近年來,隨著科技的進步,生物傳感器已成為現(xiàn)代生物技術(shù)的重要發(fā)展方向之一。其中,光學生物傳感器因具有選擇性好、靈敏度高、操作簡單、分析速度快以及價格低廉等優(yōu)點,被廣泛應用于生物、化學、食品、醫(yī)學和環(huán)境等領(lǐng)域。功能核酸探針的發(fā)現(xiàn)突破了核酸只是遺傳信息存儲和轉(zhuǎn)運的載體的傳統(tǒng)認識,作為具有高親和力和特異性等特殊功能的核酸分子,在分析化學領(lǐng)域表現(xiàn)出巨大的優(yōu)勢。等溫信號放大技術(shù)因其能夠在恒定溫度條件下實現(xiàn)快速、高效的信號放大,被廣泛應用于各種分析物的檢測中。功能核酸探針與等溫信號放大技術(shù)的結(jié)合,為生物傳感體系的構(gòu)建提供了一個全新的設計思路和平臺。本論文利用功能核酸探針(核酸適配體、分子信標、DNAzyme)的特異性,結(jié)合酶輔助的放大技術(shù)、無酶聯(lián)置換和CHA等等溫信號放大技術(shù),構(gòu)建了三種簡單、快速、高特異性和超靈敏的新型光學生物傳感器。首先,本論文提出了一種基于雙功能phi29 DNA聚合酶介導的等溫循環(huán)聯(lián)置換放大來檢測沙門氏菌的熒光傳感策略。該策略依賴于目標觸發(fā)引起成熟引物的形成,該引物在雙功能phi29的輔助下引發(fā)循環(huán)聯(lián)置換聚合反應,從而實現(xiàn)目標的放大檢測。據(jù)我們所知,這項工作是首次將雙功能ph...

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 光學生物傳感器
        1.1.1 熒光生物傳感器
        1.1.2 其他光學生物傳感器
    1.2 功能核酸在光學生物傳感器中的應用
        1.2.1 核酸適配體
        1.2.2 分子信標
        1.2.3 DNAzyme
        1.2.4 基于“T-Hg²⁺-T”和“C-Ag+-C”結(jié)構(gòu)的探針
    1.3 等溫信號放大技術(shù)
        1.3.1 基于聚合酶的放大技術(shù)
        1.3.2 基于核酸酶的放大技術(shù)
        1.3.3 雜交聯(lián)式反應放大技術(shù)
        1.3.4 催化發(fā)夾自組裝放大技術(shù)
    1.4 本論文的研究思路
第二章 基于雙功能phi29 DNA聚合酶介導的等溫循環(huán)聯(lián)置換聚合反應的沙門氏菌熒光傳感器研究
    2.1 引言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 材料與試劑
        2.2.2 儀器
        2.2.3 細菌菌株的培養(yǎng)
        2.2.4 沙門氏菌檢測
        2.2.5 聚丙烯酰胺凝膠電泳分析
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 傳感器檢測原理
        2.3.2 可行性驗證
        2.3.3 聚丙烯酰胺凝膠電泳表征
        2.3.4 實驗條件的優(yōu)化
        2.3.5 傳感器分析性能評估
        2.3.6 特異性考察
        2.3.7 實際樣品分析
    2.4 小結(jié)
第三章 基于鄰近增強雙向酶修復放大技術(shù)的三磷酸腺苷熒光傳感器研究
    3.1 引言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 材料與試劑
        3.2.2 儀器
        3.2.3 三磷酸腺苷(ATP)檢測
        3.2.4 人血清中ATP的測定
        3.2.5 高效液相色譜法檢測ATP
        3.2.6 聚丙烯酰胺凝膠電泳分析
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 傳感器檢測原理
        3.3.2 可行性驗證
        3.3.3 聚丙烯酰胺凝膠電泳表征
        3.3.4 實驗條件的優(yōu)化
        3.3.5 傳感器分析性能評估
        3.3.6 特異性考察
        3.3.7 實際樣品分析
    3.4 小結(jié)
第四章 基于G-四聯(lián)體DNAzymes耦聯(lián)銀納米簇的沙門氏菌熒光傳感器研究
    4.1 引言
    4.2 實驗部分
        4.2.1 材料與試劑
        4.2.2 儀器
        4.2.3 銀納米簇的制備
        4.2.4 沙門氏菌的檢測
        4.2.5 凝膠電泳表征
        4.2.6 透射電鏡表征
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 傳感器檢測原理
        4.3.2 可行性驗證
        4.3.3 實驗條件的優(yōu)化
        4.3.4 聚丙烯酰胺凝膠電泳表征
        4.3.5 傳感器分析性能評估
        4.3.6 特異性考察
        4.3.7 實際樣品分析
    4.4 小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻
致謝
附錄



本文編號：3752210