本文選題：鐵蛋白 + 銪　； 參考：《現(xiàn)代免疫學(xué)》2017年01期

【摘要】：以人鐵蛋白(ferritin,FER)為材料,制備納米銪核微粒,并建立競爭型FER免疫檢測方法。用稀鹽酸解離FER的亞基后,純化脫去游離鐵,再通過酸堿中和方法重組蛋白外殼,同時將銪離子包裹于去鐵蛋白內(nèi),制備銪核鐵蛋白。經(jīng)反應(yīng)條件優(yōu)化,確定pH 2.0為FER最適解離酸度。FER外殼重組時,銪試劑的添加量約為FER物質(zhì)量的10 000倍時能獲得最大捕獲效率。以此建立了銪核-FER時間分辨熒光免疫檢測方法,其靈敏度為0.576ng/mL,IC_(50)為13.15ng/mL,批間變異系數(shù)CV%15%,非特異性結(jié)合率低。用制備成的銪核-FER構(gòu)建的競爭法TRFIA與FER夾心法試劑盒對照,兩者相關(guān)系數(shù)達0.966。通過上述方法獲得免疫活性好、銪含量高的標記用納米分子,簡化了傳統(tǒng)的銪標記方法,建立了構(gòu)建納米銪核鐵蛋白的新方法。
[Abstract]:The europium nanoparticles were prepared by using human ferritin ferrite (ferritin ferrite) as material and a competitive FER immunoassay method was established.After dissociating the subunit of FER with dilute hydrochloric acid, the free iron was purified and removed, then the recombinant protein shell was neutralized by acid and alkali, and the europium ion was encapsulated in the deferritin to prepare europium nuclear ferritin.After optimizing the reaction conditions, it was determined that when pH 2.0 was the optimal dissociation acidity. Fer shell recombination, the maximum capture efficiency could be obtained when the amount of europium reagent was about 10 000 times of the mass of FER.A time-resolved fluorescence immunoassay for europium nucleus-fer was established. The sensitivity of the method was 0.576ng / mL ~ (-1) and the coefficient of variation (CV) was 13.15ng / mL, and the nonspecific binding rate was low.The correlation coefficient between TRFIA and FER sandwich kit was 0.966.A new method for the construction of europium nucleoferritin (NSF) was established by using the above methods to obtain the nanomolecules with good immunological activity and high europium content, which simplified the traditional europium labeling method.
【作者單位】： 江蘇省原子醫(yī)學(xué)研究所衛(wèi)生部核醫(yī)學(xué)重點實驗室江蘇省分子核醫(yī)學(xué)重點實驗室;
【基金】：江蘇省社會發(fā)展基金項目(BE2009631)
【分類號】：R446.6

【參考文獻】

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本文編號：1756595