【摘要】：吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯都屬于甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑,具有良好的保護、治療、滲透作用,具有毒性低、廣譜、安全、高效的特點,有很好的環(huán)境相容性。農(nóng)藥施用后灑落到土壤中會對土壤中的微生物和土壤酶產(chǎn)生一定的影響,通過測定農(nóng)藥對土壤微生物和酶活性的影響可以在一定程度上反應(yīng)該農(nóng)藥的生態(tài)環(huán)境安全性。污染物引起酶活性降低的機理可能是與酶復(fù)合,也可能是抑制微生物增殖從而間接影響酶活性。酶抑制劑的作用方式可以分為兩類:可逆抑制和不可逆抑制。本實驗研究了吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯兩種殺菌劑對潮土中土壤微生物數(shù)量和土壤酶活性的影響。利用平板計數(shù)研究了兩種農(nóng)藥對細菌、真菌和放線菌數(shù)量的影響,測定了其對脲酶,脫氫酶,β-葡萄糖苷酶活性影響。兩種農(nóng)藥的染毒濃度均設(shè)定為0.1 mg/kg、1.0 mg/kg、2.5 mg/kg,并設(shè)置了溶劑丙酮為對照,染毒后土樣于花盆中放置在培養(yǎng)箱中培養(yǎng),定期補水維持土壤含水率為田間最大持水量的60%,在第7、14、21、28、48 d時取樣進行測定。實驗結(jié)果如下:吡唑醚菌酯對細菌和放線菌數(shù)量在實驗過程中均表現(xiàn)為抑制作用,吡唑醚菌酯對真菌數(shù)量的影響初期表現(xiàn)為激活作用,然后主要表現(xiàn)為抑制且隨濃度升高真菌數(shù)量逐漸降低。氟嘧菌酯對細菌數(shù)量基本為抑制作用,而14 d時有激活作用且隨濃度升高越來越強;氟嘧菌酯對真菌數(shù)量的作用效果均為抑制,初期抑制作用最強且隨濃度升高抑制作用逐漸加強,以后抑制作用逐漸減弱;氟嘧菌酯對放線菌數(shù)量在實驗初期均表現(xiàn)為抑制作用,且隨濃度升高抑制作用逐漸加強,但0.1 mg/kg的處理組隨后表現(xiàn)為激活作用。吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯主要防治真菌病害,氟嘧菌酯對真菌數(shù)量的抑制作用更為迅速,且對細菌和放線菌數(shù)量的影響較小,更能體現(xiàn)高效性和環(huán)境友好性。吡唑醚菌酯對脲酶在初期產(chǎn)生激活作用,0.1 mg/kg最為顯著;吡唑醚菌酯對脫氫酶的影響基本表現(xiàn)為抑制,吡唑醚菌酯對β-葡萄糖苷酶影響實驗中表現(xiàn)為先降低后升高的趨勢。對氟嘧菌酯和吡唑醚菌酯對土壤酶作用效果進行比較可以發(fā)現(xiàn),在氟嘧菌酯對脲酶的影響實驗中,0.1 mg/kg的處理組與吡唑醚菌酯不同,表現(xiàn)為先抑制后激活,其它處理組基本表現(xiàn)為抑制;氟嘧菌酯對脫氫酶的影響中,與吡唑醚菌酯類似,也是只有0.1 mg/kg的處理組出現(xiàn)了激活現(xiàn)象;氟嘧菌酯對β-葡萄糖苷酶的影響主要表現(xiàn)為抑制作用,只有0.1 mg/kg在21 d時表現(xiàn)為激活作用,與吡唑醚菌酯相比,氟嘧菌酯的抑制作用更明顯。
【學(xué)位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：S154;S482.2
【圖文】：

山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文5）氮的標準溶液：稱取 0.4717 g 硫酸銨溶解于水中然后稀釋至 1 L，得到L 的氮的儲備液；使用時再將氮的儲備液稀釋 5 倍和 10 倍（吸取 20、10 m至 100 mL）制成氮標液，濃度分別為 0.02 mg/mL、0.01 mg/mL，繪制標度稀釋。.2 標準曲線繪制別吸取 0.01 mg/mL 氮標液 1.0、3.0、5.0、7.0、9.0、11.0、15.0、17.0、1mL 的容量瓶中，吸取 0.02 mg/mL 氮標液 10.0、12.0、13.0 于 50 mL 的容定量的去離子水使其至 20 mL，后加入 4 mL 苯酚鈉溶液，并且立即加入 mL，搖勻，靜置顯色 20 min，再定容至 50 mL。用分光光度計在 578 nm此顏色在 1 h 內(nèi)可保持穩(wěn)定）。用 NH4-N 的濃度做橫坐標，吸光度值作縱標準曲線。

圖 4 土壤脫氫酶標準曲線Fig 4 The standard curve of soil dehydrogenase activity.3 樣品活性測定取約 5 g 土樣于 25 mL 比色管中，加入 5 mL 0.5%的 TTC 溶液，蓋塞輕輕均勻，然后置于 30℃的恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng) 24 h，注意控制光照條件為避光。次少量的加入 40 mL 甲醇，將比色管中的土樣全部移入三角瓶中，用封口蕩機上震蕩 1 h，轉(zhuǎn)速控制在 220 rpm，過濾。取濾液使用分光光度計于 吸光度值，測定時用甲醇作為空白。照實驗：在試管中加入 5 mL 三（羥甲基）氨基甲烷-鹽酸緩沖液代替土壤將試管與樣品控制相同條件，置于 30℃恒溫培養(yǎng)箱避光培養(yǎng) 24 h，培養(yǎng)結(jié)的加入 40 mL 甲醇，移入三角瓶中，之后用封口膜封口，置于振蕩機上以 h，然后過濾。取濾液使用分光光度計于 485 nm 處測定吸光度值，以甲醇

圖 5 土壤 β-葡萄糖苷酶標準曲線Fig. 5 Standard curve of soil β-glucosidase activity3 活性測定 1.0 g 土樣放于 25 mL 比色管中，加入 0.2 mL 的甲苯、4 mL pH 6.0 的通mL 的 PNG 溶液，混勻后塞上瓶塞，于 37℃的培養(yǎng)箱中避光培養(yǎng) 1h。結(jié)先配制好的 1 mL 的 0.5 mol/L 的 CaCl2和 4 mL 的 0.5 mol/L 的 NaOH 加，將濾液稀釋 5 倍，測定時取波長為 400 nm，所用儀器為紫外分光光度單位采用 PNP（對硝基苯）μg/(g·h)表示。做空白對照時，必須在培養(yǎng)結(jié)l2溶液和 NaOH 溶液之前加入底物 PNG 溶液。每個樣品均設(shè)置一個空白次重復(fù)。4 結(jié)果計算 1h 后 1 g 的土壤中所釋放出酚的質(zhì)量(μg)來表示土壤中 β-葡萄糖苷酶活性

【參考文獻】

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1 潘芳慧;張曉瑋;王友保;;施磷對吊蘭修復(fù)鎘污染土壤及土壤酶活性的影響[J];水土保持學(xué)報;2018年03期

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5 陳Z

本文編號：2767190