發(fā)布時(shí)間：2017-08-29 14:00

  本文關(guān)鍵詞：番木瓜誘導(dǎo)型基因CpPGIP2啟動(dòng)子的克隆與分析

  更多相關(guān)文章： 番木瓜 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白 啟動(dòng)子 調(diào)控元件 載體構(gòu)建

【摘要】：【目的】獲得誘導(dǎo)型基因Cp PGIP2啟動(dòng)子,并分析該啟動(dòng)子的功能�！痉椒ā恳苑竟螩p PGIP2基因c DNA序列(HQ660394)搜索番木瓜基因組DNA序列,獲得一段約2 000 bp的5’端上游DNA序列(ABIM01005077),參照該序列設(shè)計(jì)PCR特異引物,以番木瓜葉片DNA為模板克隆該啟動(dòng)子,并進(jìn)行生物信息學(xué)分析。將3個(gè)啟動(dòng)子片段替換p CAMBIA1301載體中的Ca MV 35S啟動(dòng)子,構(gòu)建缺失啟動(dòng)子表達(dá)載體,以GUS瞬時(shí)表達(dá)檢測(cè)缺失啟動(dòng)子表達(dá)活性。【結(jié)果】獲得了Cp PGIP2起始密碼子上游長(zhǎng)為1 981 bp的調(diào)控序列,經(jīng)分析該序列含有真菌、脫落酸、赤霉素、光照等多種響應(yīng)元件,為誘導(dǎo)型啟動(dòng)子。構(gòu)建了1個(gè)啟動(dòng)子全長(zhǎng)表達(dá)載體和2個(gè)5’端缺失啟動(dòng)子表達(dá)載體,分別命名為p D0-1981、p D1-1204和p D2-261。啟動(dòng)子在番木瓜果肉中的瞬時(shí)表達(dá)顯示,長(zhǎng)度為1 204 bp的啟動(dòng)子表達(dá)活性最強(qiáng)。并且,該啟動(dòng)子在根、莖、葉、果肉和愈傷組織中均有不同程度的表達(dá),在近外果皮的果肉處和根部表達(dá)最明顯。【結(jié)論】本研究獲得了Cp PGIP2啟動(dòng)子序列,確定了表達(dá)活性最強(qiáng)的啟動(dòng)子長(zhǎng)度,初步分析了啟動(dòng)子的表達(dá)模式和順式作用元件,為進(jìn)一步深入研究Cp PGIP2基因功能以及將該啟動(dòng)子應(yīng)用于植物基因工程育種奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 福建農(nóng)林大學(xué)園藝學(xué)院·園藝植物遺傳育種研究所;
【關(guān)鍵詞】： 番木瓜 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白 啟動(dòng)子 調(diào)控元件 載體構(gòu)建
【基金】：福建農(nóng)林大學(xué)園藝學(xué)院青年學(xué)術(shù)骨干培養(yǎng)基金(FAFU2012YYPY05) 福建省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(2010J05048)
【分類號(hào)】：S667.9
【正文快照】： 1204 vector can also express GUS in the root,stem,leaf,and callus of the papaya.The expression in theroot and the fruit were higher than the other tissues.【Conclusion】With the availability of a number ofplant genome sequences,it has become relatively e

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 申艷紅;陳曉靜;李榮榮;盧秉國(guó);何瑋毅;;2個(gè)番木瓜多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因的克隆與分析[J];熱帶作物學(xué)報(bào);2011年05期

2 王瑩;韓烈保;曾會(huì)明;;高等植物啟動(dòng)子克隆方法的研究進(jìn)展[J];生物技術(shù)通報(bào);2007年03期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 蔣昌華;月季RcHSP17.8基因克隆與功能研究[D];復(fù)旦大學(xué);2008年

2 李燕;紫花苜蓿誘導(dǎo)表達(dá)啟動(dòng)子MsZPP的克隆及功能分析[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2012年

3 黃兆峰;田旋花對(duì)草甘膦耐藥性分子機(jī)制[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2014年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 齊春輝;韓烈保;梁小紅;曾會(huì)明;劉君;;以基因槍法轉(zhuǎn)化日本結(jié)縷草獲得轉(zhuǎn)基因植株[J];北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2006年03期

2 夏江東,夏平;高等植物啟動(dòng)子功能和結(jié)構(gòu)研究進(jìn)展[J];楚雄師范學(xué)院學(xué)報(bào);2005年03期

3 申艷紅;陳曉靜;;改良熱硼酸小量法提取番木瓜果肉總RNA[J];中國(guó)南方果樹(shù);2009年02期

4 申艷紅;陳曉靜;何瑋毅;盧秉國(guó);;番木瓜肌動(dòng)蛋白CpActin基因的克隆及其在果肉中的表達(dá)[J];果樹(shù)學(xué)報(bào);2010年06期

5 蔣浩,秦紅敏,田穎川,DeanW.Gabriel;楊樹(shù)皮儲(chǔ)藏蛋白基因啟動(dòng)子的克隆和功能研究[J];林業(yè)科學(xué);1999年05期

6 李增平;番木瓜果實(shí)腐爛病原菌、防腐及貯藏[J];熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué);2000年01期

7 李竹紅,劉德培,梁植權(quán);改進(jìn)的反向PCR技術(shù)克隆轉(zhuǎn)移基因的旁側(cè)序列[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;1999年06期

8 彭仁旺,周雪榮,周奕華,方榮祥,莽克強(qiáng);煙草花藥特異表達(dá)基因啟動(dòng)子的克隆及序列分析[J];生物工程學(xué)報(bào);1996年03期

9 李維,張義正;黃孢原毛平革菌基因啟動(dòng)子的分離與鑒定[J];生物工程學(xué)報(bào);2000年05期

10 皮燦輝,易自力,王志成;提高轉(zhuǎn)基因植物外源基因表達(dá)效率的途徑[J];中國(guó)生物工程雜志;2003年01期

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 郝迪，

本文編號(hào)：753643