樹舌靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白基因克隆,生物信息學(xué)分析及真核表達(dá)載體構(gòu)建
發(fā)布時間:2017-08-24 14:33
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【摘要】:樹舌靈芝(Ganoderma applanatum)為靈芝屬內(nèi)獨(dú)特的一類,克隆樹舌靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白(fungal immunomodulatory protein,FIP)基因,對其進(jìn)行生物信息學(xué)分析并構(gòu)建真核表達(dá)載體,將為高效表達(dá)重組樹舌靈芝FIP和揭示其生物學(xué)功能奠定基礎(chǔ)。采用染色體步移的方法從樹舌靈芝菌絲體基因組DNA中擴(kuò)增得到1個新型真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白基因—FIP-gap,對其核苷酸序列進(jìn)行生物信息學(xué)分析,結(jié)果表明,FIP-gap基因?qū)儆陟`芝屬FIP家族,含有342 bp,編碼113個氨基酸。對其氨基酸序列分析表明:樹舌靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白FIP-gap分子量為12.7 k D,理論等電點(diǎn)為4.93,富含絲氨酸,纈氨酸和蘇氨酸,不含組氨酸和半胱氨酸。另外將FIP-gap與其他靈芝屬FIP進(jìn)行蛋白質(zhì)序列比對分析,其具有FIP典型的保守序列,并與靈芝(G.lucidum)、松杉靈芝(G.tsugae)、紫靈芝(G.japoncium)、紫芝(G.sinensis)、小孢子靈芝(G.microsporum)和黑靈芝(G.atrum)具有78%、78%、78%、79%、78%和77%的同源性,為一新型的FIP。構(gòu)建靈芝屬真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白系統(tǒng)進(jìn)化樹,結(jié)果表明樹舌靈芝FIP-gap與其他靈芝屬FIP均不聚類,說明其與其他靈芝屬FIP的親緣性相對較遠(yuǎn)。同時,構(gòu)建了畢赤酵母重組表達(dá)載體p PIC9-FIP-gap,為進(jìn)一步研究FIP-gap的生物學(xué)功能提供基礎(chǔ),為全面了解真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白提供理論依據(jù)。
【作者單位】: 沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院;沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)生物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 樹舌靈芝 真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白 生物信息學(xué)分析 染色體步移 基因克隆 真核表達(dá)
【基金】:中國博士后科學(xué)基金項(xiàng)目(2013M541251)
【分類號】:S567.31
【正文快照】: 樹舌靈芝屬于靈芝屬(Ganoderma),多孔菌目(Polyporus),擔(dān)子菌綱(Basidiomycetes),俗稱扁靈芝,老牛肝,是一種重要的大型藥用真菌[1]。樹舌靈芝具有和靈芝相似的功能藥效,如提高機(jī)體免疫力和抗腫瘤等,而在某些生物學(xué)功能上例如提高記憶力甚至優(yōu)于靈芝[2]。當(dāng)前對樹舌靈芝的開發(fā)
【相似文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 李忠譜;野生活樹樹舌與栽培靈芝藥效比較研究[J];中國食用菌;1994年02期
2 劉中華;侯小歌;裴文亮;呂瑞峰;杜虎軍;;樹舌靈芝發(fā)酵特性的研究[J];中國釀造;2010年10期
3 黃達(dá)明;李欣;黃,
本文編號:731845
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