【摘要】：目的:1.建立一種快速、靈敏的電化學(xué)方法直接檢測吲哚并探索其反應(yīng)原理。2.基于多壁碳納米管(Multi-walled carbon nanotubes,MWCNTs)-殼聚糖(Chitosan,CS)修飾絲網(wǎng)印刷碳電極(Screen printed carbon electrode,SPCE)構(gòu)建一種血漿吲哚電化學(xué)傳感器。3.用所建立的電化學(xué)方法檢測健康孕婦和妊娠期糖尿病(Gestational diabetes mellitus,GDM)患者血漿吲哚含量,并探究吲哚在妊娠生理和病理狀態(tài)下的濃度變化。方法:1.利用吲哚咪唑環(huán)中碳-碳雙鍵能夠被氧化的特點(diǎn),采用免修飾SPCE分別運(yùn)用循環(huán)伏安法(Cyclic voltammetry,CV)和差分脈沖伏安法(Differential pulse voltammetry,DPV)對吲哚進(jìn)行定性和定量分析。2.超聲MWCNTs的CS溶液獲得均勻的分散液,離心去除懸浮顆粒后將分散液滴加在SPCE表面,室溫下干燥,制備MWCNTs-CS/SPCE修飾電極。血漿樣本經(jīng)液液萃取后與緩沖液混勻,將溶液滴加于SPCE上,通過DPV進(jìn)行電化學(xué)檢測。3.采用所構(gòu)建的MWCNTs-CS/SPCE傳感器測定21例健康孕婦和21例GDM患者血漿吲哚含量,并采集相應(yīng)臨床資料和實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)。結(jié)果:1.通過CV圖中吲哚的氧化峰面積,根據(jù)吸附等溫式和能斯特方程計(jì)算可得,在電化學(xué)氧化吲哚的過程中失去2個(gè)電子和2個(gè)質(zhì)子。在最優(yōu)條件下,吲哚的線性范圍為0.125-10.0 mg/L,回歸方程:y=0.3615x-0.0537(R~2=0.9984),檢出限為25μg/L(S/N=3)。日內(nèi)和日間變異分別低于4.3%和5.5%,平均回收率為80.6%-126.9%。2.在最優(yōu)條件下,血漿吲哚的線性范圍為5.0-100.0μg/L,回歸方程:?I=0.0228c+0.3007(R~2=0.9905),檢出限為0.5μg/L(S/N=3),日內(nèi)和日間變異分別低于7.3%和9.0%,平均回收率為93.8%-107.0%。用該方法和高效液相色譜法同時(shí)測定24例臨床樣本吲哚濃度,相關(guān)性分析顯示測定結(jié)果呈顯著正相關(guān)(r=0.886,p=0.000)。3.血漿吲哚含量在健康孕婦和GDM患者兩組間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),分別為5.3(4.1-7.0)μg/L和7.2(4.5-9.4)μg/L。相比對照組,GDM組濃度明顯升高。此外,GDM組空腹胰島素水平及胰島素抵抗指數(shù)(Homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR)明顯高于對照組(P0.001)。在所有檢測對象中吲哚含量與TG水平呈正相關(guān)(r=0.312,p=0.044),在GDM組中吲哚含量與HOMA-IR成負(fù)相關(guān)(r=-0.364,p=0.022)。結(jié)論:1.免修飾SPCE直接檢測吲哚響應(yīng)速度快、靈敏度較高、重現(xiàn)性較好,在制作吲哚電化學(xué)傳感器方面具有良好的應(yīng)用前景。2.MWCNTs-CS/SPCE檢測血漿吲哚快速、靈敏,具有良好的抗干擾能力,為臨床檢測和實(shí)驗(yàn)室研究提供一種有前景的方法。3.GDM患者體內(nèi)存在吲哚代謝紊亂,提示吲哚在GDM疾病發(fā)展過程中可能發(fā)揮重要作用。
【圖文】：

HI852C 電化學(xué)工作站（上海辰華儀器有限公司），1004A 電子天平（上海精天電子儀器有限公司），-3200 超聲波清洗器（上海必能信超聲有限公司），S-3C 精密酸度計(jì)（上海精天電子儀器有限公司），illi-Q 超純水過濾裝置（美國 Millipore 公司）。極的制備CE 根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道[17]制備：SPCE 包括印制電極的聚對苯二甲酸乙二醇ethylene terephthalate, PET）基片、PET 基片上的外部絕緣層和一端的接上印制一個(gè)圓形工作區(qū)域，區(qū)域內(nèi)包括工作電極、對電極以及參比電極通過導(dǎo)線與接口相連，并在表面覆蓋一層絕緣膜，其制備過程如流程圖新制 SPCE 用超純水沖洗干凈后晾干備用。

電子數(shù)Cyclic voltammetry, CV）峰電流與掃描速度呈線性關(guān)合 Langmuir 吸附等溫式，即有：子數(shù)；F 為法拉第常數(shù)；υ 為掃描速度；A 為電極nFAΓT為 CV 圖中吲哚的氧化峰面積(以電量計(jì))。此，當(dāng)掃描速度 υ 一定時(shí)，通過吲哚氧化峰面積2，即吲哚在電極上的氧化反應(yīng)共有 2 個(gè)電子轉(zhuǎn)移。質(zhì)子數(shù)位 Ep隨溶液 pH 值的變化關(guān)系如圖 1.1。隨著 pH，說明反應(yīng)中存在質(zhì)子轉(zhuǎn)移。由圖可知，峰電位 E程為 y=-0.0491x+0.8410，，R2=0.9924。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R446.11

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

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本文編號：2597803