本文關(guān)鍵詞：高效液相色譜法測(cè)定A549細(xì)胞中的膽固醇水平研究

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【摘要】：目的建立檢測(cè)A549細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平的高效液相色譜(HPLC)方法,為以胞內(nèi)膽固醇相對(duì)水平變化作為指標(biāo)鑒定組織細(xì)胞泡沫化程度及特定組織細(xì)胞泡沫化對(duì)組織損傷提供技術(shù)支持。方法用氫氧化鉀乙醇溶液和三氯乙酸分別除去細(xì)胞裂解液中的三酰甘油和蛋白,用正己烷-異丙醇的混合溶劑提取細(xì)胞內(nèi)的膽固醇。膽固醇水平采用HPLC法測(cè)定,色譜柱為ZORBAX SB-C18(4.6mm×150.0mm,5μm),流動(dòng)相為乙腈-異丙醇(67∶33,V/V),流速為1mL/min,檢測(cè)波長(zhǎng)為206nm。結(jié)果細(xì)胞內(nèi)膽固醇在5~100ng/μL內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.999 9);相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)均低于3.0%,平均加樣回收率為94.89%,RSD為2.86%(n=6)。結(jié)論 HPLC法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好,可用于泡沫細(xì)胞程度鑒定,為探討脂質(zhì)代謝異常與器官損傷及進(jìn)一步研究膽固醇代謝紊亂與肺損傷奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)脂糖代謝性疾病重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/感染性疾病分子生物學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;重慶醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生與管理學(xué)院/醫(yī)學(xué)與社會(huì)發(fā)展研究中心/健康領(lǐng)域社會(huì)風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)治理協(xié)同創(chuàng)新中心;重慶醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院/臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 高效液相色譜 A細(xì)胞 膽固醇
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81071907) 教育部春暉計(jì)劃合作科研啟動(dòng)項(xiàng)目(Z2012118)
【分類(lèi)號(hào)】：R446.1
【正文快照】： 2.重慶醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生與管理學(xué)院/醫(yī)學(xué)與社會(huì)發(fā)展研究中心/健康領(lǐng)域社會(huì)風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)治理協(xié)同創(chuàng)新中心,重慶400016;3.重慶醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院/臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,重慶400016)膽固醇是細(xì)胞、動(dòng)物組織重要的組成物質(zhì),不僅是細(xì)胞膜形成的重要原料,而且還參與合成體內(nèi)

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本文編號(hào)：1051540