近年來,隨著獸用抗生素在集約化畜禽養(yǎng)殖業(yè)上使用量的日漸上升,使得抗生素污染日益嚴(yán)重,而耐藥菌及耐藥基因的出現(xiàn)更使得人們愈來愈聚焦于這一新興的污染物。本研究以多耐藥菌及耐藥基因?yàn)檠芯繉ο?調(diào)查規(guī)�；笄蒺B(yǎng)殖糞污中多耐藥菌的污染狀況,解析養(yǎng)殖糞污中主要耐藥整合子的結(jié)構(gòu)組成,分析高溫好氧堆肥過程對養(yǎng)殖糞污中多耐藥菌及其整合子的去除規(guī)律,為更好的控制養(yǎng)殖來源耐藥基因在環(huán)境內(nèi)的橫向轉(zhuǎn)移提供理論基礎(chǔ)和數(shù)據(jù)支撐。主要結(jié)論如下:首先,本研究選取12個典型養(yǎng)殖場及其糞污堆肥廠,采集新鮮糞污和有機(jī)肥成品樣品,通過添加8種抗生素培養(yǎng)多重耐藥菌,并分析不同糞肥來源的多耐藥菌的豐度及其多樣性的差異。細(xì)菌計(jì)數(shù)結(jié)果表明:對于抗四環(huán)素、恩諾沙星、磺胺甲惡唑和泰樂菌素(A類),以及抗氟苯尼考、氨芐西林、頭孢噻呋及粘桿菌素(B類)的兩類多重耐藥菌污染狀況(絕對數(shù)量和相對數(shù)量)排序均為雞糞>豬糞>牛糞,糞源有機(jī)肥中可培養(yǎng)的多重耐藥菌的絕對數(shù)量和相對數(shù)量均有所下降,說明堆肥是一種控制多重耐藥細(xì)菌的有效手段�；�16S rDNA序列擴(kuò)增子測序的細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)分析表明:不同抗生素的多耐藥菌群的多樣性也有所不同,在α多樣...

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 研究背景
        1.1.1 抗生素污染現(xiàn)狀
        1.1.2 耐藥菌及耐藥基因
        1.1.3 整合子的研究進(jìn)展
        1.1.4 質(zhì)粒的研究進(jìn)展
        1.1.5 堆肥對抗生素污染的研究進(jìn)展
    1.2 研究的目的及意義
    1.3 研究內(nèi)容
2 實(shí)驗(yàn)材料與分析方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 儀器與設(shè)備
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 抗生素溶液的配制
        2.2.2 樣品的來源及采集
        2.2.3 培養(yǎng)基的配制
        2.2.4 多重耐藥菌的分離、計(jì)數(shù)和篩選
        2.2.5 多重耐藥菌菌群的鑒定
        2.2.6 多重耐藥菌的分子鑒定
        2.2.7 藥敏試驗(yàn)
        2.2.8 耐藥整合子的擴(kuò)增
        2.2.9 質(zhì)粒提取及檢測
        2.2.10 特異性引物設(shè)計(jì)
        2.2.11 堆肥實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
    2.3 數(shù)據(jù)整理及計(jì)算方法
        2.3.1 糞肥中多耐藥菌的濃度
        2.3.2 耐藥菌占總菌數(shù)的比例
        2.3.3 基因拷貝數(shù)
        2.3.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
3 規(guī)�；笄菁S便堆肥廠的多重耐藥細(xì)菌污染特征調(diào)查
    3.1 可培養(yǎng)多重耐藥菌污染概況
        3.1.1 可培養(yǎng)的A類多耐藥菌計(jì)數(shù)分析
        3.1.2 可培養(yǎng)的B類多耐藥菌計(jì)數(shù)分析
        3.1.3 可培養(yǎng)耐藥菌多樣性的分析
        3.1.4 可培養(yǎng)耐藥菌群落結(jié)構(gòu)解析
    3.2 本章小結(jié)
4 多重耐藥菌中耐藥整合子結(jié)構(gòu)解析
    4.1 禽畜糞便中多重耐藥菌分離與鑒定
        4.1.1 A類多重耐藥菌分離及鑒定
        4.1.2 B類多重耐藥菌分離及鑒定
    4.2 分離菌株的耐藥性特征
        4.2.1 A類多耐藥菌的耐藥性分析
        4.2.2 B類多耐藥菌的耐藥性分析
    4.3 多重耐藥菌的整合子構(gòu)成分析
    4.4 本章小結(jié)
5 高溫堆肥中典型耐藥整合子的變化規(guī)律解析
    5.1 耐藥菌株的質(zhì)粒獲取及結(jié)構(gòu)解析
    5.2 耐藥基因引物特異性驗(yàn)證
    5.3 高溫堆肥對多耐藥菌及耐藥基因的去除規(guī)律探究
        5.3.1 高溫堆肥過程中可培養(yǎng)耐藥菌的豐度變化
        5.3.2 高溫堆肥過程中耐藥基因的豐度變化
    5.4 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝



本文編號：3969434