本文關(guān)鍵詞：基于PtTFPP磷光氧氣納米傳感器對(duì)PDT誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞損傷的研究

  更多相關(guān)文章： 光動(dòng)力治療 氧氣傳感器 線粒體 MTT檢測(cè)法 細(xì)胞活性

【摘要】：光動(dòng)力治療作為一種新興的治療腫瘤的方法,因其特異性好、毒副作用小和操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)受到越來(lái)越多的關(guān)注。就體外光動(dòng)力實(shí)驗(yàn)而言,通常是利用MTT檢測(cè)法對(duì)其毒性進(jìn)行評(píng)估。本文利用一種可以檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)氧含量變化的磷光氧氣納米傳感器對(duì)光動(dòng)力誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷進(jìn)行評(píng)估�；谶@種方法,獲得與MTT檢測(cè)法相一致的測(cè)試結(jié)果,并且成功檢測(cè)到光動(dòng)力治療對(duì)細(xì)胞線粒體的直接損傷,這是MTT法所不具備的。本論文的主要研究?jī)?nèi)容和具體工作如下：1.首先利用MTT檢測(cè)手段,從原卟啉鈉濃度和光照劑量?jī)蓚�(gè)方面對(duì)體外光動(dòng)力實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行探索,初步掌握了不同光動(dòng)力條件下HepG2細(xì)胞的死傷程度,并為后續(xù)研究提供了合適的實(shí)驗(yàn)條件。2.利用再沉淀-包覆法,分別制備了靶向細(xì)胞外和細(xì)胞內(nèi)的兩種氧氣傳感器。這兩種氧氣傳感器都是以聚苯乙烯-有機(jī)硅氧烷為基質(zhì),將疏水性的氧氣分子探針PtTFPP和熒光參比分子C6隨機(jī)封裝到納米顆粒內(nèi),不同的是,用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)氧含量變化的納米顆粒表層用帶正電的PLL殼層包覆,基于MTT法毒性檢測(cè)和共聚焦成像驗(yàn)證了這種具有核殼結(jié)構(gòu)的氧氣納米傳感器具有較低的毒性和較好的細(xì)胞攝取率。利用時(shí)間分辨熒光法檢測(cè)PDT作用后HepG2細(xì)胞的呼吸速率,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)氧氣濃度變化要快于細(xì)胞外氧氣濃度變化,其測(cè)試結(jié)果值更為精確,因此在后續(xù)研究中,利用細(xì)胞內(nèi)氧氣濃度變化來(lái)對(duì)光敏劑藥效進(jìn)行評(píng)估。接著,一系列的基于細(xì)胞呼吸檢測(cè)PDT療效的實(shí)驗(yàn)證明這種測(cè)試手段與MTT法得到的結(jié)果相似,其結(jié)果的可靠性得到證實(shí)。此外,基于這種測(cè)試方法也成功檢測(cè)到了PDT對(duì)細(xì)胞線粒體的直接損傷,這是MTT法所不具備的。
【關(guān)鍵詞】：光動(dòng)力治療 氧氣傳感器 線粒體 MTT檢測(cè)法 細(xì)胞活性
【學(xué)位授予單位】：北京交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R730.5;TP212
【目錄】：

• 致謝5-6
• 摘要6-7
• ABSTRACT7-11
• 1 引言11-23
• 1.1 光動(dòng)力治療的研究概況11-17
• 1.1.1 光動(dòng)力治療的研究背景11
• 1.1.2 光動(dòng)力治療的作用機(jī)理11-13
• 1.1.3 光敏劑的發(fā)展13-15
• 1.1.4 光動(dòng)力治療對(duì)腫瘤細(xì)胞線粒體的損傷15-16
• 1.1.5 光動(dòng)力治療效果的評(píng)估手段及其存在的問(wèn)題16-17
• 1.2 氧氣傳感器在生物領(lǐng)域的應(yīng)用17-21
• 1.2.1 氧含量檢測(cè)在生物領(lǐng)域中的意義17-18
• 1.2.2 細(xì)胞氧含量檢測(cè)的技術(shù)與方法18-20
• 1.2.3 熒光氧氣納米傳感器的生物應(yīng)用20-21
• 1.3 論文選題及主要研究?jī)?nèi)容21-23
• 2 基于MTT法對(duì)肝癌細(xì)胞光動(dòng)力參數(shù)的篩選23-32
• 2.1 細(xì)胞培養(yǎng)23-26
• 2.1.1 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)試劑與儀器23-24
• 2.1.2 細(xì)胞培養(yǎng)24-25
• 2.1.3 MTT細(xì)胞毒性檢測(cè)法25-26
• 2.2 基于MTT法對(duì)肝癌細(xì)胞光動(dòng)力參數(shù)的篩選26-31
• 2.2.1 光源的選擇26-27
• 2.2.2 光敏劑劑量的選擇27-28
• 2.2.3 光照劑量的選擇28-31
• 2.3 小結(jié)31-32
• 3 基于細(xì)胞呼吸速率對(duì)肝癌細(xì)胞光動(dòng)力損傷的評(píng)估32-48
• 3.1 引言32-35
• 3.2 PtTFPP摻雜PS-DTS基質(zhì)的氧氣傳感器的制備與表征35-41
• 3.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑與設(shè)備35
• 3.2.2 樣品制備方法與步驟35-37
• 3.2.3 氧氣納米傳感器的表征37-39
• 3.2.4 氧氣納米傳感器的生物兼容性39-41
• 3.3 細(xì)胞內(nèi)納米顆粒溶氧量標(biāo)定曲線的繪制41-43
• 3.4 基于磷光氧氣納米傳感器對(duì)細(xì)胞內(nèi)外溶氧梯度的檢測(cè)43-44
• 3.5 基于呼吸速率對(duì)PDT后腫瘤細(xì)胞損傷的評(píng)估44-46
• 3.5.1 PDT產(chǎn)生的細(xì)胞毒性評(píng)估44-45
• 3.5.2 PDT對(duì)細(xì)胞呼吸直接損傷的研究45-46
• 3.6 小結(jié)46-48
• 結(jié)論及展望48-49
• 參考文獻(xiàn)49-53
• 作者簡(jiǎn)歷53-55
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集55

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本文編號(hào)：710171