本研究使用的乳酸菌菌種均分離自內(nèi)蒙古錫盟地區(qū)的酸馬奶酒中,第一,使用Spot-on-lawn法在固體培養(yǎng)基上對具有產(chǎn)生抑菌物質(zhì)潛力的Lactobacillus plantarumHE-1和Enterococcus faecium HE-432進(jìn)行篩選,同時(shí)篩選出用于后續(xù)檢測試驗(yàn)的最佳指示菌；第二,選用相近或不同種屬乳酸菌作為環(huán)境中的刺激因素,設(shè)計(jì)14個(gè)共培養(yǎng)組合,使用打孔法檢測混菌培養(yǎng)上清液的抑菌性；第三,對于具有抑菌性的混菌培養(yǎng)上清液進(jìn)行AI-2信號分子檢測,尋找AI-2信號分子產(chǎn)生與發(fā)酵產(chǎn)生抑菌物質(zhì)二者之間在時(shí)間和產(chǎn)生量上的對應(yīng)關(guān)系；第四,對產(chǎn)抑菌物質(zhì)乳酸菌生物膜生成和群體感應(yīng)現(xiàn)象二者關(guān)系進(jìn)行探索,為以后將其開發(fā)為腸道益生菌打下基礎(chǔ)；第五,使用分子生物學(xué)手段驗(yàn)證產(chǎn)抑菌物質(zhì)乳酸菌含有l(wèi)uxS基因片段,輔助證明AI-2信號分子的產(chǎn)生。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,第一,L. plantarum HE-1產(chǎn)生的抑菌物質(zhì)對腸球菌、發(fā)酵乳桿菌、植物乳桿菌、乳酸乳球菌、乳酸片球菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌和藤黃微球菌均有不同程度的抑制作用,并選取抑制作用最好的大腸桿菌作為后續(xù)實(shí)驗(yàn)的指示菌。第二,在...

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
插圖和附表清單
1 前言
    1.1 乳酸菌抑菌特性概述
        1.1.1 乳酸菌素Nisin的研究概述
        1.1.2 乳酸菌Ⅱ類細(xì)菌素的研究概述
    1.2 群體感應(yīng)現(xiàn)象概述
        1.2.1 種內(nèi)群體感應(yīng)系統(tǒng)概述
        1.2.2 由LuxS/AI-2介導(dǎo)的種間群體感應(yīng)系統(tǒng)概述
    1.3 基于LuxS/AI-2的群體感應(yīng)系統(tǒng)在乳酸菌共培養(yǎng)中的研究進(jìn)展概述
        1.3.1 乳酸菌種間共培養(yǎng)中LuxS/AI-2系統(tǒng)調(diào)控的QS現(xiàn)象
        1.3.2 乳酸菌與其他種屬菌株或細(xì)胞共培養(yǎng)中LuxS/AI-2系統(tǒng)調(diào)控的QS現(xiàn)象
    1.4 微生物生物膜生成與LuxS/AI-2的群體感應(yīng)系統(tǒng)二者之間的關(guān)系
    1.5 研究的目的及意義
2 材料與方法
    2.1 儀器與材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)菌種
        2.1.2 儀器
        2.1.3 藥品試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 菌種保藏、活化和計(jì)數(shù)
        2.2.2 Spot-on-lawn抑菌物質(zhì)檢測法
        2.2.3 乳酸菌共培養(yǎng)方法
        2.2.4 發(fā)酵上清液的制備
        2.2.5 打孔法檢測混菌培養(yǎng)上清液抑菌物質(zhì)
        2.2.6 AI-2信號分子的檢測及方法優(yōu)化
        2.2.7 生物膜形成的檢測
        2.2.8 DNA的提取與luxS基因的擴(kuò)增
        2.2.9 同源性分析與系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建
3 結(jié)果與分析
    3.1 Spot-on-lawn法篩選產(chǎn)抑菌物質(zhì)實(shí)驗(yàn)菌和最佳指示菌
    3.2 共培養(yǎng)中產(chǎn)抑菌物質(zhì)與AI-2信號分子產(chǎn)生二者的相關(guān)關(guān)系
        3.2.1 共培養(yǎng)誘導(dǎo)產(chǎn)生抑菌物質(zhì)
        3.2.2 共培養(yǎng)中AI-2信號分子的檢測
        3.2.3 共培養(yǎng)中AI-2信號分子的產(chǎn)生與產(chǎn)抑菌物質(zhì)二者的相關(guān)關(guān)系
    3.3 L.plantarum HE-1生物膜形成與AI-2信號分子產(chǎn)生二者的相關(guān)關(guān)系
    3.4 luxS的擴(kuò)增及同源性和系統(tǒng)發(fā)育分析
4 討論
    4.1 Spot-on-lawn法篩選產(chǎn)抑菌物質(zhì)實(shí)驗(yàn)菌和最佳指示菌
    4.2 共培養(yǎng)中產(chǎn)抑菌物質(zhì)與AI-2信號分子產(chǎn)生二者的相關(guān)關(guān)系
        4.2.1 共培養(yǎng)誘導(dǎo)產(chǎn)生抑菌物質(zhì)
        4.2.2 共培養(yǎng)中AI-2信號分子的檢測
        4.2.3 共培養(yǎng)中AI-2信號分子的產(chǎn)生與產(chǎn)抑菌物質(zhì)二者的相關(guān)關(guān)系
    4.3 L.plantarum HE-1生物膜形成與AI-2信號分子產(chǎn)生二者的相關(guān)關(guān)系
    4.4 luxS的擴(kuò)增及同源性和系統(tǒng)發(fā)育分析
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
作者簡介



本文編號：4013142