本文選題：FSH-肽 + LRR��； 參考：《新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)》2017年07期

【摘要】：【目的】卵泡刺激素(FSH)33-53肽可以與FSH受體(FSHR)結(jié)合,并激活下游信號(hào),被作為FSH功能肽。然而其在受體上的具體結(jié)合位置還不清楚。闡明FSH33-53肽在FSHR上的結(jié)合區(qū)域,為基于FSH的疫苗設(shè)計(jì)提供依據(jù)�！痉椒ā坎捎弥亟M的FSHR胞外區(qū)(ECD)和富含亮氨酸區(qū)(LRR)及合成的FSHR9-30區(qū)分析這些FSHR的功能區(qū)域與FSH33-53的結(jié)合作用。PCR擴(kuò)增得到h FSHR ECD和h FSHR LRR目的基因,構(gòu)建重組質(zhì)粒p ET22b-FSHR-ECD和p ET22b-FSHR-LRR,表達(dá)純化獲得蛋白FSHR-ECD和FSHR-LRR。采用多肽合成法獲得FSHR9-30-KLH。通過(guò)ELISA方法檢測(cè)受體片段與FSH33-53肽的結(jié)合和親和力�！窘Y(jié)果】獲得FSHR-ECD和FSHR-LRR蛋白,其相對(duì)分子質(zhì)量(Mr)分別為43和32k Da。在受體為0.5μg湓m L,配體為2.5μg湓m L時(shí),三種蛋白均與FSH33-53肽結(jié)合。ELISA檢測(cè)受體與配體的親和力分別為0.21×10~(-6)、0.45×10~(-6)和0.056×10~(-6)mol/L。【結(jié)論】FSHR 9-30片段與FSH33-53肽的結(jié)合較其它兩個(gè)片段結(jié)合力強(qiáng)。
[Abstract]:[objective] FSH 33-53 peptide can bind to FSH receptor FSHR and activate downstream signal, and be used as FSH functional peptide. However, the exact site of its binding to the receptor remains unclear. To elucidate the binding region of FSH33-53 peptides on FSHR, [methods] Recombinant FSHR extracellular region (ECD) and leucine-rich region (LRR) and synthetic FSHR9-30 region were used to analyze the binding of these FSHR functional regions to FSH33-53. [methods] h FSHR ECD and h FSHR LRR target genes were obtained by PCR amplification. The recombinant plasmids p ET22b-FSHR-ECD and pET22b-FSHR-LRR were constructed, and the protein FSHR-ECD and FSHR-LRR were purified. FSHR9-30-KLH was synthesized by polypeptide synthesis. The binding and affinity of the receptor fragments to FSH33-53 peptides were detected by ELISA method. [results] FSHR-ECD and FSHR-LRR proteins were obtained with relative molecular weight of 43 and 32 k Da. respectively. When the receptor was 0.5 渭 g / mL and the ligand was 2.5 渭 g / mL, the binding ability of the three proteins to FSH33-53 peptide was 0.21 脳 10 ~ (-6) and 0.056 脳 10 ~ (10) ~ (6) mol 路L ~ (-1), respectively. [conclusion] the binding ability of FSHR 9-30 fragment to FSH33-53 peptide was stronger than that of the other two fragments.
【作者單位】： 新疆大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院新疆生物資源基因工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目“抗卵泡刺激素受體納米抗體的制備及其在腫瘤分子顯像和抗血管治療中的作用”(81260333)~~
【分類(lèi)號(hào)】：Q78;R91

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本文編號(hào)：1889389