為了探索奶牛隱性乳房炎大腸桿菌不同生長(zhǎng)時(shí)期及不同培養(yǎng)條件下,AI-2信號(hào)分子的產(chǎn)生與lux S和pfs轉(zhuǎn)錄水平間的相互關(guān)系。應(yīng)用哈維弧菌BB170,檢測(cè)奶牛隱性乳房炎致病性大腸桿菌不同分離株、不同生長(zhǎng)期及不同培養(yǎng)條件下AI-2的活性,應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)其AI-2產(chǎn)生水平與lux S基因與pfs基因轉(zhuǎn)錄的相關(guān)性。結(jié)果表明,E285、E80814、W41、E30707和EA701205株均能產(chǎn)生AI-2分子,但產(chǎn)生的AI-2均低于陽(yáng)性菌BB152; E285在遲緩期、對(duì)數(shù)前期基本沒(méi)有AI-2的表達(dá),從對(duì)數(shù)中期開(kāi)始AI-2開(kāi)始大量表達(dá),到對(duì)數(shù)后期達(dá)到頂峰,是陰性對(duì)照的12倍,隨后下降,到穩(wěn)定期已下降為陰性對(duì)照的3. 6倍。當(dāng)培養(yǎng)基中添加蔗糖、麥芽糖、葡萄糖、甘露醇、Na Cl及乳糖時(shí),AI-2的活性均明顯提高。實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示,E285在不同生長(zhǎng)期和不同培養(yǎng)條件時(shí),其AI-2活性的高低與lux S基因轉(zhuǎn)錄水平一致,但與pfs基因的轉(zhuǎn)錄沒(méi)有明顯關(guān)系。提示奶牛隱性乳房炎致病性大腸桿菌分離株均能產(chǎn)生AI-2分子,其AI-2活性與lux S基因轉(zhuǎn)錄水平具有高度的相關(guān)性,與pfs基因... 

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 菌種
    1.2 主要試劑
    1.3 方法
        1.3.1 奶牛隱性乳房炎中大腸桿菌信號(hào)分子AI-2的制備
        1.3.2 哈維弧菌BB170的培養(yǎng)
        1.3.4 檢測(cè)奶牛隱性乳房炎的大腸桿菌不同生長(zhǎng)時(shí)期AI-2的表達(dá)
        1.3.5 不同培養(yǎng)條件奶牛隱性乳房炎大腸桿菌的AI-2的活性檢測(cè)
        1.3.6 pfs和LuxS mRNA的水平檢測(cè)
            1.3.6. 1 引物設(shè)計(jì)
            1.3.6. 2 細(xì)菌總RNA的提取
            1.3.6. 4 Real-time PCR法檢測(cè)mRNA轉(zhuǎn)錄水平
2 結(jié)果
    2.1 不同的奶牛隱性乳房炎大腸桿菌AI-2的檢測(cè)
    2.2 不同生長(zhǎng)時(shí)期E285株AI-2檢測(cè)
    2.3 檢測(cè)不同培養(yǎng)條件下奶牛隱性乳房炎大腸桿菌AI-2產(chǎn)生
    2.4 奶牛隱性乳房炎大腸桿菌E285株不同生長(zhǎng)時(shí)期lux S與pfs mRNA的檢測(cè)
    2.5 E285株不同培養(yǎng)條件下luxS基因和pfs基因mRNA的分析
3討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]影響禽致病性大腸桿菌信號(hào)分子AI-2產(chǎn)生的因素分析[J]. 白灝,韓先干,劉蕾,祁克宗,劉海文,丁鏟,于圣青.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(15)
[2]LuxS/AI-2對(duì)傷寒沙門菌基因表達(dá)的調(diào)節(jié)[J]. 羅哲,王敏,杜鴻,王菲,孟彥辰,倪斌,徐順高,黃新祥.  江蘇大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2011(01)

碩士論文
[1]密度感應(yīng)系統(tǒng)對(duì)弗氏志賀菌生長(zhǎng)競(jìng)爭(zhēng)能力的影響[D]. 徐蘋(píng).上海海洋大學(xué) 2015



本文編號(hào)：3703340