本文關(guān)鍵詞：高效液相色譜法測定A549細胞中的膽固醇水平研究

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【摘要】：目的建立檢測A549細胞內(nèi)膽固醇水平的高效液相色譜(HPLC)方法,為以胞內(nèi)膽固醇相對水平變化作為指標鑒定組織細胞泡沫化程度及特定組織細胞泡沫化對組織損傷提供技術(shù)支持。方法用氫氧化鉀乙醇溶液和三氯乙酸分別除去細胞裂解液中的三酰甘油和蛋白,用正己烷-異丙醇的混合溶劑提取細胞內(nèi)的膽固醇。膽固醇水平采用HPLC法測定,色譜柱為ZORBAX SB-C18(4.6mm×150.0mm,5μm),流動相為乙腈-異丙醇(67∶33,V/V),流速為1mL/min,檢測波長為206nm。結(jié)果細胞內(nèi)膽固醇在5~100ng/μL內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.999 9);相對標準偏差(RSD)均低于3.0%,平均加樣回收率為94.89%,RSD為2.86%(n=6)。結(jié)論 HPLC法簡便、準確、重復(fù)性好,可用于泡沫細胞程度鑒定,為探討脂質(zhì)代謝異常與器官損傷及進一步研究膽固醇代謝紊亂與肺損傷奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學脂糖代謝性疾病重慶市重點實驗室/感染性疾病分子生物學教育部重點實驗室;重慶醫(yī)科大學公共衛(wèi)生與管理學院/醫(yī)學與社會發(fā)展研究中心/健康領(lǐng)域社會風險預(yù)測治理協(xié)同創(chuàng)新中心;重慶醫(yī)科大學檢驗醫(yī)學院/臨床檢驗診斷學教育部重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 高效液相色譜 A細胞 膽固醇
【基金】：國家自然科學基金資助項目(81071907) 教育部春暉計劃合作科研啟動項目(Z2012118)
【分類號】：R446.1
【正文快照】： 2.重慶醫(yī)科大學公共衛(wèi)生與管理學院/醫(yī)學與社會發(fā)展研究中心/健康領(lǐng)域社會風險預(yù)測治理協(xié)同創(chuàng)新中心,重慶400016;3.重慶醫(yī)科大學檢驗醫(yī)學院/臨床檢驗診斷學教育部重點實驗室,重慶400016)膽固醇是細胞、動物組織重要的組成物質(zhì),不僅是細胞膜形成的重要原料,而且還參與合成體內(nèi)

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本文編號：1051540