miRNA作為一類輔助腫瘤診斷的生物標志物,開發(fā)對其高靈敏性和選擇性的檢測方法對于相關疾病的診斷至關重要。本文工作中,我們結合了具有特殊酶切活性的雙鏈特異性核酸酶及納米材料的優(yōu)點,構建了兩種用于miRNA超靈敏檢測的電化學傳感方法。具體研究內(nèi)容如下:1.基于雙鏈特異性核酸酶及橋聯(lián)DNA-金納米顆粒結構的miRNA電化學傳感器首先通過金-巰反應將金納米顆粒與兩條末端巰基化的DNA序列（DNA探針1和2）混合,制備出多功能金納米顆粒。接著,通過兩個部分互補序列（橋式DNA探針1和2）的雜交,形成具有雙鏈中間部分及四個末端單鏈結構的橋聯(lián)DNA。這四條單鏈中的兩條可以與DNA探針1雜交,第三條可以與DNA探針2雜交。此外,第四條單鏈可用于進一步電極定位。因此,橋聯(lián)DNA結構可以將三個金納米顆粒綁定在一起,形成橋聯(lián)DNA-金納米顆粒復合結構。接下來,在金電極上修飾捕獲探針。其發(fā)夾結構無法直接捕獲橋聯(lián)DNA-金納米顆粒。當存在目標miRNA時,發(fā)夾結構會打開,形成的DNA/RNA部分可以被雙鏈特異性核酸酶識別并進一步降解其中的DNA。捕獲探針余留單鏈區(qū)域可以用于與橋聯(lián)DNA第四條單鏈雜交,從而將復... 

【文章來源】：中國科學技術大學安徽省 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 緒論
    1.1 miRNA簡介及檢測方法
    1.2 雙鏈特異性核酸酶介導的信號放大
    1.3 電化學技術及納米技術
    1.4 生物燃料電池
    1.5 本論文研究內(nèi)容概述
第2章 基于雙鏈特異性核酸酶及橋聯(lián)DNA-金納米顆粒結構的miRNA電化學傳感器
    2.1 檢測原理
    2.2 實驗部分
    2.3 結果與討論
    2.4 結論
第3章 基于雙鏈特異性核酸酶及DNA功能化多孔磁性納米顆粒的miRNA電化學傳感器
    3.1 檢測原理
    3.2 實驗部分
    3.3 結果與討論
    3.4 結論
參考文獻
致謝
在讀期間發(fā)表的學術論文與取得的其他研究成果



本文編號：3472452