【摘要】：【目的】探討豐富環(huán)境對(duì)電離輻射所致小鼠認(rèn)知功能障礙的保護(hù)作用及其可能的機(jī)制。為臨床放射性認(rèn)知功能障礙的防治工作提供新的思路�！痉椒ā�(1)動(dòng)物分組:36只健康成年雌性昆明小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、輻射組(IR)和輻射豐富環(huán)境組(IR+EE)。(2)模型建立:小鼠采用~(137)Csγ射線進(jìn)行全身輻照至吸收劑量4 Gy,構(gòu)建放射性認(rèn)知功能障礙模型;IR+EE組小鼠在輻照后第二天起給予連續(xù)35 d的EE刺激;(3)行為學(xué)檢測(cè):使用新物體識(shí)別實(shí)驗(yàn)檢測(cè)小鼠認(rèn)知功能;(4)生物化學(xué)檢測(cè):采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)小鼠海馬腦區(qū)神經(jīng)發(fā)生標(biāo)記物雙皮質(zhì)素(DCX)及磷酸化環(huán)磷酸腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白(p-CREB)的表達(dá);采用免疫蛋白印跡法檢測(cè)海馬區(qū)CREB及p-CREB的表達(dá)�！窘Y(jié)果】(1)小鼠新物體識(shí)別實(shí)驗(yàn)結(jié)果:與對(duì)照組相比,IR組小鼠新物體分辨率明顯降低(P0.05);與IR組小鼠相比,IR+EE組小鼠新物體分辨率明顯增加(P0.05)。(2)小鼠海馬區(qū)DCX結(jié)果:與對(duì)照組相比,IR組小鼠海馬區(qū)DCX陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯減少(P0.05);與IR組小鼠相比,IR+EE組小鼠海馬區(qū)DCX陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯增加(P0.05)。(3)小鼠海馬區(qū)CREB及p-CREB的表達(dá)情況:免疫蛋白印跡法及免疫組織化學(xué)法檢測(cè)結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,IR組小鼠海馬區(qū)CREB表達(dá)無(wú)明顯減低,p-CREB蛋白及p-CREB/CREB表達(dá)下調(diào)(P0.05);與IR組小鼠相比,IR+EE組小鼠CREB蛋白表達(dá)無(wú)差異(P0.05),而p-CREB蛋白及p-CREB/CREB表達(dá)上調(diào)(P0.05)�！窘Y(jié)論】1.豐富環(huán)境對(duì)電離輻射所致小鼠認(rèn)知功能障礙具有改善作用。2.豐富環(huán)境可通過(guò)激活海馬區(qū)CREB蛋白的表達(dá),促進(jìn)海馬神經(jīng)發(fā)生,從而改善放射性認(rèn)知功能障礙。
【圖文】：

14圖 1 輻照后各組小鼠海馬區(qū) DCX 的表達(dá)變化：（a）免疫組織化學(xué)染色 DCX 的表達(dá)，Bar=100μm in A-C, Bar=50μm in D-F；（b）DCX 陽(yáng)性細(xì)胞統(tǒng)計(jì)結(jié)果，**與對(duì)照組相比，P<0.01；#與輻射組相比，P<0.05。3.3 小鼠海馬區(qū) CREB 及 p-CREB 的表達(dá)情況小鼠海馬區(qū) CREB 及 p-CREB 的表達(dá)情況如圖 2 所示。圖 2(a)為各組原始條帶。由圖 2(b)~2(d)可知，與對(duì)照組相比，IR 組小鼠海馬區(qū) p-CREB/CREB 表達(dá)下調(diào)（圖 2(b)，1.007 ± 0.058 vs. 0.772 ± 0.039，P<0.05），p-CREB 蛋白表達(dá)下調(diào)（圖 2(c)，1.000 ± 0.021 vs. 0.762 ± 0.035，P<0.01)，而 CREB 蛋白表達(dá)無(wú)差異（圖 2(d)，，1.000 ± 0.104 vs. 1.013 ± 0.057，P>0.05)，提示電離輻射可誘使海馬CREB 蛋白磷酸化減少。而與 IR 組相比，IR+EE 組小鼠海馬區(qū) p-CREB/ CREB表達(dá)上調(diào)(0.772 ± 0.039 vs. 1.014 ± 0.093，P<0.05)，p-CREB 蛋白表達(dá)上調(diào)(0.762 ±

圖 2 輻照后各組小鼠海馬區(qū) CREB 及 p-CREB 的表達(dá)情況：(a) Western blotting 顯示各組小鼠海馬區(qū) CREB 及 p-CREB 蛋白的表達(dá)；(b) p-CREB/CREB 蛋白定量分析，*與對(duì)照組相比，P<0.05；#與輻射組相比，P<0.05；(c) p-CREB 蛋白定量分析，**與對(duì)照組相比，P<0.01；##與輻射組相比，P<0.01； (d) CREB 蛋白定量分析。為進(jìn)一步驗(yàn)證上述結(jié)果，使用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)海馬區(qū) p-CREB 的表達(dá)情況，結(jié)果顯示：與對(duì)照組相比，IR 組海馬腦區(qū) p-CREB 表達(dá)水平較低；而經(jīng)豐富環(huán)境刺激后 p-CREB 的表達(dá)上調(diào)（P<0.05），如圖 3。
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R730.55

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本文編號(hào)：2660628