傳染性支氣管炎（IB）是由傳染性支氣管炎病毒（IBV）引起的急性、高度接觸性傳染病,給世界范圍內(nèi)養(yǎng)雞業(yè)帶來(lái)巨大經(jīng)濟(jì)損失。本研究制備了血凝抑制（HI）試驗(yàn)抗原,建立了檢測(cè)IBV抗體的HI試驗(yàn)方法；對(duì)分離的IBV流行毒株（LH株）進(jìn)行了全面鑒定,并研制了IB-新城疫（ND）-傳染性法氏囊�。↖BD）-減蛋綜合癥（EDS）-禽流感（AI）五聯(lián)滅活疫苗。1檢測(cè)IBV抗體的HI試驗(yàn)抗原制備本研究比較了三種濃縮IBV方法（超速離心法、PEG沉淀法和PEG透析法）和三種酶（A型產(chǎn)氣莢膜梭菌培養(yǎng)濾液、Ⅰ型卵磷脂酶C和神經(jīng)氨酸酶）對(duì)制備HI試驗(yàn)抗原的影響。最后確定最佳方法為：將IBV（M41株）接種于10日齡SPF雞胚,37℃孵化36h,收獲尿囊液經(jīng)4000g離心30min,將上清再次以25000g離心70min。濃縮的病毒液加入終濃度為3U/mL的PLC1,37℃孵育2h,制備的HI試驗(yàn)抗原具有較高的特異性,建立的HI試驗(yàn)方法可以用于檢測(cè)IBV HI抗體。2IB-ND-IBD-EDS-AI五聯(lián)滅活疫苗的研制本研究對(duì)IBV（LH株）種毒進(jìn)行了鑒定,將毒株在雞胚中連續(xù)傳10代,測(cè)得P1、P5和P10代的病... 

【文章頁(yè)數(shù)】：54 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
符號(hào)說(shuō)明
文獻(xiàn)綜述
第一章 檢驗(yàn)傳染性支氣管炎病毒血凝抑制抗體方法的建立
    1 材料
        1.1 菌種和毒種
        1.2 雞胚、陽(yáng)性血清和抗原
        1.3 試劑
        1.4 儀器及耗材
    2 IBV HI試驗(yàn)抗原的制備
        2.1 IBV的濃縮
        2.2 A型產(chǎn)氣莢膜梭菌上清的制備
        2.3 不同酶處理IBV后HA效價(jià)的比較
        2.4 IBV HA和HI試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作步驟
        2.5 IBV HI試驗(yàn)抗原的特異性檢測(cè)
    3 結(jié)果
    4 討論
第二章 IB-ND-IBD-EDS-AI五聯(lián)滅活疫苗的研制
    1 材料
        1.1 疫苗和毒株
        1.2 檢測(cè)抗原和試劑盒
        1.3 雞胚和雞
        1.4 培養(yǎng)基和普通化學(xué)試劑
        1.5 儀器
    2 方法
        2.1 IBV(LH株)種毒的鑒定
        2.2 五聯(lián)滅活疫苗的制備
        2.3 五聯(lián)滅活疫苗的質(zhì)量檢驗(yàn)
    3 結(jié)果
    4 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]表達(dá)雞傳染性支氣管炎病毒S基因的重組新城疫病毒構(gòu)建[J]. 焦利紅,葛金英,王琪,馬文芝,步志高.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2010(05)
[2]雞傳染性支氣管炎重組雞痘病毒基因工程疫苗對(duì)異源LTJ95Ⅰ株病毒攻擊的免疫保護(hù)[J]. 石星明,王玫,王云峰,楊桂花,孫鵬,李繼松,曾偉偉,劉勝旺.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2009(03)
[3]多表位疫苗的構(gòu)建策略及其在動(dòng)物疫苗中的應(yīng)用[J]. 張有峰,王紅寧,黃勇,陽(yáng)泰.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào). 2008(02)
[4]應(yīng)用不連續(xù)密度梯度離心純化禽傳染性支氣管炎冠狀病毒[J]. 陳萍,王紅寧,胡慧瓊,黃勇,柳萍.  中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2007(07)
[5]雞傳染性支氣管炎病毒血凝抑制試驗(yàn)研究[J]. 侯繼波,何家惠,惠艷華,于漾,王秀花,鄧碧華.  中國(guó)家禽. 2007(01)
[6]表達(dá)傳染性支氣管炎病毒S1基因重組雞痘病毒的構(gòu)建[J]. 田占成,孫永科,王云峰,智海東,劉勝旺,王玫,童光志.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2006(04)
[7]雞傳染性支氣管炎ELISA抗體檢測(cè)試劑盒的研制[J]. 王君瑋,尹燕博,劉清河,郭福生,孫淑芳,趙德明,王志亮.  中國(guó)動(dòng)物檢疫. 2004(03)
[8]利用IBV重組N蛋白建立ELISA抗體檢測(cè)試劑盒的研究[J]. 王宏俊,陳福勇.  中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2003(09)
[9]雞傳染性支氣管炎病毒H株纖突蛋白S1基因的克隆及其在畢赤酵母中表達(dá)[J]. 黃亞?wèn)|,鄭青,李校堃,王林川,趙振芬,黃自然.  病毒學(xué)報(bào). 2003(02)
[10]影響雞IBV血凝因素及HI試驗(yàn)抗原制備的研究[J]. 舒黛廉,趙余放,楊增歧,康佐文.  中獸醫(yī)學(xué)雜志. 2003(03)

碩士論文
[1]雞傳染性支氣管炎病毒（M41株）血凝抑制試驗(yàn)抗原的研制及應(yīng)用[D]. 張兵.中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所 2008
[2]IBV分離株的生物學(xué)特性鑒定及其流行病學(xué)分析[D]. 吳培培.揚(yáng)州大學(xué) 2008
[3]雞傳染性支氣管炎血凝抑制（HI）試驗(yàn)的研究和應(yīng)用[D]. 張建武.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2002



本文編號(hào)：3652323