G蛋白偶聯(lián)受體在飛蝗卵黃生成與卵母細(xì)胞成熟過程中的功能鑒定
發(fā)布時(shí)間:2024-05-19 08:06
昆蟲具有極強(qiáng)的繁殖能力,卵黃生成和卵母細(xì)胞成熟是昆蟲產(chǎn)卵并保障胚胎正常發(fā)育的基礎(chǔ)。在很多昆蟲中,卵黃原蛋白(vitellogenin,Vg)在脂肪體中合成,通過血淋巴運(yùn)輸?shù)铰殉?被發(fā)育中的卵母細(xì)胞攝取,從而促進(jìn)卵的成熟,這一過程受保幼激素(juvenile hormone,JH)調(diào)控,但其中的分子調(diào)控機(jī)制并不清楚。飛蝗(Locusta migratoria)是研究JH調(diào)控昆蟲生殖機(jī)制的一個(gè)理想模式,一方面飛蝗是不完全變態(tài)昆蟲的一個(gè)代表,其卵巢為無滋式,它的卵黃生成和卵母細(xì)胞成熟都由JH調(diào)控;另一方面,飛蝗的強(qiáng)大生殖力是蝗災(zāi)形成的一個(gè)重要因素。G蛋白偶聯(lián)受體(G protein-coupled receptor,GPCR)是真核生物體內(nèi)最大的膜受體家族,參與調(diào)節(jié)機(jī)體許多關(guān)鍵的生理生化進(jìn)程,因其廣泛而多樣的生物學(xué)功能,GPCR成為潛在的害蟲防治靶標(biāo)。昆蟲GPCR可分為四個(gè)亞家族:A亞家族是類視紫紅質(zhì)受體,B亞家族是分泌素受體,C亞家族是代謝型谷氨酸受體,D亞家族是非典型性受體。有研究報(bào)道,昆蟲的發(fā)育、繁殖和行為等都會(huì)受到GPCR的調(diào)控,但機(jī)制并不明確。因此,解析GPCR在卵黃生成與卵母細(xì)胞...
【文章頁數(shù)】:57 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
1.1 昆蟲G蛋白偶聯(lián)受體
1.1.1 家族A:Rhodopsin-like受體
1.1.2 家族B:Secretin-like受體
1.1.3 家族C:代謝型谷氨酸受體和GABAB受體
1.1.4 家族D:非典型性受體
1.2 昆蟲G蛋白偶聯(lián)受體的應(yīng)用
1.3 昆蟲卵黃生成與卵母細(xì)胞成熟背景
第二章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料和試劑設(shè)備
2.1.1 材料
2.1.2 試劑
2.1.3 儀器
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 飛蝗卵巢總RNA提取
2.2.2 飛蝗卵巢總cDNA合成
2.2.3 雙鏈RNA制備
2.2.4 雌蟲RNA干擾
2.2.5 樣品收集
2.2.6 實(shí)時(shí)定量PCR
2.2.7 卵巢及卵小管表型觀察
2.2.8 蛋白質(zhì)免疫印跡(western blot)
2.2.9 patency形態(tài)觀察
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 NmUR1,Mthl1,GPR124,Lphn3,OrphanR-CRNAi抑制脂肪體中的Vg合成
3.2 Mthl14 RNAi阻礙Vg向血淋巴分泌
3.3 GPR64 RNAi干擾卵母細(xì)胞吸收Vg
3.4 GPR143 RNAi阻礙卵母細(xì)胞成熟
3.5 Mth2 RNAi未對卵母細(xì)胞成熟有顯著作用
3.6 Mthl5和Mth15l功能有待進(jìn)一步研究
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號(hào):3977835
【文章頁數(shù)】:57 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
1.1 昆蟲G蛋白偶聯(lián)受體
1.1.1 家族A:Rhodopsin-like受體
1.1.2 家族B:Secretin-like受體
1.1.3 家族C:代謝型谷氨酸受體和GABAB受體
1.1.4 家族D:非典型性受體
1.2 昆蟲G蛋白偶聯(lián)受體的應(yīng)用
1.3 昆蟲卵黃生成與卵母細(xì)胞成熟背景
第二章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料和試劑設(shè)備
2.1.1 材料
2.1.2 試劑
2.1.3 儀器
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 飛蝗卵巢總RNA提取
2.2.2 飛蝗卵巢總cDNA合成
2.2.3 雙鏈RNA制備
2.2.4 雌蟲RNA干擾
2.2.5 樣品收集
2.2.6 實(shí)時(shí)定量PCR
2.2.7 卵巢及卵小管表型觀察
2.2.8 蛋白質(zhì)免疫印跡(western blot)
2.2.9 patency形態(tài)觀察
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 NmUR1,Mthl1,GPR124,Lphn3,OrphanR-CRNAi抑制脂肪體中的Vg合成
3.2 Mthl14 RNAi阻礙Vg向血淋巴分泌
3.3 GPR64 RNAi干擾卵母細(xì)胞吸收Vg
3.4 GPR143 RNAi阻礙卵母細(xì)胞成熟
3.5 Mth2 RNAi未對卵母細(xì)胞成熟有顯著作用
3.6 Mthl5和Mth15l功能有待進(jìn)一步研究
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號(hào):3977835
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