本文關(guān)鍵詞：以臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞為載體的靶向基因治療系統(tǒng)聯(lián)合5-FU對(duì)裸鼠HepG2移植瘤的作用　出處：《山東醫(yī)藥》2017年26期 　論文類型：期刊論文

  更多相關(guān)文章： 臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 腺病毒 靶向基因治療系統(tǒng) -氟尿嘧啶 HepG移植瘤

【摘要】：目的構(gòu)建以人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(HUMSCs)為載體的靶向基因治療系統(tǒng),觀察該系統(tǒng)聯(lián)合低劑量5-FU對(duì)裸鼠HepG2移植瘤的治療作用。方法采用組織塊接種法從新鮮無菌新生兒臍帶中分離HUMSCs,利用PCR、重疊PCR、酶切、連接等分子生物學(xué)技術(shù)構(gòu)建慢病毒表達(dá)質(zhì)粒LentiR.E1A和腺病毒穿梭質(zhì)粒pAd-hTERTpIL24,并包裝慢病毒LentiR.E1A和腺病毒Ad-hTERTp-IL24。采用Transwell實(shí)驗(yàn)觀察慢病毒和腺病毒共感染對(duì)HUMSCs向HepG2細(xì)胞趨化的影響。采用皮下接種的方法建立HepG2移植瘤模型,將荷瘤小鼠分成5組各5只,分別給予尾靜脈注射PBS、HUMSCs、低劑量5-FU、慢病毒感染HUMSCs聯(lián)用低劑量5-FU、雙病毒共感染HUMSCs聯(lián)用低劑量5-FU的治療,比較各組的抑瘤效應(yīng)。利用BD Annexin-Ⅴ-PE凋亡試劑盒檢測(cè)腺病毒Ad-hTERTp-IL24與低劑量5-FU聯(lián)用誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果成功構(gòu)建了慢病毒表達(dá)載體p LentiR.E1A和腺病毒表達(dá)載體pAd-hTERTp-IL24,并成功包裝出了慢病毒LentiR.E1A和腺病毒Ad-hTERTp-IL24。Transwell實(shí)驗(yàn)顯示,慢病毒和腺病毒共感染HUMSCs向腫瘤細(xì)胞的遷移能力無明顯改變。聯(lián)合低劑量5-FU治療裸鼠肝移植瘤中治療組腫瘤體積較對(duì)照組減小(P0.01)。Ad-hTERTp-IL24與低劑量5-FU聯(lián)用誘導(dǎo)腫瘤微環(huán)境內(nèi)的腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡,其熒光強(qiáng)度明顯強(qiáng)于Ad-Track+5-Fu組和5-Fu組。結(jié)論成功構(gòu)建了以HUMSCs為載體的靶向基因治療系統(tǒng),由HUMSCS.LentiR.E1A運(yùn)載攜帶抑瘤基因的腺病毒Ad-hTERTp-IL24聯(lián)用低劑量5-FU對(duì)裸鼠HepG2移植瘤有明顯抑制作用。
[Abstract]:Objective to construct a human umbilical cord mesenchymal stem cells (HUMSCs) treatment system as the carrier of targeted gene, to observe the therapeutic effect of the 5-FU system combined with low dose of HepG2 xenografts in nude mice. Methods using tissue explant method HUMSCs isolated from fresh sterile umbilical cord by PCR and overlap PCR, enzyme digestion, connection etc. molecular biological techniques to construct lentiviral plasmid LentiR.E1A and Adenovirus Shuttle Plasmid pAd-hTERTpIL24 expression, and packaging of lentivirus LentiR.E1A and adenovirus Ad-hTERTp-IL24. Transwell to observe the lentivirus and adenovirus infection of HUMSCs to HepG2 cell chemotactic effect. Methods by subcutaneous inoculation to establish HepG2 transplanted tumor model, the mice were divided into 5 groups the 5 rats were given intravenous injection of PBS, HUMSCs, 5-FU combined with low dose, low dose 5-FU HUMSCs lentivirus infection, two virus co infection of HUMSCs combined with low dose 5-FU treatment Treatment effect of tumor were compared. Combined with the induction of apoptosis of hepatoma cells by adenovirus Ad-hTERTp-IL24 detection BD Annexin- V -PE apoptosis kit with low dose of 5-FU. The successful construction of Lentivirus Expression vector p LentiR.E1A and adenovirus expression vector pAd-hTERTp-IL24, and successfully packaged display LentiR.E1A lentivirus and adenovirus Ad-hTERTp-IL24.Transwell experiment lentivirus and adenovirus, CO infection of HUMSCs to the migration of tumor cells had no obvious change. Combined with low dose 5-FU in the treatment of liver tumor in nude mice in the treatment group than the control group reduced tumor volume (P0.01) and.Ad-hTERTp-IL24 combined with low dose of 5-FU within the tumor microenvironment induced apoptosis of tumor cells, the fluorescence intensity was stronger than Ad-Track+5-Fu group and 5-Fu group. Conclusion the successful construction of the carrier of targeted gene therapy system based on HUMSCs, by HUMSCS.LentiR.E1A carrying articles The adenovirus Ad-hTERTp-IL24 with a tumor suppressor gene combined with low dose 5-FU has a significant inhibitory effect on HepG2 xenografts in nude mice.

【作者單位】： 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院血液病醫(yī)院血液學(xué)研究所;西安交通大學(xué)第二附屬醫(yī)院;
【基金】：國(guó)家科技重大專項(xiàng)基金資助項(xiàng)目(2012ZX09102301-015)
【分類號(hào)】：R450;R735.7
【正文快照】： 肝癌由于其發(fā)病隱匿,患者被確診時(shí)往往已達(dá)晚期并伴隨肝功能不全,多數(shù)預(yù)后很差。目前,針對(duì)肝癌的傳統(tǒng)治療手段包括手術(shù)、化療和放療等,但療效均欠佳。隨著腫瘤分子生物學(xué)和現(xiàn)代細(xì)胞分子生物學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展,基因治療成為未來腫瘤治療的新希望。間充質(zhì)干細(xì)胞具有來源廣泛、擴(kuò)

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 本刊編輯部;;我國(guó)首家間充質(zhì)干細(xì)胞庫在天津落成[J];中國(guó)藥業(yè);2006年07期

2 張?chǎng)?趙桂秋;;間充質(zhì)干細(xì)胞在眼科領(lǐng)域的研究與應(yīng)用[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2009年06期

3 史春夢(mèng);;間充質(zhì)干細(xì)胞表述中需要注意的幾個(gè)問題[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2009年14期

4 瞿海龍;邊劍飛;張冰;王穎;周英蓮;;間充質(zhì)干細(xì)胞臨床應(yīng)用的前景與困惑[J];醫(yī)學(xué)研究與教育;2011年05期

5 郭子寬;;間充質(zhì)干細(xì)胞及其臨床應(yīng)用中的幾個(gè)問題[J];中國(guó)組織工程研究;2012年01期

6 李炳堯;武曉云;吳巖;;間充質(zhì)干細(xì)胞的分離與培養(yǎng):從實(shí)驗(yàn)室到臨床[J];中國(guó)組織工程研究;2013年14期

7 吳實(shí);鄧列華;;皮膚間充質(zhì)干細(xì)胞在促進(jìn)皮膚愈合中的作用[J];實(shí)用皮膚病學(xué)雜志;2013年03期

8 吳清法,王立生,吳祖澤;間充質(zhì)干細(xì)胞的來源及臨床應(yīng)用[J];軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊;2002年03期

9 黃定強(qiáng);間充質(zhì)干細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(耳鼻咽喉科學(xué)分冊(cè));2003年03期

10 付文玉,路艷蒙,喬?hào)|訪,樸英杰;運(yùn)用組織工程學(xué)原理構(gòu)建間充質(zhì)干細(xì)胞的三維培養(yǎng)體系[J];濰坊醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2003年03期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 陳可;王丁;韓之波;朱德林;韓忠朝;;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞體外發(fā)揮免疫活性的研究[A];第12屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

2 金明順;張毅;賈秀芬;周燕華;閆妍;劉慧雯;;小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)以及多潛能分化的研究[A];中國(guó)解剖學(xué)會(huì)第十一屆全國(guó)組織學(xué)與胚胎學(xué)青年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2009年

3 李爭(zhēng)艷;劉楊;翟麗麗;楊迷玲;王立峰;;間充質(zhì)干細(xì)胞在腫瘤發(fā)展過程中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2009年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

4 張彥;李尚珠;;間充質(zhì)干細(xì)胞在血管工程中的機(jī)制及應(yīng)用[A];2009全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合周圍血管疾病學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2009年

5 石玉;戴\戎;;周期性拉應(yīng)力對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞分化影響的研究[A];第九屆全國(guó)生物力學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

6 黎嬌;朱爭(zhēng)艷;杜智;駱瑩;王鵬;高英堂;;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分泌物對(duì)肝細(xì)胞增殖和凋亡的影響[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第30次學(xué)術(shù)年會(huì)暨生物醫(yī)學(xué)工程前沿科學(xué)研討會(huì)論文集[C];2010年

7 譚遠(yuǎn)超;Kevin;姜紅江;黃相杰;周紀(jì)平;;間充質(zhì)干細(xì)胞在骨傷疾病治療中的應(yīng)用[A];首屆全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合骨科微創(chuàng)學(xué)術(shù)交流會(huì)暨專業(yè)委員會(huì)成立大會(huì)論文匯編[C];2011年

8 唐佩弦;;間充質(zhì)干細(xì)胞及其臨床應(yīng)用前景[A];第三屆全國(guó)血液免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2003年

9 戴育成;;間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性和應(yīng)用[A];2005年華東六省一市血液病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨浙江省血液病學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2005年

10 胡琳莉;王昕榮;錢坤;李舟;楊薇;朱桂金;;小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞向子宮內(nèi)膜分化的實(shí)驗(yàn)研究[A];第一屆中華醫(yī)學(xué)會(huì)生殖醫(yī)學(xué)分會(huì)、中國(guó)動(dòng)物學(xué)會(huì)生殖生物學(xué)分會(huì)聯(lián)合年會(huì)論文匯編[C];2007年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 滿學(xué)杰;天津?yàn)I海新區(qū)建最大間充質(zhì)干細(xì)胞生產(chǎn)基地[N];新華每日電訊;2008年

2 滿學(xué)杰;津昂賽打造間充質(zhì)干細(xì)胞生產(chǎn)基地[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2008年

3 第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院輸血科 李忠俊 整理 吳劉佳;間充質(zhì)干細(xì)胞研究又見新方法[N];健康報(bào);2013年

4 上海生科院 上海交大醫(yī)學(xué)院健康科學(xué)研究所 曹楷;間充質(zhì)干細(xì)胞：干細(xì)胞中的孫悟空[N];上�？萍紙�(bào);2014年

5 記者　陳建強(qiáng);首家間充質(zhì)干細(xì)胞庫在津建成[N];光明日?qǐng)?bào);2006年

6 記者　馮國(guó)梧;細(xì)胞產(chǎn)品國(guó)家工程中心建設(shè)方案獲準(zhǔn)[N];科技日?qǐng)?bào);2007年

7 實(shí)習(xí)生 劉霞;間充質(zhì)干細(xì)胞有望用于面部整形[N];科技日?qǐng)?bào);2007年

8 本報(bào)記者 王新佳;我國(guó)“原始間充質(zhì)干細(xì)胞”注射液進(jìn)入臨床研究[N];中國(guó)高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2005年

9 馮國(guó)梧;全球首個(gè)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞庫規(guī)�；\(yùn)營(yíng)[N];科技日?qǐng)?bào);2008年

10 劉瑩清;全球首個(gè)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞庫泰達(dá)規(guī)模運(yùn)營(yíng)[N];北方經(jīng)濟(jì)時(shí)報(bào);2008年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 王皓;五指山小型豬OCT-4、SOX-2基因在骨髓間充質(zhì)與臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞中的過表達(dá)研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2013年

2 孔德曉;間充質(zhì)干細(xì)胞及胰島素分泌細(xì)胞治療糖尿病的臨床及應(yīng)用基礎(chǔ)研究[D];山東大學(xué);2015年

3 董苑;SDF-1復(fù)合PDPBB的構(gòu)建及對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞趨化影響的研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2015年

4 王磊;誘導(dǎo)胎盤來源間充質(zhì)干細(xì)胞向成牙骨質(zhì)細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2015年

5 房賀;連接黏附分子A在促進(jìn)MSC修復(fù)CC14肝損傷中的作用及其機(jī)制[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2015年

6 陳潔;間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體對(duì)急性肺損傷小鼠的影響及相關(guān)機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2015年

7 許婷;轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1在蟑螂過敏原誘導(dǎo)的哮喘中對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞募集遷移的影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

8 周雅麗;攜氧間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)胃癌化療效果的影響及其機(jī)制研究[D];蘭州大學(xué);2015年

9 沈舒寧;CKIP-1負(fù)調(diào)控間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

10 朱鎮(zhèn);外源性骨礦化蛋白1轉(zhuǎn)染人胎盤源間充質(zhì)干細(xì)胞及其蛋白質(zhì)組研究[D];吉林大學(xué);2016年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李超;小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中AC基因亞型的表達(dá)及AC3對(duì)其纖毛長(zhǎng)度的影響[D];河北大學(xué);2015年

2 林濤;殼聚糖水凝膠復(fù)合脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)兔關(guān)節(jié)軟骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究[D];川北醫(yī)學(xué)院;2015年

3 彭龍英;心肌營(yíng)養(yǎng)素1促進(jìn)人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞神經(jīng)分化存活及PI3K/Akt信號(hào)通路機(jī)制研究[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2015年

4 喬曉慧;酸性環(huán)境對(duì)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的影響[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2015年

5 張紅霞;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、鑒定及其對(duì)人肺癌細(xì)胞惡性表型的影響[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2015年

6 顧立超;BTK抑制劑對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞miR-21的調(diào)節(jié)作用[D];河北聯(lián)合大學(xué);2014年

7 王文杰;鴨胚間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性及其移植修復(fù)肝損傷研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

8 張猛;血管內(nèi)皮前體細(xì)胞對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞分化潛能的影響[D];石河子大學(xué);2015年

9 馬麗媛;利用MyoD基因誘導(dǎo)綿羊臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分化為成肌細(xì)胞的研究[D];東北林業(yè)大學(xué);2015年

10 宋維文;MicroRNA-133誘導(dǎo)綿羊間充質(zhì)干細(xì)胞分化為成肌細(xì)胞的研究[D];東北林業(yè)大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：1427110