本文選題：金黃色葡萄球菌 + MRSA�。� 參考：《鄭州大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)簡稱金葡菌,是一種機會性致病菌,可以引起多種疾病,同時也是導(dǎo)致人類食物中毒的重要病原菌,引起的食物中毒占世界第三位。由于抗生素的不合理使用,造成金葡菌耐藥菌株的出現(xiàn),給人類健康帶來巨大的影響,引起了國內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注。根據(jù)金葡菌對甲氧西林的耐藥情況,可以分為耐甲氧西林金葡菌(Methicillin-resistant Staphylococeus aureus,MRSA)和甲氧西林敏感金葡菌(Methicillin-sensitive Staphylococcus aureus,MSSA)。金葡菌的致病性和其含有的毒力因子有關(guān)。不同地區(qū)、不同來源金葡菌的耐藥情況、流行菌株不同,研究菌株流行情況可以為金葡菌的預(yù)防提供參考。目的1.了解不同種類食品中含有的金葡菌耐藥特點及毒力基因攜帶情況,比較食品來源與醫(yī)院來源的菌株在耐藥特點與毒力基因分布方面的差異。2.比較MRSA與MSSA菌株耐藥譜、耐藥基因與毒力基因攜帶情況,分析MRSA菌株的SCCmec分型。3.了解金葡菌的agr分型,比較不同型別攜帶毒力基因的差異。4.獲得不同來源金葡菌的spa流行型別,了解本地區(qū)金葡菌的流行特征。方法1.根據(jù)最低抑菌濃度(MIC)對不同來源金葡菌進行臨床常用8種藥物的藥敏檢測。2.設(shè)計引物,運用PCR方法擴增不同來源金葡菌的耐藥基因與毒力基因。3.多重PCR對MRSA菌株進行SCCmec分型。4.多重PCR對金葡菌進行agr分型。5.引物合成后,運用PCR擴增,對擴增產(chǎn)物進行雙向測序拼接后,根據(jù)重復(fù)序列類型及順序進行金葡菌的spa分型。6.統(tǒng)計軟件SPSS21.0進行統(tǒng)計分析,不同來源菌株之間、MRSA與MSSA之間的耐藥表型、耐藥基因與毒力基因攜帶率的差異用χ2檢驗進行分析。結(jié)果1.藥敏結(jié)果顯示,275株金葡菌均對萬古霉素敏感,其中醫(yī)院、生鮮肉和米面制品來源的菌株對所選的8種抗生素中的7種呈現(xiàn)不同程度耐藥,而肉制品和果蔬來源的對6種抗生素出現(xiàn)耐藥。與食品分離株相比,醫(yī)院來源的菌株對青霉素、紅霉素、克林霉素、環(huán)丙沙星和慶大霉素等5種藥物的耐藥率明顯較高,耐藥基因acc(6')/aph(2''),aph(3')-III,erm A,erm B和tet M的陽性率也比較高,ant(4',4'')的陽性率則比較低。食品與醫(yī)院來源的菌株中毒力基因陽性率最高的都是hla基因,基因sea,seb,pvl和etb的陽性率在醫(yī)院來源的菌株中明顯較高,而hla和hlb則在食品來源的菌株中較高。2.MRSA總檢出率是34.18%,其中醫(yī)院分離株MRSA檢出率為37.84%,食品分離株為29.92%,兩種來源菌株MRSA檢出率之間沒有明顯差異。在食品來源的菌株中,生鮮肉MRSA的檢出率為40.00%,肉制品是17.65%,果蔬是11.11%,米面制品則是29.73%。與MSSA菌株相比,MRSA對紅霉素、克林霉素、環(huán)丙沙星、慶大霉素和四環(huán)素5種藥物的耐藥率明顯較高,耐藥基因erm A,msr A和tet M的陽性率在MRSA中也比較高,而毒力基因攜帶率在兩者中的差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義。3.94株MRSA菌株中有3種SCCmec型別,分別是SCCmecⅢ型(62.77%)、SCCmecⅣa型(15.96%)和SCCmecⅡ型(2.13%),還有18株未分型。其中醫(yī)院和不同種類食品來源的MRSA菌株中都是SCCmecⅢ型比例最高。4.275株金葡菌中,agrⅠ型有167株(60.73%)、Ⅱ型45株(16.36%)、Ⅲ型41株(14.91%)、Ⅳ型11株(4.00%),還有11株未分型。5.醫(yī)院來源菌株中流行的spa型別是t030和t437,食品來源菌株中則是t002和t091。本研究中MRSA最常見的型別是SCCmecⅢ-t030-agrⅠ型和SCCmecⅣa-t437-agrⅠ型,MSSA菌株中最常見的型別則是t002-agrⅡ型和t189-agrⅠ型。結(jié)論1.金黃色葡萄球菌耐藥現(xiàn)象普遍存在,食品中不同來源的菌株耐藥與毒力特點不同,醫(yī)院來源菌株與食品來源菌株相比,耐藥現(xiàn)象更嚴(yán)重,耐藥基因攜帶率、致病性都比較高。2.MRSA與MSSA菌株相比,耐藥現(xiàn)象明顯,耐藥基因攜帶率高,但毒力基因攜帶率卻沒有差別。MRSA菌株中SCCmec分型的流行型別是SCCmecⅢ型,不同SCCmec型別耐藥譜不同,毒力基因攜帶率也有不同。3.金葡菌中agrⅠ型比例最高,其次是Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型,不同agr型別含有的優(yōu)勢毒力基因不同。4.不同來源的菌株spa流行型別不同,spa型別與agr分型之間存在某些聯(lián)系。
[Abstract]:Staphylococcus aureus ( Staphylococcus aureus ) is a opportunistic pathogen , which can cause multiple diseases , and it is an important pathogenic bacterium causing food poisoning in humans . Due to the irrational use of antibiotics , the emergence of drug - resistant strains of Staphylococcus aureus can cause great influence on human health , which can be divided into Methicillin - resistant Staphylococcus aureus ( MRSA ) and Methicillin - sensitive Staphylococcus aureus ( MSSA ) . The pathogenic factors and virulence genes of Staphylococcus aureus were analyzed by PCR . The positive rates of resistant genes erm A , seb , pvl and etb were significantly higher in the strains of food sources than those in the strains of food sources . The rates of resistance genes erm A , msr A and tet M were 11.11 % and 29.73 % respectively .

【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R446.5

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本文編號：1875863