重金屬污染物和癌癥對(duì)人類的健康都有著極大的威脅。重金屬污染物如Hg²⁺,作為最危險(xiǎn)的重金屬離子之一,被人體吸收后,可直接引起腦損傷、腎衰竭和運(yùn)動(dòng)障礙等疾病。每年的癌癥病發(fā)率和死亡率都在持續(xù)增加,目前癌癥已成為全世界人類致死的主要因素之一。據(jù)研究表明,循環(huán)腫瘤DNA(circulating tumor DNA,ctDNA)攜帶有腫瘤突變的序列信息,可實(shí)現(xiàn)對(duì)癌癥的早期篩查、病情檢測(cè)和預(yù)后評(píng)估。因此,檢測(cè)重金屬污染物Hg²⁺和循環(huán)腫瘤DNA對(duì)于人類的健康都是至關(guān)重要的。由于光學(xué)和電化學(xué)傳感器對(duì)雜質(zhì)的干擾較為敏感,基于光學(xué)和電化學(xué)的檢測(cè)通常需要復(fù)雜的樣品預(yù)處理過程。而磁弛豫傳感器由于其外加的射頻輻射具有深度穿透能力,無需對(duì)樣本進(jìn)行分離和純化步驟即可分析測(cè)試�，F(xiàn)已發(fā)展的基于氧化鐵納米顆粒聚集分散的磁弛豫傳感器存在以下不足:一、磁弛豫傳感器存在納米顆粒從聚集到分散和分散到聚集兩種分析模式,且兩種分析模式的弛豫信號(hào)變化趨勢(shì)不同。兩種分析模式的選擇與多種因素相關(guān),如納米顆粒的尺寸和靶標(biāo)類型等。因此,靶標(biāo)檢測(cè)時(shí)無法準(zhǔn)確判斷該反應(yīng)是屬于哪一種分析模式或是兩種分析...

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮寫符號(hào)對(duì)照表
第一章 緒論
    1.1 磁弛豫傳感器相關(guān)原理
        1.1.1 弛豫時(shí)間信號(hào)產(chǎn)生的原理
        1.1.2 磁弛豫傳感器的檢測(cè)原理
    1.2 磁弛豫傳感器的構(gòu)建
        1.2.1 利用磁性納米顆粒構(gòu)建磁弛豫傳感器
        1.2.2 利用順磁性離子構(gòu)建磁弛豫傳感器
            1.2.2.1 利用錳離子構(gòu)建磁弛豫傳感器
            1.2.2.2 利用鐵離子構(gòu)建磁弛豫傳感器
            1.2.2.3 利用銅離子構(gòu)建磁弛豫傳感器
    1.3 磁弛豫傳感器的應(yīng)用
        1.3.1 基于磁性納米顆粒分散聚集磁弛豫傳感器的應(yīng)用
            1.3.1.1 檢測(cè)金屬離子
            1.3.1.2 檢測(cè)小分子
            1.3.1.3 檢測(cè)核酸
            1.3.1.4 檢測(cè)蛋白質(zhì)
            1.3.1.5 檢測(cè)病毒和細(xì)菌
        1.3.2 基于磁性納米顆粒濃度依賴磁弛豫傳感器的應(yīng)用
            1.3.2.1 檢測(cè)細(xì)菌
            1.3.2.2 檢測(cè)RNA
            1.3.2.3 檢測(cè)小分子
        1.3.3 基于順磁性離子磁弛豫傳感器的應(yīng)用
            1.3.3.1 檢測(cè)細(xì)菌
            1.3.3.2 檢測(cè)病毒
    1.4 工作出發(fā)點(diǎn)和主要內(nèi)容
第二章 基于寡核苷酸修飾的磁性納米顆粒構(gòu)建磁弛豫傳感器檢測(cè)Hg2+

    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 儀器與試劑
        2.2.2 探針制備
            2.2.2.1 MB₃₀-DNA₁探針制備
            2.2.2.2 MB₃₀-avdin的電泳表征過程
            2.2.2.3 MB₂₀₀-DNA₂探針制備
        2.2.3 磁分離過程
        2.2.4 基于磁弛豫傳感器對(duì)Hg²⁺的可行性分析
        2.2.5 基于磁弛豫傳感器檢測(cè)Hg²⁺

        2.2.6 基于磁弛豫傳感器檢測(cè)Hg²⁺的特異性
        2.2.7 基于磁弛豫傳感器檢測(cè)真實(shí)樣本中的Hg²⁺

    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 探針表征
            2.3.1.1 MB₃₀、MB₂₀₀表征
            2.3.1.2 MB₃₀-DNA₁和MB₂₀₀-DNA₂ 表征
        2.3.2 基于磁弛豫傳感器對(duì)Hg²⁺的可行性分析
        2.3.3 基于磁弛豫傳感器檢測(cè)Hg²⁺的條件優(yōu)化
            2.3.3.1 探針濃度優(yōu)化
            2.3.3.2 反應(yīng)buffer和時(shí)間優(yōu)化
        2.3.4 基于磁弛豫傳感器檢測(cè)Hg²⁺

        2.3.5 基于磁弛豫傳感器檢測(cè)Hg²⁺的特異性
        2.3.6 基于磁弛豫傳感器檢測(cè)真實(shí)樣本中的Hg²⁺

    2.4 結(jié)論
第三章 基于Mn²⁺濃度變化的磁弛豫傳感器直接檢測(cè)全血中循環(huán)腫瘤DNA
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 儀器與試劑
        3.2.2 MB₁₀₀₀-DNA₁的制備與表征
            3.2.2.1 MB₁₀₀₀-DNA₁的制備過程
            3.2.2.2 MB₁₀₀₀-DNA₁的表征過程
        3.2.3 MB₁₀₀₀-DNA₁-ALP探針的制備與表征
            3.2.3.1 MB₁₀₀₀-DNA₁-ALP探針的制備過程
            3.2.3.2 MB₁₀₀₀-DNA₁-ALP探針的表征過程
        3.2.4 MB₁₀₀₀-DNA₁-ALP探針定量
        3.2.5 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分析Exo-Ⅲ酶切實(shí)驗(yàn)可行性
            3.2.5.1 樣品準(zhǔn)備過程
            3.2.5.2 溶液的配置
            3.2.5.3 電泳操作步驟
        3.2.6 基于磁弛豫傳感器檢測(cè)ctDNA的可行性分析
        3.2.7 基于磁弛豫傳感器定量檢測(cè)ctDNA
        3.2.8 MB₁₀₀₀-DNA₁-ALP探針的特異性考察
        3.2.9 全血樣本中檢測(cè)ctDNA
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 MB₁₀₀₀-DNA表征與制備優(yōu)化
        3.3.2 MB₁₀₀₀-DNA₁-ALP表征與制備優(yōu)化
        3.3.3 MB₁₀₀₀-DNA₁-ALP探針中定量ALP的偶聯(lián)率
        3.3.4 Exo-Ⅲ酶切實(shí)驗(yàn)可行性分析
        3.3.5 基于磁弛豫傳感器檢測(cè)ctDNA的可行性分析
        3.3.6 基于磁弛豫傳感器檢測(cè)ctDNA的分析條件優(yōu)化
        3.3.7 基于磁弛豫傳感器定量檢測(cè)ctDNA
        3.3.8 MB₁₀₀₀-DNA₁-ALP探針的特異性考察
        3.3.9 全血樣本中檢測(cè)ctDNA
    3.4 結(jié)論
第四章 總結(jié)與展望
    4.1 總結(jié)
        4.1.1 論文的創(chuàng)新點(diǎn)
        4.1.2 論文的不足之處
    4.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間研究成果



本文編號(hào)：3770147

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