本文關(guān)鍵詞：基于血—腦腫瘤屏障干預(yù)的膠質(zhì)瘤治療效果及相關(guān)機(jī)制研究　出處：《第三軍醫(yī)大學(xué)》2017年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 膠質(zhì)瘤 血-腦腫瘤屏障 診斷超聲 微泡 磁共振 貝伐單抗

【摘要】：研究背景:惡性膠質(zhì)瘤有較高的復(fù)發(fā)率和死亡率。盡管治療手段不斷增加,但多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)病人的平均生存時(shí)間仍舊只有12-14個(gè)月。GBM內(nèi)高表達(dá)多種促血管生成因子且有大量異常增生血管。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在GBM新生血管形成過程中起重要作用。VEGF能夠和血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的受體VEGFR-1和VEGFR-2結(jié)合,具有促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的分裂、生長(zhǎng)的作用。VEGF與血管內(nèi)皮細(xì)胞的受體結(jié)合,還能促進(jìn)多種溶解酶產(chǎn)生,促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)降解從而增大血管通透性�？鼓[瘤血管生成一直是膠質(zhì)瘤治療研究的重點(diǎn)。貝伐單抗是一種人源性的單克隆抗體,是目前最常用的抗血管生成靶向藥物。于2009年獲得FDA批準(zhǔn),是目前唯一批準(zhǔn)在臨床應(yīng)用的抗腫瘤血管藥物。主要用于治療復(fù)發(fā)性GBM。在有些地區(qū),貝伐單抗已被批準(zhǔn)作為GBM治療的一線藥物,用于單獨(dú)治療或者結(jié)合放療和替莫唑胺治療新診斷的GBM。但是,貝伐單抗能夠降低膠質(zhì)瘤血管的通透性,促進(jìn)“血管正�；�,而血管通透性的下降限制了后續(xù)貝伐單抗或其它藥物向腫瘤區(qū)域的滲透,從而影響了抗腫瘤藥物的治療效果。血-腦屏障的存在限制了藥物在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用。研究表明接近100%的大分子和98%的大分子藥物不能夠通過血-腦屏障。膠質(zhì)瘤血管具有很高的通透性,因而常伴隨著瘤周水腫和腫瘤內(nèi)部間質(zhì)壓力的增高,這些都限制了治療藥物向腫瘤內(nèi)部的滲透。另外,盡管腫瘤內(nèi)部血-腦屏障被破壞,血管通透性增加,但是腫瘤的某些滋養(yǎng)血管仍然保留有血-腦屏障的特征,從而形成了血-腦腫瘤屏障。該屏障和血-腦屏障類似,位于腫瘤細(xì)胞和由特異性內(nèi)皮細(xì)胞組成的腫瘤血管之間。盡管血-腦腫瘤屏障的通透性高于血-腦屏障,但是該屏障的存在仍然限制了藥物在腫瘤治療中的應(yīng)用。因此,尋找一種促進(jìn)藥物跨過血腦-腫瘤屏障的方法對(duì)膠質(zhì)瘤的治療至關(guān)重要�？栈�(yīng)是超聲波主要生物學(xué)效應(yīng)之一。超聲空化效應(yīng)可以用于毀損血管,溶解血栓,提高心肌的通透性以及藥物的釋放和基因的轉(zhuǎn)染等。微泡是一種有效的超聲空化核,能夠降低超聲空化的閾值。近年來有研究采用聚焦超聲聯(lián)合微泡造影劑開放了血-腦腫瘤屏障,促進(jìn)了藥物和基因向腫瘤的靶向傳送。但是,原發(fā)性的惡性膠質(zhì)瘤常向周圍腦組織侵潤(rùn)性生長(zhǎng),并在腫瘤遠(yuǎn)處形成多發(fā)的衛(wèi)星灶。聚焦超聲雖然能夠聚焦在瘤體發(fā)揮作用,但卻不能作用到瘤體周圍的衛(wèi)星灶。因此,在本研究中,我們嘗試采用低頻的診斷超聲聯(lián)合微泡造影劑開放血-腦腫瘤屏障,增強(qiáng)貝伐單抗向腦膠質(zhì)瘤的遞送效率,進(jìn)而增加藥物的治療效果。研究目的:1.探討微泡增強(qiáng)的診斷超聲增加膠質(zhì)瘤血-腦腫瘤屏障通透性的可行性、安全性及相關(guān)機(jī)制;2.探討微泡增強(qiáng)的診斷超聲增強(qiáng)貝伐單抗治療腦膠質(zhì)瘤效果的可行性;3.探討貝伐單抗治療后腦膠質(zhì)瘤MRI變化及相對(duì)應(yīng)的病理機(jī)制。材料和方法:1.微泡增強(qiáng)的診斷超聲增加大鼠血-腦腫瘤屏障通透性的可行性及相關(guān)機(jī)制研究荷瘤大鼠隨機(jī)分成三組:微泡增強(qiáng)的連續(xù)診斷超聲組(MECUS)、微泡增強(qiáng)的間歇診斷超聲組(MEIUS)和對(duì)照組。每組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在經(jīng)尾靜脈注入微泡的同時(shí),給予診斷超聲經(jīng)顱骨輻照。然后利用依文思藍(lán)(EB)的滲出量及動(dòng)態(tài)增強(qiáng)磁共振(DCE-MRI)評(píng)估血-腦腫瘤屏障通透性變化情況。利用定量PCR(q RT-PCR)、蛋白質(zhì)免疫印記(WB)及免疫組化檢測(cè)處理后緊密連接粘附分子-A(JAM-A)和鈣激活的鉀通道(KCa)的表達(dá)情況。利用光鏡HE和TUNEL法檢測(cè)處理后腫瘤周圍正常腦組織是否損傷。2.微泡增強(qiáng)的診斷超聲增強(qiáng)貝伐單抗治療膠質(zhì)瘤效果的實(shí)驗(yàn)研究荷瘤小鼠隨機(jī)分成四組:微泡增強(qiáng)的超聲空化聯(lián)合貝伐單抗組(MEUS+BEV)、貝伐單抗組(BEV)、微泡增強(qiáng)的超聲空化組(MEUS)和對(duì)照組。每組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物經(jīng)不同處理后利用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)檢測(cè)瘤體內(nèi)貝伐單抗的濃度,處理后3天利用CD34染色測(cè)量腫瘤區(qū)域微血管密度(MVD)的變化。貝伐單抗干預(yù)后,利用7.0T小動(dòng)物MRI檢測(cè)處理前后腫瘤體積、表面擴(kuò)散系數(shù)(ADC)、T1增強(qiáng)以及動(dòng)態(tài)增強(qiáng)磁共振(DCE-MRI)的變化情況。利用免疫組織化學(xué)染色觀察處理前后腫瘤內(nèi)Ki67陽性細(xì)胞數(shù)、緊密連接蛋白claudin-5和occludin以及血管生成模式(套疊)的變化。利用透射電鏡觀察處理前后腫瘤內(nèi)部緊密連接的變化。并對(duì)轉(zhuǎn)移常數(shù)Ktrans和血管套疊、T1增強(qiáng)和緊密連接蛋白以及ADC和Ki67陽性細(xì)胞進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果:1.微泡增強(qiáng)的診斷超聲增加大鼠膠質(zhì)瘤血-腦腫瘤屏障通透性的可行性及相關(guān)機(jī)制研究EB定量分析顯示在MEIUS組和MECUS組,EB的滲出量分別為17.9±2.3μg/g和11.0±2.2μg/g,明顯高于對(duì)照組的5.3±0.9μg/g。MEIUS組的EB滲出量明顯高于MECUS組。DCE-MRI結(jié)果顯示MEIUS組和MECUS組的Ktrans值明顯高于對(duì)照組,且腫瘤區(qū)域的EB滲出量和Ktrans值呈明顯的正相關(guān)。q RT-PCR、WB及免疫組化結(jié)果顯示MEUS能夠增加腫瘤區(qū)域KCa通道的表達(dá)并下調(diào)JAM-A的表達(dá),這種效應(yīng)MEIUS組比MECUS組更明顯。HE和TUNEL結(jié)果顯示處理后各組腫瘤周圍的正常腦組織未見明顯異常改變。2.微泡增強(qiáng)的診斷超聲增強(qiáng)貝伐單抗治療效果的實(shí)驗(yàn)研究ELISA結(jié)果顯示MEUS+BEV組瘤體內(nèi)貝伐單抗的濃度為88.8±18μg/g,明顯高于BEV組的42.2±15μg/g。而處理后3天MEUS+BEV組腫瘤區(qū)域的MVD為10.8±1.8,明顯低于BEV組的18.2±1.6。MRI結(jié)果顯示,貝伐單抗能夠降低U87膠質(zhì)瘤的生長(zhǎng)速率并抑制腫瘤細(xì)胞的增殖。腫瘤區(qū)域的ADC值和Ki67陽性細(xì)胞數(shù)呈明顯的負(fù)相關(guān)。貝伐單抗干預(yù)后,T1增強(qiáng)程度和Ktrans值明顯下降;透射電鏡和免疫組化結(jié)果均顯示腫瘤區(qū)域的緊密連接部分恢復(fù)。另外,貝伐單抗導(dǎo)致了腫瘤內(nèi)部血管套疊數(shù)量增加。而腫瘤區(qū)域Ktrans值和血管套疊數(shù)量呈明顯的負(fù)相關(guān)。T1增強(qiáng)值和緊密連接蛋白的表達(dá)呈明顯的負(fù)相關(guān)。結(jié)論:1.微泡增強(qiáng)的診斷超聲能夠安全、有效的增加大鼠血-腦腫瘤屏障的通透性。涉及到機(jī)制可能包括下調(diào)腫瘤區(qū)域JAM-A的表達(dá)進(jìn)而影響緊密連接的形成和上調(diào)KCa通道的表達(dá)進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞的胞吞作用。另外,Ktrans可以做為預(yù)測(cè)膠質(zhì)瘤血-腦腫瘤屏障通透性的磁共振標(biāo)記。2.微泡增強(qiáng)的診斷超聲能夠有效地增加U87原位膠質(zhì)瘤模型局部貝伐單抗的濃度,并且能夠增強(qiáng)貝伐單抗抑制腫瘤區(qū)域血管生成的治療效果。貝伐單抗有效降低了U87膠質(zhì)瘤的生長(zhǎng)速率并抑制腫瘤細(xì)胞的增殖。貝伐單抗能使腫瘤區(qū)域血-腦腫瘤屏障通透性下降,涉及到的機(jī)制可能包括血-腦屏障緊密連接的部分恢復(fù)和腫瘤內(nèi)部血管生成模式的改變。另外,ADC、Ktrans值和T1增強(qiáng)可以做為預(yù)測(cè)U87膠質(zhì)瘤內(nèi)細(xì)胞增殖、血管生成模式變化和緊密連接變化的磁共振標(biāo)記。
[Abstract]:Vascular endothelial growth factor ( VEGF ) is one of the most commonly used anti - angiogenic drugs . Objective : To study the feasibility , safety and relative mechanism of ultrasound in the treatment of glioma . Conclusion : 1 . The results showed that : 1 . The results showed that : 1 . The results showed that : 1 . The results showed that there was a significant negative correlation between the expression of KCa channel in the tumor region and the expression of JAM - A .

【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R739.41;R445.1

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 印弘,王小仲;氫質(zhì)子磁共振波譜在腦腫瘤研究中現(xiàn)狀[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2000年10期

2 莊惠山,陸曦;12例腦腫瘤誤診分析[J];福建醫(yī)藥雜志;2000年02期

3 高尚社,谷彩萍,楊建宇;腦腫瘤21例誤診分析[J];河南實(shí)用神經(jīng)疾病雜志;2000年06期

4 張淑倩 ,N銉bauer-Huhmann I M ,Ba-Ssalamah A ,Mlynarik V;3T和1.5T磁場(chǎng)下腦腫瘤的磁共振對(duì)比增強(qiáng)[J];放射學(xué)實(shí)踐;2002年06期

5 張紅軍;長(zhǎng)期使用手機(jī)不會(huì)發(fā)生腦腫瘤[J];日本醫(yī)學(xué)介紹;2004年01期

6 李景昀,羅文,何凱宣;用亞}0胞成分再產(chǎn)生腦腫瘤的研究(摘要)[J];廣東解剖通報(bào);1980年02期

7 翟允昌,孫守成,王世賓;額葉腦腫瘤引起奔跑癲癇一例[J];中華神經(jīng)外科雜志;1986年04期

8 袁先厚;鄒昌文;郭國(guó)炳;孫盛容;李健;;小兒腦腫瘤45例分析[J];實(shí)用腫瘤學(xué)雜志;1987年02期

9 袁先厚;鄒昌文;郭國(guó)炳;孫盛容;李健;;小兒腦腫瘤45例分析[J];實(shí)用腫瘤雜志;1987年02期

10 楊善存,陳錦培;小兒腦腫瘤的治療[J];實(shí)用兒科雜志;1991年06期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 鄭曄;金國(guó)宏;;綜述腦腫瘤~1H-MRS的研究進(jìn)展[A];第六屆西部介入放射學(xué)術(shù)會(huì)議寧夏醫(yī)學(xué)會(huì)放射學(xué)分會(huì)第四屆年會(huì)介入放射學(xué)新技術(shù)繼續(xù)教育學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2009年

2 馬杰;;兒童腦腫瘤的外科治療[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)外科學(xué)分會(huì)第九次學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

3 張玉琪;薛超強(qiáng);;兒童腦腫瘤的治療進(jìn)展[A];中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)神經(jīng)外科醫(yī)師分會(huì)第六屆全國(guó)代表大會(huì)論文匯編[C];2011年

4 陳忠平;牟永告;潘力雄;張湘衡;;顯微神經(jīng)外科技術(shù)在腦腫瘤治療中的應(yīng)用(腫瘤外科手術(shù)錄象交流)[A];2001'全國(guó)腫瘤外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

5 林章雅;康德智;余良宏;林元相;陳佳;曾明珠;;腦腫瘤立體定向活檢手術(shù)的臨床應(yīng)用[A];第一屆中國(guó)腫瘤靶向治療技術(shù)大會(huì)論文集[C];2003年

6 曹巧云;;小兒腦腫瘤3例報(bào)告[A];2006（第三屆）江浙滬兒科學(xué)術(shù)會(huì)議暨浙江省兒科學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

7 葉勁;梁有明;鐘書;龐剛;唐秀文;藍(lán)勝勇;肖泉;劉若平;徐柯貝;;小兒惡性腦腫瘤的診斷與治療特點(diǎn)研究[A];中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)神經(jīng)外科醫(yī)師分會(huì)第四屆全國(guó)代表大會(huì)論文匯編[C];2009年

8 馬杰;;兒童腦腫瘤的外科治療[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)小兒外科學(xué)術(shù)會(huì)論文集[C];2010年

9 姚振威;蔣勝洪;童彤;王非;楊艷梅;孫華平;劉含秋;何慧瑾;馮曉源;;磁敏感增強(qiáng)動(dòng)態(tài)磁共振掃描用于部分腦腫瘤的診斷[A];2006年華東六省一市暨浙江省放射學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

10 陳素錦;陳一霞;王占祥;譚國(guó)偉;郭劍峰;方耀春;劉希堯;;腦腫瘤住院患者心理狀況及影響因素[A];2011中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)外科學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 天津市腫瘤醫(yī)院教授 李文良邋李運(yùn)紅 趙迎 整理;頭痛小心腦腫瘤[N];健康報(bào);2007年

2 朱麗麗;捕捉腦腫瘤早期信號(hào)[N];健康報(bào);2008年

3 李圣融;腦腫瘤忌含銅食物[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2000年

4 木易;怎樣早期發(fā)現(xiàn)腦腫瘤[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2007年

5 趙華;老人顱內(nèi)有腫瘤 早期癥狀會(huì)露頭[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2007年

6 西安第四軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院西京醫(yī)院 賀曉生;腦腫瘤的十大異狀[N];保健時(shí)報(bào);2010年

7 李學(xué)華;豹蛙卵細(xì)胞分子能識(shí)別和殺死腦腫瘤[N];科技日?qǐng)?bào);2007年

8 主任醫(yī)師 趙成會(huì);怎樣早期發(fā)現(xiàn)腦腫瘤[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2006年

9 空軍總醫(yī)院 張峰;腦腫瘤如何選擇檢查[N];健康報(bào);2001年

10 李文良;老年人患腦腫瘤有信號(hào)[N];健康報(bào);2006年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 張金龍;基于血—腦腫瘤屏障干預(yù)的膠質(zhì)瘤治療效果及相關(guān)機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2017年

2 章殷希;癲癇相關(guān)腦腫瘤的臨床、影像與病理學(xué)研究[D];浙江大學(xué);2017年

3 劉貫中;磁共振彌散成像分?jǐn)?shù)微積分模型在兒童腦腫瘤中的臨床應(yīng)用[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2012年

4 公方和;腦腫瘤及腦AVM相關(guān)性癲癇的發(fā)生因素分析及臨床防控[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2006年

5 梁君;鈣激活性鉀通道在緩激肽選擇性開放血腦腫瘤屏障機(jī)制中的大鼠在體研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2006年

6 鄧萬凱;MRI圖像的腦腫瘤分割方法研究[D];華中科技大學(xué);2011年

7 洪汛寧;磁共振彌散成像技術(shù)在腦腫瘤中的應(yīng)用研究[D];復(fù)旦大學(xué);2003年

8 宋吉清;開放式MR導(dǎo)引腦腫瘤冷凍治療的初步探討[D];山東大學(xué);2009年

9 趙銘;～（99m）Tc-HL91乏氧顯像評(píng)價(jià)惡性腦腫瘤放療療效的實(shí)驗(yàn)和臨床研究[D];華中科技大學(xué);2006年

10 方虹;人腦及腦腫瘤～1H磁共振波譜研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);1995年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 羅蔓;結(jié)合MRI多模態(tài)信息與3D-CNNS特征提取的腦腫瘤分割研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

2 侯學(xué)文;3D-ASL磁共振灌注技術(shù)在腦腫瘤的應(yīng)用研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2016年

3 黃唯;腦腫瘤MRI圖像分類與肝病理圖像分級(jí)方法研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2016年

4 黃若菡;腦腫瘤的計(jì)算機(jī)輔助檢測(cè)[D];電子科技大學(xué);2016年

5 王亞菲;基于多體素磁共振波譜的腦腫瘤自動(dòng)分類輔助診斷技術(shù)[D];東南大學(xué);2016年

6 任立超;MR圖像的腦腫瘤分割與分類方法研究[D];東北大學(xué);2013年

7 楊瑞雪;一種改進(jìn)的基于標(biāo)記的分水嶺方法在腦腫瘤MRI圖像分割上的應(yīng)用[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2016年

8 張?chǎng)?腦腫瘤圖像分割及三維重建方法研究[D];蘭州交通大學(xué);2016年

9 張朋;基于MRI的腦腫瘤圖像分割研究[D];浙江理工大學(xué);2017年

10 常勇;腦腫瘤與使用手機(jī)的系統(tǒng)評(píng)價(jià)[D];武漢科技大學(xué);2012年

，

本文編號(hào)：1420403