近年來,關(guān)于群體感應(yīng)(quorum sensing, QS)系統(tǒng)介導(dǎo)病原微生物致病機(jī)理等方面的研究比較多,而群體感應(yīng)系統(tǒng)介導(dǎo)益生菌,特別是乳桿菌在抑菌效果、黏附性、耐酸性及在動(dòng)物消化道中的定植等益生特性方面的研究比較少,并且AI-2/LuxS群體感應(yīng)系統(tǒng)介導(dǎo)乳桿菌對(duì)膽鹽的耐受、調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡以及對(duì)機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)等益生特性還未見報(bào)道。基于當(dāng)前的研究現(xiàn)狀,本課題研究群體感應(yīng)系統(tǒng)介導(dǎo)植物乳桿菌AY01和植物乳桿菌YM4-3的生長(zhǎng)特性、抑菌性、luxS基因表達(dá)、耐酸耐膽鹽并對(duì)植物乳桿菌群體感應(yīng)luxS基因進(jìn)行敲除。乳酸菌(Lactic acid bacteria, LAB)是指在發(fā)酵過程中能夠利用碳水化合物進(jìn)行發(fā)酵,產(chǎn)生以乳酸為主要發(fā)酵產(chǎn)物的一群細(xì)菌；它不是微生物分類學(xué)上的名稱,只是一種慣用叫法。乳酸菌的分布非常廣泛,在生物體和自然環(huán)境中均有分布,如：人和動(dòng)物的消化系統(tǒng)、泌尿生殖系統(tǒng)、糞便；并且發(fā)酵動(dòng)植物食品和飲料、植物體、土壤、淤泥和污水中均有乳酸菌分布。乳桿菌(Lactobacillus)是乳酸菌(LAB)最大的一個(gè)屬,因其形態(tài)呈桿狀以及能發(fā)酵碳水化合物(主要為葡萄糖)并產(chǎn)生大量乳酸而...

【文章頁(yè)數(shù)】：93 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮寫詞表
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 種內(nèi)的群體感應(yīng)系統(tǒng)
        1.2.1 革蘭氏陰性細(xì)菌群體感應(yīng)系統(tǒng)
        1.2.2 革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌群體感應(yīng)系統(tǒng)
    1.3 種間信號(hào)感應(yīng)系統(tǒng)
        1.3.1 自誘導(dǎo)-2(AI-2)概述
        1.3.2 擴(kuò)散信號(hào)因子(Diffusible signal factor,DSF)概述
    1.4 乳桿菌概述
    1.5 乳酸桿菌AI-2/LuxS群體感應(yīng)系統(tǒng)介導(dǎo)的益生特性研究進(jìn)展
        1.5.1 乳酸桿菌AI-2/LuxS群體感應(yīng)系統(tǒng)介導(dǎo)的抑菌特性研究
        1.5.2 乳桿菌AI-2/LuxS群體感應(yīng)系統(tǒng)介導(dǎo)的耐酸特性研究
        1.5.3 乳桿菌AI-2/LuxS群體感應(yīng)系統(tǒng)介導(dǎo)的腸道黏附和生物膜形成
        1.5.4 乳桿菌AI-2/LuxS群體感應(yīng)系統(tǒng)介導(dǎo)的動(dòng)物消化道定植
    2 問題與展望
    3. 研究的目的及意義
第二章 群體感應(yīng)介導(dǎo)的植物乳桿菌益生特性
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)菌株
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.4 培養(yǎng)基及試劑配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 生長(zhǎng)曲線和產(chǎn)酸試驗(yàn)
        2.2.2 抑菌試驗(yàn)
        2.2.3 生長(zhǎng)階段luxS基因表達(dá)分析
        2.2.4 植物乳桿菌的酸耐受性研究
        2.2.5 植物乳桿菌耐膽鹽研究
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        2.3.1 植物乳桿菌生長(zhǎng)和產(chǎn)酸曲線繪制
        2.3.2 抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        2.3.3 生長(zhǎng)階段luxS基因表達(dá)分析
        2.3.4 植物乳桿菌耐酸特性結(jié)果
        2.3.5 耐膽鹽研究結(jié)果
    2.4 本章小結(jié)
第三章 植物乳桿菌luxS基因功能研究
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 菌種及質(zhì)粒
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.1.3 工具酶與試劑盒
        3.1.4 培養(yǎng)基
        3.1.5 試劑
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 引物設(shè)計(jì)
        3.2.2 植物乳桿菌AY01和植物乳桿菌YM 4-3的基因組抽提
        3.2.3 基因的PCR擴(kuò)增以及序列分析
        3.2.4. 非溫度敏感性質(zhì)粒構(gòu)建
        3.2.5 溫度敏感性質(zhì)粒構(gòu)建
        3.2.6 基因敲除載體轉(zhuǎn)化進(jìn)入植物乳桿菌
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 植物乳桿菌AY01和YM4-3基因組提取及PCR擴(kuò)增產(chǎn)物
        3.3.2 植物乳桿菌AY01和YM4-3luxS基因的序列分析
        3.3.3 植物乳桿菌基因敲除載體的構(gòu)建
        3.3.4 植物乳桿菌YM4-3luxS基因敲除載體pKML01構(gòu)建
        3.3.5 植物乳桿菌YM4-3luxS基因敲除載體pKML02構(gòu)建
        3.3.6 植物乳桿菌AY01luxS基因敲除載體pKML05構(gòu)建
        3.3.7 植物乳桿菌luxS基因敲除
    3.4 本章小結(jié)
第四章 總結(jié)
附錄A 攻讀碩士期間發(fā)表論文目錄
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄A 本實(shí)驗(yàn)所用質(zhì)粒圖譜



本文編號(hào)：3987596