本文關(guān)鍵詞：沉默ESRP1基因表達(dá)對(duì)卵巢癌OVCAR5細(xì)胞中FGFR2亞型轉(zhuǎn)化的影響

  更多相關(guān)文章： 卵巢腫瘤 上皮剪接調(diào)節(jié)蛋白 受體 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 型 上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化

【摘要】：目的 :研究沉默上皮剪接調(diào)節(jié)蛋白(1epithelial splicing regulatory protein 1,ESRP1)基因表達(dá)對(duì)卵巢癌OVCAR5細(xì)胞中成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2(fibroblast growth factor receptor 2,FGFR2)亞型轉(zhuǎn)換的影響。方法:構(gòu)建靶向ESRP1基因的ESRP1-sh RNA慢病毒表達(dá)載體(p LVTHM/ESRP1-sh RNA1和p LVTHM/ESRP1-sh RNA2),同時(shí)設(shè)置陰性對(duì)照(negative control,NC)質(zhì)粒(p LVTHM/NC-sh RNA);將3種質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染到293T細(xì)胞中制備慢病毒。慢病毒感染卵巢癌OVCAR5細(xì)胞后,分別采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR及蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)ESRP1 m RNA及蛋白的表達(dá)水平;采用限制性內(nèi)切酶AvaⅠ和Hin CⅡ檢測(cè)沉默ESRP1基因后對(duì)FGFR2亞型轉(zhuǎn)換的影響;MTT法檢測(cè)沉默ESRP1基因后對(duì)OVCAR5細(xì)胞增殖的影響;蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)上皮標(biāo)志物E-鈣黏蛋白(E-cadherin)、間質(zhì)標(biāo)志物N-鈣黏蛋白(N-cadherin)及β-鏈蛋白(β-catenin)表達(dá)的變化。結(jié)果:成功構(gòu)建靶向ESRP1基因的sh RNA慢病毒表達(dá)載體并包裝獲得慢病毒;與陰性對(duì)照組比較,靶向ESRP1基因的sh RNA能明顯抑制OVCAR5細(xì)胞中ESRP1 m RNA及蛋白的表達(dá)(P值均0.05);沉默ESRP1基因的表達(dá)能誘導(dǎo)OVCAR5細(xì)胞中FGFR2由上皮亞型(FGFR2b)向間質(zhì)亞型(FGFR2c)的轉(zhuǎn)換,并促進(jìn)OVCAR5細(xì)胞的增殖(P0.05);同時(shí),下調(diào)E-cadherin的表達(dá)水平而上調(diào)N-cadherin的表達(dá)水平,并激活β-catenin(P值均0.05)。結(jié)論:沉默ESRP1基因表達(dá)能誘導(dǎo)OVCAR5細(xì)胞中FGFR2亞型的轉(zhuǎn)換,促進(jìn)OVCAR5細(xì)胞增殖,并誘導(dǎo)OVCAR5細(xì)胞發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),該過程可能涉及Wnt/β-catenin信號(hào)通路。
【作者單位】： 三峽大學(xué)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 卵巢腫瘤 上皮剪接調(diào)節(jié)蛋白 受體 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 型 上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號(hào):81550029) 三峽大學(xué)人才啟動(dòng)基金(編號(hào):KJ2014B064) 湖北省自然科學(xué)基金(編號(hào):2015CFB198) 腫瘤微環(huán)境與免疫治療湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(三峽大學(xué))開放基金課題(編號(hào):2015KZL02) 宜昌市科學(xué)技術(shù)局項(xiàng)目(編號(hào):A16-301-31)~~
【分類號(hào)】：R737.31
【正文快照】： 結(jié)論:沉默ESRP1基因表達(dá)能誘導(dǎo)OVCAR5細(xì)胞中FGFR2亞型的轉(zhuǎn)換,促進(jìn)OVCAR5細(xì)胞增殖,并誘導(dǎo)OVCAR5細(xì)胞發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),該過程可能涉及Wnt/β-catenin信號(hào)通路。4.腫瘤微環(huán)境與免疫治療湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(三峽大學(xué))開放基金課題(編號(hào):20

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 高尚風(fēng),楊蓉,高博,劉惠喜;EXPRESSION AND SIGNIFICANCE OF BASIC FIBROBLAST GWOWTH FACTOR AND FIBROBLAST GROWTH FACTOR RECEPTOR-1 IN OVARIAN EPITHELIAL NEOPLASM[J];Academic Journal of Xi'an Jiaotong University;2003年01期

2 賴慧敏;鄧新糧;薛敏;孫信;;bFGF、FGFR-1在外陰鱗狀上皮增生組織中表達(dá)及意義[J];實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué);2011年01期

3 劉穎娜;李茹;李東至;;應(yīng)用高分辨熔解曲線分析法檢測(cè)FGFR3基因p.R248C突變[J];中國(guó)產(chǎn)前診斷雜志(電子版);2010年02期

4 郭奕斌;潘宏達(dá);郭春苗;潘敬新;趙燕;杜傳書;;雙錯(cuò)配堿基ARMS結(jié)合RE法快速檢測(cè)FGFR3基因的突變超熱點(diǎn)[J];分子診斷與治療雜志;2010年01期

5 劉春忻;;bFGF、FGFR1和FGFR2在子宮內(nèi)膜癌的表達(dá)和臨床意義[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué);2011年08期

6 ;[J];;年期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 劉娜娜;喬杰;;bFGF及FGFR1與PCOS發(fā)病機(jī)制的關(guān)系研究[A];第七次全國(guó)婦科內(nèi)分泌學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 姜海洋;miR-99a靶向調(diào)控FGFR3抑制上皮性卵巢癌細(xì)胞增殖的機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2015年

2 黃璐;miRNA424及其靶基因MEK1和FGFR1在胎兒生長(zhǎng)受限中的作用機(jī)制研究[D];蘇州大學(xué);2013年

，

本文編號(hào)：729885