本文關(guān)鍵詞：基于PtTFPP磷光氧氣納米傳感器對PDT誘導(dǎo)的腫瘤細胞損傷的研究

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【摘要】：光動力治療作為一種新興的治療腫瘤的方法,因其特異性好、毒副作用小和操作簡單等優(yōu)點受到越來越多的關(guān)注。就體外光動力實驗而言,通常是利用MTT檢測法對其毒性進行評估。本文利用一種可以檢測細胞內(nèi)氧含量變化的磷光氧氣納米傳感器對光動力誘導(dǎo)的細胞損傷進行評估�；谶@種方法,獲得與MTT檢測法相一致的測試結(jié)果,并且成功檢測到光動力治療對細胞線粒體的直接損傷,這是MTT法所不具備的。本論文的主要研究內(nèi)容和具體工作如下：1.首先利用MTT檢測手段,從原卟啉鈉濃度和光照劑量兩個方面對體外光動力實驗條件進行探索,初步掌握了不同光動力條件下HepG2細胞的死傷程度,并為后續(xù)研究提供了合適的實驗條件。2.利用再沉淀-包覆法,分別制備了靶向細胞外和細胞內(nèi)的兩種氧氣傳感器。這兩種氧氣傳感器都是以聚苯乙烯-有機硅氧烷為基質(zhì),將疏水性的氧氣分子探針PtTFPP和熒光參比分子C6隨機封裝到納米顆粒內(nèi),不同的是,用于檢測細胞內(nèi)氧含量變化的納米顆粒表層用帶正電的PLL殼層包覆,基于MTT法毒性檢測和共聚焦成像驗證了這種具有核殼結(jié)構(gòu)的氧氣納米傳感器具有較低的毒性和較好的細胞攝取率。利用時間分辨熒光法檢測PDT作用后HepG2細胞的呼吸速率,發(fā)現(xiàn)細胞內(nèi)氧氣濃度變化要快于細胞外氧氣濃度變化,其測試結(jié)果值更為精確,因此在后續(xù)研究中,利用細胞內(nèi)氧氣濃度變化來對光敏劑藥效進行評估。接著,一系列的基于細胞呼吸檢測PDT療效的實驗證明這種測試手段與MTT法得到的結(jié)果相似,其結(jié)果的可靠性得到證實。此外,基于這種測試方法也成功檢測到了PDT對細胞線粒體的直接損傷,這是MTT法所不具備的。
【關(guān)鍵詞】：光動力治療 氧氣傳感器 線粒體 MTT檢測法 細胞活性
【學(xué)位授予單位】：北京交通大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R730.5;TP212
【目錄】：

• 致謝5-6
• 摘要6-7
• ABSTRACT7-11
• 1 引言11-23
• 1.1 光動力治療的研究概況11-17
• 1.1.1 光動力治療的研究背景11
• 1.1.2 光動力治療的作用機理11-13
• 1.1.3 光敏劑的發(fā)展13-15
• 1.1.4 光動力治療對腫瘤細胞線粒體的損傷15-16
• 1.1.5 光動力治療效果的評估手段及其存在的問題16-17
• 1.2 氧氣傳感器在生物領(lǐng)域的應(yīng)用17-21
• 1.2.1 氧含量檢測在生物領(lǐng)域中的意義17-18
• 1.2.2 細胞氧含量檢測的技術(shù)與方法18-20
• 1.2.3 熒光氧氣納米傳感器的生物應(yīng)用20-21
• 1.3 論文選題及主要研究內(nèi)容21-23
• 2 基于MTT法對肝癌細胞光動力參數(shù)的篩選23-32
• 2.1 細胞培養(yǎng)23-26
• 2.1.1 細胞實驗試劑與儀器23-24
• 2.1.2 細胞培養(yǎng)24-25
• 2.1.3 MTT細胞毒性檢測法25-26
• 2.2 基于MTT法對肝癌細胞光動力參數(shù)的篩選26-31
• 2.2.1 光源的選擇26-27
• 2.2.2 光敏劑劑量的選擇27-28
• 2.2.3 光照劑量的選擇28-31
• 2.3 小結(jié)31-32
• 3 基于細胞呼吸速率對肝癌細胞光動力損傷的評估32-48
• 3.1 引言32-35
• 3.2 PtTFPP摻雜PS-DTS基質(zhì)的氧氣傳感器的制備與表征35-41
• 3.2.1 實驗試劑與設(shè)備35
• 3.2.2 樣品制備方法與步驟35-37
• 3.2.3 氧氣納米傳感器的表征37-39
• 3.2.4 氧氣納米傳感器的生物兼容性39-41
• 3.3 細胞內(nèi)納米顆粒溶氧量標定曲線的繪制41-43
• 3.4 基于磷光氧氣納米傳感器對細胞內(nèi)外溶氧梯度的檢測43-44
• 3.5 基于呼吸速率對PDT后腫瘤細胞損傷的評估44-46
• 3.5.1 PDT產(chǎn)生的細胞毒性評估44-45
• 3.5.2 PDT對細胞呼吸直接損傷的研究45-46
• 3.6 小結(jié)46-48
• 結(jié)論及展望48-49
• 參考文獻49-53
• 作者簡歷53-55
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集55

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本文編號：710171