本文關(guān)鍵詞：shRNA下調(diào)MMP-9對MCAO大鼠腦保護作用的DTI研究　出處：《鄭州大學》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

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【摘要】：背景和目的缺血性腦損傷已經(jīng)成為人類腦血管疾病的最常見類型之一,并且腦梗死后的一些常見并發(fā)癥嚴重損害著人類的健康。其中,腦水腫做為腦梗死后的重要并發(fā)癥之一,對腦梗死的發(fā)生發(fā)展起著很重要的作用。然而,基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)則與腦水腫、血腦屏障通透性緊密相關(guān)。本研究預通過對大鼠大腦中動脈栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型腦缺血區(qū)組織的DTI成像評價,從而來探討腦梗死后水腫區(qū)的面積及FA值與MMP-9基因表達的相關(guān)性,并進一步探討慢病毒介導的sh RNA下調(diào)MMP-9基因的表達,減輕急性腦梗死后腦水腫的面積,從而保護大鼠的神經(jīng)功能,以及改善其影像學表現(xiàn)。材料與方法1、將體重為260g至300g的32只健康雄性SD大鼠,隨機分為以下四組(每組8只):A組(假手術(shù)組):用鑷子分離頸外動脈分支,并把該分支結(jié)扎,暴露頸內(nèi)頸外動脈分叉,在分叉處視野下前進0.5 cm后固定線拴,并未真正插入大鼠頸內(nèi)動脈顱內(nèi)段;B組(MCAO組):單籠飼養(yǎng)MCAO模型成功后的大鼠;C組(生理鹽水組):制作MCAO模型兩周前,向大鼠右側(cè)腦室注射生理鹽水5μl;D組(慢病毒干預組):制作MCAO兩周前,向大鼠右側(cè)腦室注射慢病毒介導的sh RNA 5μl。在造模成功后4h、8h、12h、18h、24h時間點,本研究的各組大鼠均進行了神經(jīng)功能評分(m NSS)和磁共振掃描,采用的是美國GE Discovery MR 750 3.0T超導高場磁共振掃描機進行批量掃描,使用上海晨光公司生產(chǎn)的大鼠專用線圈,用棉塞固定大鼠頭部使其呈仰臥位,保持頭先進,掃描中心定位在大鼠視交叉,常規(guī)掃描軸位T1WI、T2WI、T2WI FLAIR、DWI、DTI等序列。計算病灶側(cè)的ADC值和FA值。2、另取32只實驗動物(每組8只),在對應于MRI檢查時間點取大鼠缺血側(cè)腦組織,Western blot測定缺血側(cè)腦組織MMP-9蛋白表達;3、另外再取32只實驗動物(每組8只),在對應于MRI檢查時間點取缺血側(cè)腦組織,行石蠟切片,進行免疫組化染色,觀測MMP-9蛋白的表達;4、通過SPSS 17.0軟件對本實驗中的所有數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學處理,采用sx±記錄計數(shù)資料。檢驗方法為t檢驗,重復測量方差分析,Pearson相關(guān)分析,檢驗水準為α=0.05,P0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。結(jié)果1、在缺血后4h、8h、12h、18h、24h時,慢病毒干預組的m NSS評分較MCAO模型組降低,差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05)2、在缺血后4h、8h、12h、18h、24h時,慢病毒干預組缺血區(qū)的ADC值、FA值較MCAO模型組升高,且差異有統(tǒng)計學意義。兩組間的ADC值、FA值在4h、8h、12h、18h、24h時間點差異均具有統(tǒng)計學意義(p0.05)3、局灶性腦缺血后MMP-9蛋白表達逐漸增多;慢病毒干預組相應時間點的MMP-9蛋白的表達較MCAO模型組有所降低,且在相應的每個時間點差異均具有統(tǒng)計學意義(p0.05)4、各手術(shù)組大鼠的m NSS神經(jīng)功能評分與缺血性腦梗死核心區(qū)的FA值、MMP-9蛋白表達存在負相關(guān)。結(jié)論1、腦梗死區(qū)腦組織MMP-9表達上調(diào)參與大鼠腦梗死周圍水腫的形成以及神經(jīng)功能損傷的發(fā)生。2、慢病毒介導的sh RNA通過抑制MMP-9基因的表達,減輕血管源性水腫,發(fā)揮腦梗死后的保護作用。3、磁共振DTI可以動態(tài)監(jiān)測缺血性腦梗死大鼠缺血區(qū)的改變及其注射病毒進行基因抑制后變化。
[Abstract]:Background and objective: ischemic brain damage has become one of the most common human cerebrovascular disease types, and some of the common complications after cerebral infarction and serious damage to human health. Among them, as one of the major complications of cerebral edema after cerebral infarction, cerebral infarction occurrence and development plays a very important role. However, matrix metalloproteinase -9 (MMP-9) and brain edema, blood brain barrier permeability is closely related to this study. Based on the pretreatment of rats with middle cerebral artery occlusion (middle cerebral artery occlusion, MCAO) DTI imaging model of cerebral ischemia tissue evaluation, so as to explore the correlation between FA area and the area of edema and MMP-9 gene expression values after cerebral infarction. The expression of SH RNA and to further explore the lentivirus mediated downregulation of the MMP-9 gene, relieve acute brain edema after cerebral infarction area, so as to protect the nerve function of rats, and improve the imaging 琛ㄧ幇.鏉愭枡涓庢柟娉，

本文編號：1403553