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石灰性土壤解磷細(xì)菌分子鑒定與解磷能力及機(jī)理初探

發(fā)布時(shí)間:2024-05-11 08:08
  【目的】探究北方石灰性土壤作物根際解磷細(xì)菌種類(lèi)、解磷能力及解磷機(jī)制,以期篩選出高效穩(wěn)定的解磷菌株,為制作土壤解磷活性強(qiáng)的生物磷肥提供良好菌株,進(jìn)而在石灰性土壤上實(shí)現(xiàn)以PSB(解磷細(xì)菌Phosphate-solubilizing bacteria)替代磷肥、降低磷肥用量、提高作物產(chǎn)量、降低面源污染的目的。 【方法】采集陜西楊凌地區(qū)葡萄、獼猴桃、白菜根際土,在無(wú)機(jī)磷和有機(jī)磷細(xì)菌培養(yǎng)基上采用稀釋涂布法分離解磷細(xì)菌。選取平板上菌落周?chē)忻黠@透明圈(即解磷圈)的菌落進(jìn)行傳代培養(yǎng),傳代三次后,若其D/d(D解磷圈直徑,d菌落直徑)值大于2,視其為高效穩(wěn)定的PSB菌株;然后進(jìn)行革蘭氏染色觀察細(xì)菌形態(tài);根據(jù)伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊(cè),測(cè)定各菌株的部分生理生化性質(zhì),對(duì)其進(jìn)行初步的分類(lèi)鑒定;然后用簡(jiǎn)并引物擴(kuò)增這些菌株16S rRNA基因一個(gè)長(zhǎng)度約1460bp的片段,測(cè)序后在Genbank網(wǎng)站上對(duì)其進(jìn)行序列比對(duì)分析,選擇相似性較高的典型菌株的序列,再用Clustal X進(jìn)行多序列比對(duì),最后用MEGA5.1軟件中的Neighbor-joining(NJ) Algorithm方法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù),用Bootstrap對(duì)系...

【文章頁(yè)數(shù)】:40 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.解磷細(xì)菌在蒙吉娜及無(wú)機(jī)解磷培養(yǎng)基中的溶磷圈

圖1.解磷細(xì)菌在蒙吉娜及無(wú)機(jī)解磷培養(yǎng)基中的溶磷圈

圖1.解磷細(xì)菌在蒙吉娜及無(wú)機(jī)解磷培養(yǎng)基中的溶磷圈Figure1.Phosphate-solubilizingzonesonplatesproducedbyPSBWY1....


圖2解磷細(xì)菌革蘭氏染色結(jié)果

圖2解磷細(xì)菌革蘭氏染色結(jié)果

磷細(xì)菌在蒙吉娜及無(wú)機(jī)解磷培養(yǎng)基中的溶磷圈osphate-solubilizingzonesonplatesproducedbyPSB組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著性分析。有機(jī)磷,又能溶解無(wú)機(jī)磷,記作WY1,WY2,Y表示)。如圖1所示。


圖3.菌株WY2,WY3,WY4,W1,W2,W3,W4的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)

圖3.菌株WY2,WY3,WY4,W1,W2,W3,W4的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)

中獲得10株菌的accessionNo.(序列號(hào))分別是WY1:KF641919;WY2:KF6WY3:KF641918;WY4:KF641921;W1:KF641923;W2:KF641924;W3:KF6W4:KF641926;Y1:KF641927;Y2:KF....


圖4.菌株WY1的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)

圖4.菌株WY1的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)

獲得10株菌的accessionNo.(序列號(hào))分別是WY1:KF641919;WY2:KF641Y3:KF641918;WY4:KF641921;W1:KF641923;W2:KF641924;W3:KF6414:KF641926;Y1:KF641927;Y2:K....



本文編號(hào):3969769

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