豬規(guī);D(zhuǎn)基因技術(shù)體系構(gòu)建及其應(yīng)用.pdf
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中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014,47 21 :4211-4223
Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2014.21.007 豬規(guī)模化轉(zhuǎn)基因技術(shù)體系構(gòu)建及其應(yīng)用 牟玉蓮,阮進(jìn)學(xué),吳添文,程 英,魏景亮,樊俊華,李 奎 (中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所,北京100193) 摘要:豬是重要的經(jīng)濟(jì)動(dòng)物,優(yōu)良豬種的培育對(duì)農(nóng)業(yè)的發(fā)展具有重要的作用。同時(shí),作為一種常用的試驗(yàn)動(dòng) 物,豬在解剖學(xué)、生理學(xué)、遺傳學(xué)等方面與人類高度相似,其在生命科學(xué)研究領(lǐng)域中也具有獨(dú)特的應(yīng)用價(jià)值。轉(zhuǎn) 基因技術(shù)可以運(yùn)用基因工程等實(shí)驗(yàn)技術(shù)手段,對(duì)動(dòng)物基因組進(jìn)行有目的的遺傳修飾,使修飾改造的基因穩(wěn)定遺傳 給后代,,從而獲得滿足人類特定需求的動(dòng)物個(gè)體。因此,豬規(guī);D(zhuǎn)基因技術(shù)體系的建立對(duì)轉(zhuǎn)基因育種、基因功 能研究和人類疾病模型研究等方面具有重要的意義。本文回顧了國(guó)內(nèi)外豬轉(zhuǎn)基因技術(shù)體系的研究進(jìn)展,總結(jié)了目 標(biāo)基因的選擇原則,介紹了原核顯微注射、體細(xì)胞核移植、鋅指核酸酶(Zinc-finger nucleases, ZFN)、轉(zhuǎn)錄激 活子樣效應(yīng)子核酸酶(Transcription activator-like effector nucleases, TALEN)和規(guī)律成簇間隔短回文重 復(fù)序列/ Cas9(Clustered regularly interspaced short palindromic repeat, CRISPR/Cas9)系統(tǒng)、精子載體 和逆轉(zhuǎn)錄病毒等各種目標(biāo)基因?qū)胧侄,并分析其?yōu)缺點(diǎn)和適用范圍,列舉了表達(dá)調(diào)控策略中常用的基因調(diào)控元 件和相關(guān)調(diào)控系統(tǒng)。近年來,隨著轉(zhuǎn)基因重大專項(xiàng)工作的推進(jìn),中國(guó)豬規(guī)模化轉(zhuǎn)基因技術(shù)研究取得長(zhǎng)足的發(fā)展: 發(fā)掘出大批功能基因;搭建了 ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9 介導(dǎo)的高效基因修飾技術(shù)平臺(tái)及其切割效率檢測(cè)平臺(tái); 對(duì)供體細(xì)胞的分離、培養(yǎng)和篩選流程進(jìn)行優(yōu)化;完善體細(xì)胞核移植和原核顯微注射體系平臺(tái),并與新型的基因組
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