本文關鍵詞：石榴皮提取物鞣質(zhì)對鮑曼不動桿菌生物膜的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討石榴皮提取物鞣質(zhì)對鮑曼不動桿菌(Acinetobacter baumannii,Ab)生物膜的形成以及已形成的生物膜的影響,為臨床Ab生物膜相關感染的治療提供理論及實驗依據(jù)。方法:1.采用肉湯稀釋法分別測定石榴皮丙酮提取物鞣質(zhì)和環(huán)丙沙星(ciprofloxacin,CIP)對Ab ATCC19606最低抑菌濃度(minimum inhibitory concentration,MIC)。2.采用結(jié)晶紫染色法測定1/2MIC、1/4MIC、1/8MIC的鞣質(zhì)作用于Ab 4h、8h、24h、48h后的光密度值;再將上述不同濃度鞣質(zhì)作用Ab 48h,在熒光顯微鏡下,觀察鞣質(zhì)對Ab生物膜形成的影響。3.分別配制1/2MIC、1MIC、2MIC濃度的鞣質(zhì)和CIP,將兩藥單獨及聯(lián)合作用已形成的Ab生物膜4h、8h、24h、48h,采用結(jié)晶紫染色法及平板菌落計數(shù)法分別測定光密度值和菌落數(shù);再將上述不同濃度鞣質(zhì)作用已形成的Ab生物膜24h,分別在熒光顯微鏡和激光共聚焦顯微鏡(confocal Laser Scanning Microscope,CLSM)下,觀察鞣質(zhì)對已形成的Ab生物膜的影響。4.采用實時熒光定量PCR(fluorescent quantitative PCR,FQ-PCR)檢測鞣質(zhì)和CIP單獨及聯(lián)合干預生物膜相關基因自誘導合成酶基因(Aba I)、生物膜相關蛋白基因(Bap)、粘附素因子基因(Csu E)、外膜孔蛋白A基因(Omp A)的影響。結(jié)果:1.石榴皮提取物鞣質(zhì)和CIP對Ab ATCC19606的MIC分別為1.95 mg/m L、0.50 mg/m L。2.鞣質(zhì)對Ab生物膜形成的影響:1/2MIC、1/4MIC、1/8MIC濃度鞣質(zhì)作用于Ab 4h、8h、24h、48h后,對生物膜的形成均有抑制作用,但在48h時抑制效果最好,且當濃度由1/4MIC增加到1/2MIC時,其光密度值降低達2倍;在鞣質(zhì)作用48h后,經(jīng)熒光染色后,在熒光顯微鏡觀察隨著鞣質(zhì)濃度增大對生物膜形成的抑制效果增強,且1/2MIC鞣質(zhì)濃度時,熒光顯微鏡見少量稀薄點狀綠色熒光。3.鞣質(zhì)和CIP單獨及聯(lián)合干預對已形成的Ab生物膜的影響:1/2MIC、1MIC、2MIC濃度的鞣質(zhì)和CIP單獨及聯(lián)合作用于已形成的Ab生物膜4h、8h、24h、48h后,結(jié)果顯示單獨用藥不如聯(lián)合用藥效果好,且聯(lián)用時以2MIC(鞣質(zhì)+CIP)作用24h效果最好,其光密度值(0.40±0.17)較空白組(2.20±0.42)下降;菌落計數(shù)(12±5)×106CFU/m L較空白組(153±20)×106CFU/m L下降;熒光顯微鏡下僅見稀薄綠色熒光;CLSM下見大量紅色熒光。4.FQ-PCR檢測鞣質(zhì)和CIP單獨及聯(lián)合干預對已形成的Ab生物膜相關基因Aba I、Bap表達上調(diào),Omp A、Csu E基因表達下調(diào)。結(jié)論:1.石榴皮提取物鞣質(zhì)對Ab生物膜形成有一定的抑制作用,在本實驗劑量范圍內(nèi),隨著濃度增大其效果增強,1/2MIC鞣質(zhì)能抑制50%的生物膜量形成;2.石榴皮提取物鞣質(zhì)或CIP單獨作用對已形成的Ab生物膜的影響效果不如聯(lián)用效果好,當聯(lián)用時對生物膜有一定的破壞和清除作用,以2MIC鞣質(zhì)與2MIC CIP聯(lián)用效果最好,能清除大部分的生物膜;3.石榴皮提取物鞣質(zhì)和CIP可能通過影響與生物膜形成相關基因的(Aba I、Bap、Csu E、Omp A)的表達而影響生物膜的形成。
【關鍵詞】：鮑曼不動桿菌 生物膜 石榴皮提取物鞣質(zhì) 環(huán)丙沙星
【學位授予單位】：遵義醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R446.5
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-10
• 1 材料與方法10-19
• 2 結(jié)果19-28
• 3 討論28-31
• 4 結(jié)論31-32
• 參考文獻32-35
• 綜述：鮑曼不動桿菌生物膜的研究進展35-43
• 參考文獻40-43
• 致謝43-44
• 作者簡介44

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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  本文關鍵詞：石榴皮提取物鞣質(zhì)對鮑曼不動桿菌生物膜的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：255982