微藻的分離篩選及以養(yǎng)豬廢水為培養(yǎng)基生產(chǎn)碳水化合物
【學(xué)位單位】:哈爾濱工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2019
【中圖分類(lèi)】:TE667;Q949.2
【部分圖文】:
研究的技術(shù)路線(xiàn)
哈爾濱工業(yè)大學(xué)理學(xué)碩士學(xué)位論文第 2 章 實(shí)驗(yàn)材料與方法2.1 實(shí)驗(yàn)材料2.1.1 實(shí)驗(yàn)藻株及培養(yǎng)條件本試驗(yàn)所使用的藻株有:從黑龍江省哈爾濱市馬家溝采集到的水樣中分離出的純種凱氏擬小球藻 Parachlorella kessleri QWY28;從臺(tái)灣南部沿海地區(qū)篩選出的衣藻 Chlamydomonas sp. JSC4。利用 BG-11 培養(yǎng)基(如表 2-1 所示)對(duì)微藻進(jìn)行前培養(yǎng),在無(wú)菌操作臺(tái)中將微藻接種于滅菌(121°C,20 min)后的 200mL 培養(yǎng)液中,微藻前培養(yǎng)在 250 mL 的肖特瓶中,將反應(yīng)器放入 30℃的恒溫玻璃水缸中進(jìn)行培養(yǎng)。玻璃缸兩側(cè)安裝平行光源,24 h 光照,光照強(qiáng)度設(shè)置為 200mol/m2/s。前培養(yǎng) 3-4 天后,將微藻轉(zhuǎn)接于 500 mL 的養(yǎng)豬廢水中。
見(jiàn)圖 1a、b 和 c,本研究共分離得到 37 株淡水來(lái)源的微藻,根據(jù)微藻的形態(tài)暫時(shí)分為小球藻、柵藻和衣藻。選取 GeneBank 中已有的序列相似的親緣較近的藻株進(jìn)行比對(duì),構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù),由圖可知 QWY28 與已知藻株P(guān)arachlorella kessleri TY02(KX0213561)的相似度到達(dá) 100%,在系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)的同一分支上,所以可以確定 QWY28 是小球藻屬(Chlorella)中的 Parachlorellakessleri。QWY36 與已知藻株 Desmodesmus sp. DSA6(KX818837)的相似度達(dá)到99%,可以確定 QWY36 是柵藻屬(Scenedesmus)中的一個(gè)種。QWY37 與已知藻株 Chlamydomonas sp YACCYB332(MH683856)的相似度達(dá)到 100%,可以確定QWY37 是衣藻屬中的一個(gè)種。經(jīng)過(guò)形態(tài)學(xué)與基因序列的鑒定,確定 3 株微藻屬于原生生物界的綠藻門(mén)的 3 個(gè)屬,見(jiàn)表 3-1,正式命名為凱氏擬小球藻Parachlorella kessleri QWY28 、 柵 藻 Desmodesmus sp. QWY36 和 衣 藻Chlamydomonas sp. QWY37,這 3 株藻在 NCBI 上獲得的序列登錄號(hào)分別為MK367466、MK367467 和 MK367468。這三株藻是淡水中常見(jiàn)的藻類(lèi),特別是在富含營(yíng)養(yǎng)的靜水中,例如:水庫(kù)、水坑、胡泊、池塘和沼澤等水體中,其中小球藻和柵藻對(duì)水中的各種污染物具有較強(qiáng)的承受力。
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本文編號(hào):2839936
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