近年來(lái),隨著科技的進(jìn)步,生物傳感器已成為現(xiàn)代生物技術(shù)的重要發(fā)展方向之一。其中,光學(xué)生物傳感器因具有選擇性好、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、分析速度快以及價(jià)格低廉等優(yōu)點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于生物、化學(xué)、食品、醫(yī)學(xué)和環(huán)境等領(lǐng)域。功能核酸探針的發(fā)現(xiàn)突破了核酸只是遺傳信息存儲(chǔ)和轉(zhuǎn)運(yùn)的載體的傳統(tǒng)認(rèn)識(shí),作為具有高親和力和特異性等特殊功能的核酸分子,在分析化學(xué)領(lǐng)域表現(xiàn)出巨大的優(yōu)勢(shì)。等溫信號(hào)放大技術(shù)因其能夠在恒定溫度條件下實(shí)現(xiàn)快速、高效的信號(hào)放大,被廣泛應(yīng)用于各種分析物的檢測(cè)中。功能核酸探針與等溫信號(hào)放大技術(shù)的結(jié)合,為生物傳感體系的構(gòu)建提供了一個(gè)全新的設(shè)計(jì)思路和平臺(tái)。本論文利用功能核酸探針(核酸適配體、分子信標(biāo)、DNAzyme)的特異性,結(jié)合酶輔助的放大技術(shù)、無(wú)酶聯(lián)置換和CHA等等溫信號(hào)放大技術(shù),構(gòu)建了三種簡(jiǎn)單、快速、高特異性和超靈敏的新型光學(xué)生物傳感器。首先,本論文提出了一種基于雙功能phi29 DNA聚合酶介導(dǎo)的等溫循環(huán)聯(lián)置換放大來(lái)檢測(cè)沙門(mén)氏菌的熒光傳感策略。該策略依賴(lài)于目標(biāo)觸發(fā)引起成熟引物的形成,該引物在雙功能phi29的輔助下引發(fā)循環(huán)聯(lián)置換聚合反應(yīng),從而實(shí)現(xiàn)目標(biāo)的放大檢測(cè)。據(jù)我們所知,這項(xiàng)工作是首次將雙功能ph...

【文章頁(yè)數(shù)】：72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 光學(xué)生物傳感器
        1.1.1 熒光生物傳感器
        1.1.2 其他光學(xué)生物傳感器
    1.2 功能核酸在光學(xué)生物傳感器中的應(yīng)用
        1.2.1 核酸適配體
        1.2.2 分子信標(biāo)
        1.2.3 DNAzyme
        1.2.4 基于“T-Hg²⁺-T”和“C-Ag+-C”結(jié)構(gòu)的探針
    1.3 等溫信號(hào)放大技術(shù)
        1.3.1 基于聚合酶的放大技術(shù)
        1.3.2 基于核酸酶的放大技術(shù)
        1.3.3 雜交聯(lián)式反應(yīng)放大技術(shù)
        1.3.4 催化發(fā)夾自組裝放大技術(shù)
    1.4 本論文的研究思路
第二章 基于雙功能phi29 DNA聚合酶介導(dǎo)的等溫循環(huán)聯(lián)置換聚合反應(yīng)的沙門(mén)氏菌熒光傳感器研究
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 材料與試劑
        2.2.2 儀器
        2.2.3 細(xì)菌菌株的培養(yǎng)
        2.2.4 沙門(mén)氏菌檢測(cè)
        2.2.5 聚丙烯酰胺凝膠電泳分析
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 傳感器檢測(cè)原理
        2.3.2 可行性驗(yàn)證
        2.3.3 聚丙烯酰胺凝膠電泳表征
        2.3.4 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化
        2.3.5 傳感器分析性能評(píng)估
        2.3.6 特異性考察
        2.3.7 實(shí)際樣品分析
    2.4 小結(jié)
第三章 基于鄰近增強(qiáng)雙向酶修復(fù)放大技術(shù)的三磷酸腺苷熒光傳感器研究
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 材料與試劑
        3.2.2 儀器
        3.2.3 三磷酸腺苷(ATP)檢測(cè)
        3.2.4 人血清中ATP的測(cè)定
        3.2.5 高效液相色譜法檢測(cè)ATP
        3.2.6 聚丙烯酰胺凝膠電泳分析
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 傳感器檢測(cè)原理
        3.3.2 可行性驗(yàn)證
        3.3.3 聚丙烯酰胺凝膠電泳表征
        3.3.4 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化
        3.3.5 傳感器分析性能評(píng)估
        3.3.6 特異性考察
        3.3.7 實(shí)際樣品分析
    3.4 小結(jié)
第四章 基于G-四聯(lián)體DNAzymes耦聯(lián)銀納米簇的沙門(mén)氏菌熒光傳感器研究
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 材料與試劑
        4.2.2 儀器
        4.2.3 銀納米簇的制備
        4.2.4 沙門(mén)氏菌的檢測(cè)
        4.2.5 凝膠電泳表征
        4.2.6 透射電鏡表征
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 傳感器檢測(cè)原理
        4.3.2 可行性驗(yàn)證
        4.3.3 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化
        4.3.4 聚丙烯酰胺凝膠電泳表征
        4.3.5 傳感器分析性能評(píng)估
        4.3.6 特異性考察
        4.3.7 實(shí)際樣品分析
    4.4 小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄



本文編號(hào)：3752210