顯增厚、內壁不光整及管腔狹窄,間質微血管密度進一步降低。結論:1、心肌損傷標志物血清cTnI并不能很好地反映遲發(fā)性RIHD心肌損傷情況。2、2D-STI可在常規(guī)超聲心動圖發(fā)現(xiàn)左室形態(tài)、室壁運動、LVEF改變前,早期檢測出RIHD左室收縮功能的改變。3、2D-STI技術可早期檢測出與照射區(qū)范圍一致的左室心肌縱向應變的減低,可作為早期診斷及監(jiān)測RIHD的新方法。第二節(jié):三維斑點追蹤成像技術定量評價肺癌患者放療后左心室收縮功能早期改變目的:應用三維斑點追蹤成像(3D-STI)技術定量評價肺癌患者放療后左心室收縮功能的早期改變,探討3D-STI技術在監(jiān)測RIHD中的臨床應用價值。方法:1、依據(jù)入組及排除標準,2016.12-2017.12期間選擇在我院行首次放療的肺癌患者作為研究對象。2、所有肺癌患者分別于放療前、放療2.5-3周(照射劑量25-33Gy)、放療5-6周(照射劑量50-66Gy)、放療結束后3個月、6個月、12個月六個時間點行常規(guī)超聲心動圖及3D-STI檢查。同期行常規(guī)心電圖及血清肌鈣蛋白I(cTnI)濃度檢測。3、應用Tom-tec工作站內3D-STI分析軟件定量分析左室整體縱向應變(GLS)、整體徑向應變(GRS)、整體圓周應變(GCS)及整體應變(GS)的動態(tài)改變。同時對比心電圖及血清cTnI濃度變化,探索3D-STI早期診斷RIHD的臨床應用價值。結果:1、研究共納入55例肺癌放療患者,所有患者均順利完成放療計劃并配合采集和記錄各時間點常規(guī)心電圖、常規(guī)超聲心動圖、3D-STI及血清cTnI數(shù)據(jù)。放療結束后3個月7例患者失訪,放療結束后6個月11例患者失訪,放療結束后12個月15例患者失訪。2、常規(guī)超聲心動圖各參數(shù)(包括左室收縮功能指標LVEF)測值在放療前、放療結束后3個月、6個月及12個月內無顯著改變。但在放療5-6周時發(fā)現(xiàn)3例(3/55)患者出現(xiàn)少量心包積液,在放療結束后3個月全部吸收。3、3D-STI結果顯示,與放療前相比,放療2.5-3周時左室心肌GLS、GRS、GCS、GS無顯著變化;放療5-6周時左室心肌GLS、GS減低,差異有統(tǒng)計學意義;放療結束后3個月、6個月及12個月時左室心肌GLS、GRS、GCS、GS絕對值顯著低于放療前,提示肺癌患者放療后左室收縮功能減退。4、心電圖結果顯示,15例(15/55)肺癌患者在放療過程中及1例(1/55)在放療結束后3個月出現(xiàn)心電圖異常,大多數(shù)(11/16)在放療結束后3個月內恢復正常。血清cTnI結果顯示,與放療前相比,放療2.5-3周、放療5-6周患者血清cTnI升高,差異有統(tǒng)計學意義;放療結束后3個月、6個月及12個月時血清cTnI恢復正常。結論:1、3D-STI技術可早于常規(guī)超聲心動圖發(fā)現(xiàn)RIHD左室收縮功能的亞臨床改變。2、心電圖異常、血清cTnI升高及常規(guī)超聲心動圖發(fā)現(xiàn)心包積液對診斷急性RIHD有一定臨床價值,但對遲發(fā)性RIHD不敏感。3、遲發(fā)性RIHD的早期診斷以STI更有臨床價值,2D-STI、3D-STI均可作為無創(chuàng)性早期檢測RIHD的新方法。第二部分:LncRNA799評價宮頸癌預后的實驗研究目的:1、明確LncRNA799在宮頸癌組織中的表達情況。2、明確LncRNA799表達與宮頸癌患者預后的關系。方法:1、收集218對宮頸癌術后癌組織及相應癌旁組織標本。2、Real-Time RT-PCR檢測LncRNA799在宮頸癌及相應癌旁組織的表達。3、分析LncRNA799表達與宮頸癌患者臨床病理資料及預后的關系。結果:1、LncRNA799在宮頸癌組織中的表達明顯高于癌旁(P0.001),淋巴結轉移陽性患者LncRNA799表達明顯高于淋巴結轉移陰性患者(P0.0001)。2、LncRNA799高表達組患者無瘤生存率顯著低于低表達組患者(P=0.016);LncRNA799高表達組患者總生存率顯著低于低表達組患者(P=0.004)。3、LncRNA799高表達顯著與FIGO分期(P0.014)、SCC-Ag(P0.015)和宮頸癌淋巴結轉移(P0.0001)相關;與患者年齡、腫瘤分化、腫瘤大小、腫瘤浸潤深度及是否浸潤宮頸管無關(P0.05)。結論:1、LncRNA799在宮頸癌中高表達。2、LncRNA799高表達與宮頸癌淋巴結轉移相關。3、LncRNA 799高表達預示宮頸癌患者不良預后。
【圖文】：

將 36 只比格犬完全隨機分為兩組，對照組 18 只、照射組 18 只。兩組比犬均于照射前 1 周行常規(guī)超聲心動圖及 2D-STI 檢查。然后對照射組比格犬行部心臟照射，對照組比格犬行同部位心肌虛擬照射。分別在照射后 3 個月、6月、12 個月三個時間點對兩組比格犬行常規(guī)超聲心動圖及 2D-STI 檢查，每次查完分別從兩組隨機挑選 6 只比格犬執(zhí)行安樂死，解剖胸腔，取離體心臟進組織病理學檢測。1.2.2 實驗動物心臟局部照射兩組比格犬經(jīng) 3%戊巴比妥 30mg/kg 腹腔注射麻醉，動物自主呼吸。取仰位真空墊塑型抽氣固定，外激光線標記照射等中心點，注射碘伏增強照影劑行 CT 掃描，，將 CT 定位掃描圖像傳至 Elekta MC TPS 系統(tǒng)，逐層勾畫出左心前壁（參照左室 16 節(jié)段劃分法），并外擴 3mm 作為照射靶區(qū)。物理師布野制定照射計劃，照射劑量為單次 20Gy。物理計劃評價通過后，立即在直線加器上實施照射計劃（圖 1）。對照組比格犬行上述相同步驟，但不給予實際射照射。

統(tǒng)計學處理用 SPSS22.0 軟件進行統(tǒng)計分析，連續(xù)變量描述性統(tǒng)計結果用均數(shù) ±s）表示，兩組連續(xù)變量資料之間的比較采用 t 檢驗（雙邊）；多料之間的比較采用方差分析（LSD 法）；觀察者內及觀察者間的用 Bland-Atlman 分析；非連續(xù)變量之間的比較采用卡方檢驗（秩和5 表示差異存在顯著性。果重及生長情況組比格犬均順利完成整個實驗過程。照射前、照射后 3 個月、6 個體重無明顯差別（P＞0.05）。照射后 12 個月，照射組比格犬體重于對照組（P<0.05），且飲食、活動及精神狀態(tài)差，毛發(fā)粗糙無光比格犬體重穩(wěn)定增長，飲食、活動及精神狀態(tài)正常（圖 2）。
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R730.44;R445.1

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本文編號：2680805