本文選題：鈣成像　切入點：傷害性感受器　出處：《神經(jīng)解剖學(xué)雜志》2017年03期

【摘要】：目的:建立在外周傷害性感受器特異性表達GCa MP6f蛋白的方法,并在疼痛刺激條件下,應(yīng)用鈣成像技術(shù)實時監(jiān)測小鼠傷害性感受神經(jīng)元的細胞內(nèi)鈣活動。方法:包裝并純化r AAV2/9-CAG-DIO-GCamp6f病毒,并通過立體定位注射該病毒于SNS-Cre小鼠L4/L5背根神經(jīng)節(jié)(dorsal root ganglion,DRG)內(nèi)。動物存活3~4周,然后制備L4/L5整節(jié)DRG標(biāo)本,檢測GCa MP6f蛋白表達情況,并觀察疼痛刺激條件下誘致的傷害性DRG神經(jīng)元的鈣反應(yīng)情況。結(jié)果:SNS-Cre小鼠L4/L5 DRG內(nèi)注射r AAV2/9-CAG-DIO-GCamp6f病毒后,熒光顯微鏡觀察顯示GCamp6f病毒特異性地表達在中、小型的DRG神經(jīng)元。給予DRG神經(jīng)元高鉀刺激(KCl 30 mmol/L)可以誘致神經(jīng)元胞內(nèi)的鈣離子水平顯著上升。進一步給予傷害性DRG神經(jīng)元特異性標(biāo)志物TRPV1受體的激動劑Capsaicin(1μmol/L),結(jié)果顯示其可以誘致GCamp6f蛋白標(biāo)記的DRG神經(jīng)元呈現(xiàn)顯著的鈣反應(yīng)。結(jié)論:本研究建立的SNS-Cre小鼠DRG在體注射r AAV2/9-CAG-DIO-GCamp6f病毒特異性標(biāo)記傷害性DRG神經(jīng)元的方法是成功的,該方法的成功建立對于活體特異性監(jiān)測傷害性DRG神經(jīng)元的功能活動提供了重要工具。
[Abstract]:AIM : To establish a method for the specific expression of GCa MP6f protein in peripheral injured DRG neurons , and to monitor the intracellular calcium activity of injured DRG neurons in mice .

【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部神經(jīng)生物學(xué)教研室暨腦科學(xué)協(xié)同創(chuàng)新中心;第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)員1旅;延安大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院暨多肽資源藥物研究中心;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31471059,31671088,31400949) 陜西省自然科學(xué)基金(2014JQ4127)
【分類號】：R402

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本文編號：1682444