本文關(guān)鍵詞：炭疽與蠟樣芽胞桿菌rpoB基因交叉反應(yīng)的分子分析　出處：《現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)》2017年12期 　論文類型：期刊論文

  更多相關(guān)文章： 炭疽芽胞桿菌 蠟樣芽胞桿菌 PCR交叉反應(yīng) 多位點序列分子分型(MLST)

【摘要】：目的發(fā)現(xiàn)炭疽芽胞桿菌與蠟樣芽胞桿菌rpo B基因PCR交叉反應(yīng),對產(chǎn)生交叉反應(yīng)的原因進行研究。方法對分離自食品及土壤的芽胞桿菌進行形態(tài)染色、生化反應(yīng)、飛行時間質(zhì)譜、蛋白毒素結(jié)晶試驗、根狀生長試驗、炭疽噬菌體裂解試驗、炭疽桿菌及蠟樣桿菌熒光定量PCR等鑒定,并對rpo B基因?qū)崟r熒光定量PCR擴增產(chǎn)物進行克隆測序,比對基因序列。對部分菌株進行MLST分型,探討交叉反應(yīng)的遺傳關(guān)系。結(jié)果部分芽胞桿菌炭疽實時熒光定量PCR試驗出現(xiàn)rpo B擴增陽性,經(jīng)鑒定為蠟樣芽胞桿菌。rpo B擴增產(chǎn)物測序顯示,與炭疽桿菌高度相似。MLST分型顯示分布在不同的群,發(fā)現(xiàn)4種新的ST型。結(jié)論蠟樣芽胞桿菌與炭疽芽胞桿菌的rpo B基因存在PCR交叉反應(yīng),其分子生物學(xué)基礎(chǔ)是基因組序列的高度相似性,與菌株遺傳變異關(guān)系不大,對炭疽桿菌及蠟樣桿菌的基因診斷應(yīng)該參考毒素質(zhì)粒及染色體基因的聯(lián)合鑒定。
[Abstract]:Objective to find the PCR cross reaction between Bacillus anthracis and Bacillus cereus rpo B gene and study the cause of cross reaction. Methods Bacillus spp. Isolated from food and soil were stained with morphology. Biochemical reaction, time-of-flight mass spectrometry, protein toxin crystallization test, root growth test, anthrax phage lysis test, anthracis and Bacillus cereus fluorescence quantitative PCR identification. The rpo B gene real-time fluorescence quantitative PCR amplification products were cloned and sequenced, compared with the gene sequence. Some strains were typed by MLST. Results some Bacillus anthrax real-time fluorescence quantitative PCR test showed that rpo B amplification was positive, and it was identified as Bacillus cereus. RPO B amplification product was sequenced. Four new St types were found in different groups, which were similar to those of Bacillus anthracis. Conclusion there is PCR cross reaction between Bacillus cereus and rpo B gene of Bacillus anthracis. The molecular biological basis is the high similarity of the genomic sequence, which has little relationship with the genetic variation of the strain. The genetic diagnosis of Bacillus anthracis and Bacillus cereus should refer to the joint identification of toxin plasmid and chromosome gene.
【作者單位】： 陜西省疾病預(yù)防控制中心;浙江中醫(yī)藥大學(xué);
【基金】：陜西省科技資源開放共享平臺項目(2016FWPT-12) 陜西省衛(wèi)生計生科研基金(2016D094)
【分類號】：R440
【正文快照】： 蠟樣芽胞菌群是指一群在基因組水平上具有高度相似性的細菌,包括蠟樣芽胞桿菌、炭疽芽胞桿菌、蘇云金桿菌等6種芽胞桿菌[1]。其中炭疽芽胞桿菌會產(chǎn)生致死毒素和水腫毒素,引起人和動物的烈性傳染病炭疽。蠟樣芽胞桿菌在自然界分布廣泛,為一種條件致病菌,產(chǎn)生腸毒素,引起食物中

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10 朱玲,劉曉霞,蘇東輝,楊波,付翠梅;蠟樣芽胞桿菌微菌落計數(shù)公式的建立及其應(yīng)用[J];數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志;1997年02期

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本文編號：1414428