動物過敏原牛血清白蛋白表面等離子共振傳感器檢測方法的建立
本文選題:牛血清白蛋白 切入點:動物過敏原 出處:《南京農(nóng)業(yè)大學學報》2017年04期
【摘要】:[目的]建立一種表面等離子共振(surface plasmon resonance,SPR)技術,用于快速、準確、靈敏、定量檢測動物過敏原牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)。[方法]將鼠抗BSA單克隆抗體偶聯(lián)于SPR生物傳感器芯片表面,監(jiān)測BSA與抗體結合后芯片表面的變化,并基于SPR技術建立快速檢測微量BSA的新方法,確定其檢出限和最佳線性范圍,并進行重復性驗證和初步應用。[結果]抗體的偶聯(lián)水平為18 000,對BSA具有良好的親和能力;BSA質量濃度在6.25~400 ng·m L~(-1)范圍內(nèi),與SPR響應值的變化量呈良好的線性關系(R2=0.992),方法檢測限為33.68 ng·m L~(-1);用建立的SPR方法檢測不同濃度BSA的日內(nèi)RSD為1.12%~3.42%,日間RSD為0.84%~3.98%,均小于5%;SPR方法與ELISA商業(yè)化試劑盒檢測不同市售食品中BSA含量的結果比較,差異不顯著(P0.05)。[結論]SPR方法可靠性好、穩(wěn)定性強,適用于食品中過敏原BSA的高通量實時檢測。
[Abstract]:[objective] to establish a surface plasmon resonance technique for rapid, accurate, sensitive and quantitative detection of bovine bovine serum albumin (BSA), an animal allergen. [methods] Mouse anti BSA monoclonal antibody was coupled to the surface of SPR biosensor chip. The changes of chip surface after binding of BSA and antibody were monitored, and a new method for rapid detection of trace BSA was established based on SPR technology, and the detection limit and optimal linear range were determined. The results showed that the coupling level of antibody was 18000, and had good affinity to BSA in the range of 6.25 ~ 400ng / mL ~ (-1). There was a good linear relationship with the response value of SPR. The detection limit of the method was 33.68 ng / mL ~ (-1); the intraday RSD of different concentrations of BSA by the established SPR method was 1.12 ~ (3.42) and that of RSD during the day was 0.84 ~ 3.98, which was less than that of the commercial test kit of ELISA. Comparison of the results of BSA content in foods sold on the market, [conclusion] SPR method is reliable and stable, which is suitable for high throughput real-time detection of allergen BSA in food.
【作者單位】: 南京農(nóng)業(yè)大學國家肉品質量安全控制工程技術研究中心/農(nóng)業(yè)部肉及肉制品質量監(jiān)督檢驗測試中心(南京)/食品安全與營養(yǎng)協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】:國家自然科學基金項目(31501395) 江蘇省自然科學基金項目(BK20140722)
【分類號】:TP212;TS207.3
【參考文獻】
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1 李,
本文編號:1699914
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