發(fā)布時(shí)間：2017-12-15 15:34

  本文關(guān)鍵詞：CYP2C19基因多態(tài)性檢測(cè)方法的建立及臨床應(yīng)用

  更多相關(guān)文章： CYP2C19 基因多態(tài)性 檢測(cè)方法 主要不良心血管事件 急性冠脈綜合征

【摘要】：[目的]建立CYP2C19基因多態(tài)性檢測(cè)方法,并評(píng)價(jià)其是否能用于臨床檢測(cè)。[方法]參考美國臨床生化科學(xué)院(NACB)相關(guān)要求,對(duì)所建立的檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)限、重復(fù)性、準(zhǔn)確度、分析特異性等參數(shù)的驗(yàn)證,準(zhǔn)確性使用Kappa檢驗(yàn)評(píng)估,重復(fù)性使用符合率,測(cè)序質(zhì)量的驗(yàn)證基于整體測(cè)序圖譜的熒光信號(hào)值、性噪比、測(cè)序峰圖、QV值等參數(shù)。用所建立的檢測(cè)方法檢測(cè)昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院心內(nèi)科120例PCI術(shù)后CAD患者的CYP2C19基因型,根據(jù)基因型分布,將患者分為正常代謝組(EM)、中等代謝組(IM)和低代謝組(PM)。收集及樣本對(duì)應(yīng)的臨床資料,分析三組患者之間基本臨床資料是否存在差異。以主要不良心血管事件(MACE)作為主要終點(diǎn)事件、急性冠脈綜合正(ACS)為次要終點(diǎn)事件進(jìn)行為期1年的隨訪,分析CYP2C19多態(tài)性與CAD患者PCI術(shù)后1年發(fā)生ACS和MACE的相關(guān)性。[結(jié)果]1.Ct≤32時(shí),PCR擴(kuò)增曲線正常,測(cè)序RFU均在200以上,背景峰不超過靶峰信號(hào)值的5%,重復(fù)測(cè)序20次Ct=-32的DNA樣本,結(jié)果全部檢出；我科實(shí)驗(yàn)室得到的測(cè)序結(jié)果與第三方實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)結(jié)果100%一致,Kappa=1.0;測(cè)序分析批內(nèi)和批間重復(fù)性結(jié)果符合率均為100%,提取溶血、脂血及白細(xì)胞含量異常全血樣本的DNAOD260/OD280在1.8-2.0之間,濃度和質(zhì)量均滿足PCR和測(cè)序。2.120例患者的CYP2C19基因多態(tài)性結(jié)果為：*2位點(diǎn)基因型GG、GA、AA分別有57例、52例和11例；*3位點(diǎn)基因型GG、GA、AA分別有113例、4例和3例。3.3組不同代謝表型患者的性別、年齡、既往史、吸煙及藥物服用情況不具明顯差異。PCI術(shù)后一年隨訪期間,1例(0.8%)死亡,6例(5%)非致死性心肌梗死,4例(3.3%)支架血栓事件,26例(21.7%)變異型心絞痛。不同代謝表型組ACS與MACE的發(fā)生率具有明顯差異(P0.05)。4.非條件Logisti回歸分析顯示：同時(shí)患有糖尿病的PCI術(shù)后CAD患者1年隨訪期間MACE的發(fā)生率較未患糖尿病的患者高(OR=0.163,95%CI 0.035-0.766, P=0.022);吸煙患者1年隨訪期間ACS的發(fā)病率較非吸煙患者低(OR=5.273,95%CI 1.339-20.758; P=0.017);IM和PM組的患者隨訪期間MACE (OR=5.119,95%CI 1.276-20.541, P=0.021)和ACS (OR=4.779,95%CI 1.918-11.912; P=0.001)的發(fā)病率均較EM組的患者高。[結(jié)論]基于熒光PCR-毛細(xì)管電泳測(cè)序技術(shù)的CYP2C19基因多態(tài)性檢測(cè)法可檢測(cè)CYP2C19*2(G681A)和*3(G636A)功能多態(tài)性位點(diǎn),可滿足臨床檢測(cè)。
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R541.4;R446.1

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