發(fā)布時(shí)間：2021-12-11 11:22

　　目的阿爾茨海默病（AD）是一種最常見的神經(jīng)退行性疾病。2010年,全球已有3600萬AD患者,預(yù)計(jì)到2030年AD患者將達(dá)到6570萬。Tau蛋白異常聚集形成的神經(jīng)原纖維纏結(jié)是AD的主要病理特征,并且4R亞型的Tau-441蛋白的增加與認(rèn)知功能下降有關(guān),其可能作為AD早期診斷的生物標(biāo)志物。本研究旨在構(gòu)建一種基于單層還原氧化石墨烯電化學(xué)生物傳感器高靈敏的檢測人體血清中Tau-441蛋白,為AD的早期診斷提供技術(shù)支持。方法本研究利用1,3,6,8-芘四磺酸四鈉鹽（PTSA）將還原氧化石墨烯（rGO）剝離成導(dǎo)電性能更好的單層還原氧化石墨烯。帶有羧基的單層還原氧化石墨烯修飾玻碳電極,在EDC/NHS的作用下固定帶有氨基的抗體,Tau-441蛋白通過抗體特異性識別結(jié)合到玻碳電極上,利用循環(huán)伏安法（CV）技術(shù)對電化學(xué)生物傳感器進(jìn)行電化學(xué)表征,方波伏安法（SWV）研究抗體與Tau-441蛋白之間的相互作用,電位值定性,電流值定量。為了得到較好的檢測結(jié)果,本研究對實(shí)驗(yàn)中復(fù)合材料的體積、抗體的孵育時(shí)間、抗體的體積、抗原抗體孵育時(shí)間4個(gè)條件進(jìn)行了優(yōu)化。在最優(yōu)條件下,驗(yàn)證該方法的檢出限、特異性、準(zhǔn)確度和精密... 

【文章來源】：武漢科技大學(xué)湖北省

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第1章 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑和耗材
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    1.2 方法
        1.2.1 原理
        1.2.2 rGO/PTSA/Cu~(2+)復(fù)合材料的制備
        1.2.3 玻碳電極的修飾
        1.2.4 電化學(xué)生物傳感器的構(gòu)建
        1.2.5 電極的CV電化學(xué)方法表征
        1.2.6 人體血清樣品的處理
        1.2.7 方法學(xué)性能指標(biāo)
        1.2.8 溶液的配制
第2章 結(jié)果
    2.1 材料的表征
    2.2 電極的電化學(xué)性能
    2.3 電極修飾膜的穩(wěn)定性
    2.4 檢測條件的優(yōu)化
        2.4.1 rGO/PTSA/Cu~(2+)復(fù)合材料的體積的優(yōu)化
        2.4.2 抗體體積的優(yōu)化
        2.4.3 抗體孵育時(shí)間的優(yōu)化
        2.4.4 抗原抗體孵育時(shí)間的優(yōu)化
    2.5 方法學(xué)驗(yàn)證
        2.5.1 SWV檢測圖
        2.5.2 線性和檢出限
        2.5.3 方法的準(zhǔn)確度和精密度
        2.5.4 方法的選擇性和穩(wěn)定性
    2.6 人體血清樣品的檢測
第3章 討論
    3.1 材料的表征
    3.2 電極的電化學(xué)性能
    3.3 電極修飾膜的穩(wěn)定性
    3.4 檢測條件的優(yōu)化
        3.4.1 rGO/PTSA/Cu~(2+)復(fù)合材料的體積的優(yōu)化
        3.4.2 抗體體積的優(yōu)化
        3.4.3 抗體孵育時(shí)間的優(yōu)化
        3.4.4 抗原抗體孵育時(shí)間的優(yōu)化
    3.5 方法學(xué)驗(yàn)證
        3.5.1 SWV檢測圖
        3.5.2 線性和檢出限
        3.5.3 方法的準(zhǔn)確度和精密度
        3.5.4 方法的選擇性和穩(wěn)定性
    3.6 人體血清樣品的檢測
第4章 結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
附錄1 攻讀學(xué)位期間的研究成果
附錄2 攻讀碩士學(xué)位期間參加的科研項(xiàng)目


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]阿爾茨海默病中Tau蛋白與線粒體損傷[J]. 趙俊一,鐘偉聰,鄧云松,肖時(shí)鋒.  生命科學(xué)研究. 2020(01)
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[10]對進(jìn)行性核上性麻痹新診斷標(biāo)準(zhǔn)的思考:附2例病例報(bào)告[J]. 孫澄玥,彭林柳,杜夏,劉藝鳴.  南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2019(04)



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