隨著臨床細菌感染的日益加重和耐藥細菌的層出不窮,細菌的快速靈敏檢測尤為重要。另一方面,新型納米材料的不斷開發(fā)利用推動了細菌檢測、抗菌的新篇章。臨床上也在不斷地采納新材料實現(xiàn)生物標志物的快速速靈敏檢測以及POCT領域的快速發(fā)展。另外,細菌自身特有結構也為細菌的快速靈敏檢測提供了寶貴資源。本論文整合臨床檢驗診斷學、材料科學技術及生物分析化學等學科的最新研究成果,基于電化學和電化學發(fā)光平臺,以開發(fā)新型納米材料在細菌特有結構上的深入利用為切入點,構建了一系列的無酶細菌檢測生物傳感器,為病原微生物的快速、靈敏、廣譜檢測提供了新的研究思路。本研究主要包括以下三個部分:1基于二硫化鉬-鉑納米-萬古霉素的金黃色葡萄球菌ECL分析方法研究基于金納米粒子（AuNPs）和hemin作為S₂O₈^2-/O₂電化學發(fā)光（ECL）系統(tǒng)的可再生增強底物,利用MoS₂-PtNPs作為猝滅劑,構建了一種用于金黃色葡萄球菌（S.aureus）檢測的“開關”式高靈敏ECL適體傳感器。在本研究中,AuNPs不僅可以增強... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數(shù)】：118 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

Ru(bpy)32+-TPrA共反應體系ECL機理。[46]

圖2.1展示了所提出的ECL傳感器的構建過程。首先,在拋光后的GCE表面修飾RGO以增加比表面積和電極導電性。然后,用電化學方法將AuNPs沉積在RGO修飾的GCE表面,再用末端標記硫醇基的適配體進行進一步修飾電極。因此,高ECL信號強度通過AuNPs和hemin的雙重增強實現(xiàn)(記錄為信號開的狀態(tài))。以MoS2粉末為原料,采用超聲剝離的方法制備MoS2納米片,然后通過原位還原H2PtCl6使其還原為PtNPs,合成MoS2-PtNPs。值得一提的是,萬古霉素與細菌細胞壁的前肽多糖末端丙氨酸緊密結合,據(jù)此,利用鉑氨鍵合成了具有有效信號抑制和目標親和力的MoS2-Pt-Van。根據(jù)雙層夾心模式,本文提出了ECL適體傳感器對S.aureus進行超敏檢測,利用MoS2-Pt-Van作為高效的猝滅探針(記錄為信號關閉狀態(tài))。3.2 MoS2-PtNPs和RGO的表征

為了驗證適配體與S.aureus的結合能力,本實驗利用熒光標記適配體與S.aureus共培養(yǎng)。融合圖像顯示為綠色熒光(圖2.2F),S.aureus與適配體的結合率約為80%~90%,說明其結合親和力較好。適配體與S.aureus的顯著親和力為ECL適體傳感器的敏感檢測提供了前提。接下里通過材料抑菌試驗驗證了MoS2-PtNPs與萬古霉素的連接能力。從圖2.4可以看出,MoS2-Pt-Van具有與萬古霉素相同的殺菌活性,而對照組幾乎沒有殺菌活性。這些結果證實了MoS2-Pt-Van的成功合成。3.4 ECL適體傳感器的阻抗表征


本文編號：2930523