21世紀(jì)以來(lái),生物防治在農(nóng)業(yè)系統(tǒng)發(fā)揮著越來(lái)重要的作用,巴氏新小綏螨Neoseiulus barkeri因其發(fā)育歷期短,捕食種類多,種群繁殖力強(qiáng)和擴(kuò)散能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),成為一類極具應(yīng)用前景、可用來(lái)防治害螨和小型農(nóng)業(yè)吸汁性害蟲(chóng)的重要生防因子。隨著全球氣候的變暖,螨類作為一種變溫動(dòng)物,對(duì)溫度極其敏感,因此高溫也成為制約捕食螨在農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)中持續(xù)控制害螨、發(fā)揮其生物防治效能的非生物因素。為了提升巴氏新小綏螨N.barkeri在田間的生物效能,本課題組通過(guò)高溫鍛煉?cǎi)Z化篩選出明顯具有溫度可塑性和適應(yīng)性的巴氏新小綏螨N.barkeri耐高溫品系,已有的研究表明其對(duì)高溫脅迫的承受能力顯著增強(qiáng)。本研究著眼于巴氏新小綏螨N.barkeri生態(tài)適應(yīng)性機(jī)制,從表觀遺傳學(xué)的角度研究高溫脅迫處理下,兩種溫度品系雌成螨及各世代之間的DNA甲基化水平差異;在此基礎(chǔ)上篩選克隆了Nb Dnmt1基因,并對(duì)其m RNA表達(dá)模式進(jìn)行分析,最后采用RNAi技術(shù)對(duì)該基因的溫度耐受性功能進(jìn)行了驗(yàn)證。本研究所獲得的主要研究結(jié)果如下:1.42°C高溫脅迫處理巴氏新小綏螨N.barkeri兩種溫度品系雌成螨,測(cè)定其全基因組甲基化水平。結(jié)果顯... 

【文章來(lái)源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

自然界中DNA甲基化類型[16]

（A）高溫脅迫巴氏新小綏螨雌成螨的全基因組甲基化水平分析；（B）高溫脅迫不同世代巴氏新小綏螨雌成螨的全基因組甲基化水平分析

西南大學(xué)碩士學(xué)位論文26品系之間的表達(dá)量差異性比較分析采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)（Student’st-test）表示數(shù)據(jù)。所有柱形圖均使用OriginPro9.0制作完成。2結(jié)果與分析2.1巴氏新小綏螨Dnmt1基因克隆及生物信息學(xué)分析基于巴氏新小綏螨N.barkeri轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫(kù)，通過(guò)RT–PCR技術(shù)成功克隆獲得1條DNA甲基轉(zhuǎn)移酶基因cDNA全長(zhǎng)，將其命名為NbDnmt1，登錄號(hào)為MK077804。NbDnmt1開(kāi)放閱讀框（ORF）全長(zhǎng)1377bp，編碼458個(gè)氨基酸，NbDnmt1的相對(duì)分子量大小為60.71kDa，等電點(diǎn)為9.42，親水性平均系數(shù)（Grandaverageofhydropathicity，GRAVY）值為-0.861，為親水性蛋白。將NbDnmt1基因的氨基酸序列提交到NCBI庫(kù)分析比對(duì)發(fā)現(xiàn)其與西方靜走螨（Galendromusoccidentalis）的Dnmt1序列一致性高達(dá)95%。將其序列與西方靜走螨（Goccidentalis）；小蜂螨（Tropilaelapsmercedesae）；瓦螨（Varroadestructor）的Dnmt1序列通過(guò)DNAMAN軟件比對(duì)，序列相似度均高達(dá)90%以上，這表明蜱螨目螨類的Dnmt1具有高度的一致性（圖3.1）。圖3.1巴氏新小綏螨與其他物種Dnmt1多重序列比對(duì)（保守區(qū)域用藍(lán)色方框標(biāo)出）Figure3.1MultiplealignmentofthededucedaminoacidsequenceoftheNbDnmt1withotherspecies.（Thewell–conservedregionswereunderlinedwithbluebox）2.2巴氏新小綏螨Dnmt1基因同源性分析將NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)搜索昆蟲(chóng)綱其他物種Dnmt1的氨基酸序列，與本研究所得的巴氏新小綏螨N.barkeriDnmt1推導(dǎo)氨基酸序列采用MEGA6.0軟件NJ(Neighbor-

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]動(dòng)物溫度依賴型性別決定中的表觀遺傳學(xué)機(jī)制[J]. 滑留帥,茹文秀,白獻(xiàn)曉,龔世平.  河南畜牧獸醫(yī)(綜合版). 2016 (09)
[2]捕食螨繁育與應(yīng)用[J]. 徐學(xué)農(nóng),呂佳樂(lè),王恩東.  中國(guó)生物防治學(xué)報(bào). 2015(05)
[3]高溫對(duì)二化螟實(shí)驗(yàn)種群生長(zhǎng)、存活和繁殖的影響[J]. 羅舉,張孝羲,翟保平,郭玉人,朱建華.  生態(tài)學(xué)報(bào). 2005(04)
[4]變溫變濕對(duì)智利小植綏螨發(fā)育和存活的影響[J]. 郭玉杰,董慧芳.  生物防治通報(bào). 1987(01)

博士論文
[1]巴氏新小綏螨高溫品系篩選及其適應(yīng)性機(jī)制研究[D]. 張國(guó)豪.西南大學(xué) 2017

碩士論文
[1]溫度誘導(dǎo)煙粉虱DNA甲基化的特征和Dnmt1基因溫度耐受性功能的鑒定[D]. 戴恬美.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2015
[2]褐飛虱Dnmt3及翅發(fā)育相關(guān)基因的表達(dá)和功能分析[D]. 李瑤.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[3]柑橘全爪螨幾丁質(zhì)合成與代謝途徑重要基因的研究[D]. 夏文凱.西南大學(xué) 2015
[4]擬南芥溫度脅迫和紅光響應(yīng)基因XCT表觀遺傳機(jī)理探究[D]. 王玉晗.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014



本文編號(hào)：3452022