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三種出血熱病毒的熒光基因芯片檢測(cè)方法的建立

發(fā)布時(shí)間:2017-09-01 00:31

  本文關(guān)鍵詞:三種出血熱病毒的熒光基因芯片檢測(cè)方法的建立


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【摘要】:為建立可同時(shí)檢測(cè)新疆出血熱病毒(CCHFV)、裂谷熱病毒(RVFV)、拉沙病毒(LSV)的熒光基因芯片,分別針對(duì)CCHFV和RVFV的S基因、LSV的NP基因,應(yīng)用生物學(xué)軟件設(shè)計(jì)了3對(duì)引物與6條探針。運(yùn)用多重PCR擴(kuò)增和標(biāo)記目的片段,將其與基因芯片雜交,最后掃描分析結(jié)果。分別對(duì)雜交溫度與雜交時(shí)間進(jìn)行條件優(yōu)化,最后對(duì)基因芯片的特異性、敏感性和重復(fù)性進(jìn)行評(píng)估。結(jié)果顯示,設(shè)計(jì)的所有探針都可以與目的片段特異性雜交,探針1a與1b可檢測(cè)到CCHFV,探針2a與2b可檢測(cè)到RVFV,探針3a與3b可檢測(cè)到LSV。相比多重PCR,熒光基因芯片檢測(cè)CCHFV的靈敏度提高了10倍,檢測(cè)RVFV的靈敏度提高了100倍,檢測(cè)LSV的靈敏度提高了100倍。結(jié)果表明,本試驗(yàn)建立的同時(shí)檢測(cè)3種出血熱病毒的熒光基因芯片檢測(cè)方法特異性高、敏感性強(qiáng),可用于這3種病毒的快速檢測(cè)與甄別。
【作者單位】: 廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事獸醫(yī)研究所;
【關(guān)鍵詞】新疆出血熱病毒 裂谷熱病毒 拉沙病毒 多重PCR 熒光基因芯片
【基金】:國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2010BAD04B02) 公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(201203082)
【分類號(hào)】:S852.65
【正文快照】: 克里米亞-剛果出血熱(Crimean-Congo hemor-rhagic fever,CCHF)又名新疆出血熱,是一種由克里米亞-剛果出血熱病毒(CCHFV)經(jīng)蜱傳播的烈性傳染病。該病毒是布尼亞病毒科、內(nèi)羅病毒屬的分節(jié)段單股負(fù)鏈RNA病毒。家畜是蜱的主要血緣動(dòng)物,人可以通過(guò)帶毒蜱叮咬或接觸感染的家畜而感

【相似文獻(xiàn)】

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3 郭啟新;液相基因芯片檢測(cè)食源性病原菌方法的研究[D];黑龍江大學(xué);2010年

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本文編號(hào):768873

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